核酸适配体论文-柳艳,陆峰

核酸适配体论文-柳艳,陆峰

导读:本文包含了核酸适配体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:SERS,膝沟藻毒素,核酸适配体

核酸适配体论文文献综述

柳艳,陆峰[1](2019)在《基于SERS技术的GTX1/4及其核酸适配体相互作用研究》一文中研究指出膝沟藻毒素(gonyautoxin,GTX)作为麻痹性贝类毒素典型代表之一,其在结构上具有多个π平面及丰富的质子供体与受体基团,目前已建立了磁珠和氧化石墨烯的指数富集配基系统进化(SELEX)筛选核酸适配体的技术,获得了GTX1/4的高亲和力、强特异性的核酸适配体(5'-AACCTTTGGTCGGGCAAGGTAGGTT-3'),且适配体的KD值达到了10 nM级。表面增强拉曼光谱(SERS)作为近年来迅速发展的一种技术,具有快速、高灵敏、特征性强的特点,近来因其超高灵敏度和固有的化学指纹信息已经成为核酸快速检测和结构鉴定的强有力的分析工具。本文尝试采用SERS技术对GTX1/4与其适配体相互作用机制进行探讨。本研究在水溶液和Tris缓冲溶液下分别获得核酸适配体(DNA)、DNA与GTX 1/4相互作用的前后的SERS图谱。首先对DNA的G4的折迭方式分析,可知1328cm~(-1)处的峰(dG(C2'-endo/syn))的峰强明显高于1363cm~(-1)处(dG (C2'-endo/anti))的峰强,推测DNA与GTX 1/4作用前后其构象就是平行式G4结构,与元二色谱法测得结果一致。其次,对DNA的G4的稳定性进行分析,1485 cm-1(dG N7(Hoogsteen H-bond))、1580 cm~(-1)(dG N7(Hoogsteen H-bond))与G4稳定性关系成正相关,可知GTX 1/4和Tris缓冲溶液均可以使DNA的稳定性增加,这可能与GTX1/4和DNA的G4部分相结合有关。本研究从实验角度部分揭示海洋生物毒素与核酸适配体亲和力的分子根源,为大规模设计与筛选高亲和力的核酸适配体的提供一定的理论基础。(本文来源于《第二十届全国光散射学术会议(CNCLS 20)论文摘要集》期刊2019-11-03)

高菲,贾兰,陈松[2](2019)在《基于阳离子表面活性剂/核酸适配体的超分子组装体荧光检测Hg(Ⅱ)的研究》一文中研究指出采用带正电的表面活性剂十二烷基叁甲基溴化铵(DTAB)与带负电的Hg(Ⅱ)核酸适配体(5′-TTCTTTCTTCCCTTGTTTGTT-3′),通过静电作用与疏水作用结合为超分子组装体,在组装体中包埋荧光染料尼罗红作为荧光探针。当加入待测物Hg(Ⅱ)后,Hg(Ⅱ)与胸腺嘧啶T形成"T-Hg(Ⅱ)-T"发夹状结构,从而诱导其解组装。利用尼罗红在水环境与疏水腔中荧光强度的不同构建"荧光关"的Hg(Ⅱ)的检测体系。该检测体系对Hg(Ⅱ)的检出限达到5.1×10~(-12) mol·L~(-1),线性检测范围为1.0×10~(-11)~1.0×10~(-10) mol·L~(-1)。其它离子对检测体系的影响可基本忽略不计,检测体系具有良好的选择性。方法可用于自来水中Hg(Ⅱ)的检测,回收率为92%~107%。(本文来源于《分析科学学报》期刊2019年05期)

杨梅,张何,雷湘玲,傅昕,王青[3](2019)在《基于核酸适配体功能化荧光氧化石墨烯的免标记“Turn-off”型Hg~(2+)传感器研究》一文中研究指出利用湿化学法制备出具有一定荧光性能的氧化石墨烯(GO)负载金纳米颗粒(AuNPs)复合材料(GO@AuNPs),并将巯基化单链富T核酸适配体(aptamer)结合在该复合材料的金纳米颗粒表面,形成aptamer功能化氧化石墨烯-金纳米颗粒复合物(aptamer-GO@AuNPs)。当汞离子存在时,由于7个T-Hg~(2+)-T结构的配位作用,aptamer折迭形成刚性的发夹状双链DNA结构,并使Hg~(2+)靠近石墨烯表面(少于1 nm),使得电子可沿着双链DNA通道从石墨烯转移到汞离子,从而猝灭氧化石墨烯的荧光,由此构建了一种基于石墨烯荧光猝灭的"turn-off"型荧光传感器。考察了多种因素对检测体系的影响,在最优实验条件下,此方法对Hg~(2+)的线性检测范围为0.5~80 nmol/L,检出限为0.3 nmol/L。应用于环境水体样品中Hg~(2+)的检测,加标回收率为96.0%~105%,相对标准偏差为1.4%~3.2%。该方法操作简单,有较强的抗干扰能力,灵敏度和选择性高,不需要标记,检测快速,可用于环境水体样品中Hg~(2+)的高灵敏检测。(本文来源于《分析测试学报》期刊2019年10期)

翟蒙,张蕾,袁红霞,田彩平,王维君[4](2019)在《应用双向热循环消减SELEX技术筛选胃癌血清核酸适配体》一文中研究指出胃癌是发病率及死亡率均较高的消化道恶性肿瘤之一,严重威胁人类的生命健康。血清肿瘤标志物的检测对提高早期胃癌的检出率,改善胃癌的治疗有重要的意义。核酸适配体以其灵敏度高、靶向性强等优势显示出了较强的临床适用性。本研究以双向热循环消减指数富集式配基系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术为支持,纳米(琼脂)磁珠材料为载体,胃癌血清及正常人血清为筛选靶标,结合高通量测序技术建立了快速高效的核酸适配体筛选方法。经过19轮双向筛选,获得高重复率的胃癌血清特异性核酸适配体序列10条及正常人血清特异性核酸适配体序列8条。将这些序列分别混合并制成检测试剂A、B,结合实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)技术,对100份临床血清样本进行特异性验证。通过比较分析,建立了快速高效的胃癌血清检测技术。结果显示,核酸适配体G-AP1与N-AP1的二级结构类似于抗体的"Y"型,且呈茎环状。检测试剂A、B对胃癌及正常人血清的检出率分别为92%和88%。表明本技术可以较准确地筛选得到高特异性和强亲和力的核酸适配体,体现了核酸适配体作为新型肿瘤标志物在临床检测及治疗的应用潜力。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2019年10期)

张李钰,刘瑞萍,杨颖,孙宏利,王猛[5](2019)在《基于量子点荧光共振能量转移(FRET)效应的裂开型CD20核酸适配体探针用于非霍奇金淋巴瘤的检测研究》一文中研究指出目的:构建新型的基于量子点荧光共振能量转移效应的裂开型CD20核酸适配体激活式荧光探针用于非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin Lymphoma, NHL)的检测。方法:将CD20核酸适配体CE4-1进行裂解,结合量子点和Cy5荧光供受体队之间的FRET效应,利用流式细胞术,对裂开型核酸适配体的裂开位置、比例、浓度和反应时间进行优化,并在最优条件下评估该检测体系对CD20~+细胞的检测特异性。结果:将CD20核酸适配体CE4-1分别裂开成CE4-1-1a/CE4-1-1b和CE4-1-2a/CE4-1-2b两种组合,分别修饰量子点(QD)或荧光受体Cy5后两两组合,分别与CD20~+细胞孵育,流式细胞术发现CE4-1-1a/CE4-1-2b组合时信号最强;进一步,通过探索两种探针比例、探针浓度、孵育时间等参数,发现当CE4-1-1a和CE4-1-2b浓度比例为1:5、CE4-1-1a浓度为4 nM、孵育时间为50 min时,该裂开型核酸适配体体系显示出对靶肿瘤细胞最强的亲和力和FRET信号激活性能。进一步,实验发现该体系与CD20~+细胞(Raji和Ramos)可产生较强信号,而与CD20-细胞(Jurkat、K562、Min6和Hela)均未产生阳性信号,提示该探针可有效保持对CD20~+细胞的高特异性。结论:基于量子点荧光共振能量转移(FRET)效应的裂开型CD20核酸适配体探针体系在检测CD20~+细胞方面表现出了极低的背景信号,同时有着较好的FRET信号值,有望实现CD20~+NHL细胞的高灵敏激活式检测。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年18期)

高金娥,戴先凯[6](2019)在《基于核酸适配体的电化学法检测铅离子》一文中研究指出目的建立基于核酸适配体的铅离子电化学检测方法。方法铅离子适配体能够与辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的铅离子适配体互补单链DNA形成稳定的结构,当向溶液中加入铅离子时,铅离子适配体与铅离子结合,导致电极上固定的HRP减少。HRP能够催化溶液中双氧水(H202)和对苯二酉酚(hydroquinone quinol,HQ)发生氧化还原反应产生电化学信号。通过电化学信号的改变实现对铅离子的定量检测。结果在铅离子浓度为1.0×10~(-4)~1.0×10~(-1)g/L时,电流与铅离子浓度呈线性关系为I(μA)=-17.678LogC/(g/L)+1.331(r~2=0.995),检测限为9.0×10~(-5)g/L。结论该方法具有操作简单、灵敏度高、特异性好等优点,可用于食品安全检测和分析中铅离子的测定。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年18期)

高金娥,戴先凯[7](2019)在《核酸适配体检测食品中的重金属研究进展》一文中研究指出近些年食品中重金属超标引发很多问题,严重危害人民群众的生命健康和社会稳定。传统重金属检测方法有原子吸收光谱法,原子荧光光谱法和X射线荧光光谱法等,其具有检测灵敏度高,选择性好,检测方法成熟等优点,但是也存在着检测仪器昂贵,前处理复杂,检测所需时间长,不易携带,不能满足快速、简单、现场测定的实际需要等不足。科研工作者一直在不断探索能够快速,灵敏,高效的检测重金属的技术。适配体具有特异性强,灵敏度高,稳定性好等优点,已经成为一种新型识别分子,被广泛应用于食品中重金属的检测。本文综述了近年来适配体在镉、汞、铅、砷等重金属检测领域的研究,并对核酸技术在重金属检测方面进行展望。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年18期)

曾家豫,张蕾,翟蒙,许金苓,袁红霞[8](2019)在《双向热循环消减-SELEX方法筛选肝癌血清核酸适配体》一文中研究指出肝癌位于我国肿瘤死亡率第2位,生存率较低。目前用于肝癌早期诊断的临床检查及血清肿瘤标志物检测的特异性与敏感性均较低,不能满足肝癌早期诊断和治疗的需要。核酸适配体与靶标分子结合的灵敏度高、特异性强,有巨大的临床诊断和治疗应用前景。本文利用双向热循环消减指数富集的配基系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)技术,分别以肝癌血清和健康人血清为靶标,经过19轮筛选,获得了肝癌血清特异性核酸适配体序列1000余条,以及健康人血清特异性核酸适配体序列1 000余条,并从中各挑取了1条高丰度适配体序列,分别命名为Tc1和Tn1。采取了50例肝癌病人血清和50例健康人血清,对适配体Tc1和Tn1与靶标血清的结合特异性进行了检测。结果显示,Tc1和Tn1对两种靶标血清的检出率分别为92%和94%。说明Tc1可特异性与肝癌血清结合,Tn1可特异性与健康人血清结合。肝癌血清特异性核酸适配体的筛选获得,将为建立基于核酸适配体的肝癌血清检测新方法奠定基础。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2019年09期)

张天源,郝红霞,杨瑞琴[9](2019)在《基于核酸适配体/苝酰亚胺的非标记荧光技术检测甲基苯丙胺》一文中研究指出运用能特异性识别甲基苯丙胺的核酸适配体作为识别元件,通过合成水溶性苝酰亚胺衍生物(PBIs)作为荧光探针,构建了一种非标记的适配体荧光检测方法,用于高灵敏度、高选择性检测甲基苯丙胺。当没有靶标甲基苯丙胺时,Exo I将卷曲的适配体降解成寡核苷酸片段,探针PBIs不发生聚集,体系荧光信号基本不变;当甲基苯丙胺存在时,与适配体结合形成稳定结构,从而抵抗了Exo I的降解作用,带负电的适配体/甲基苯丙胺复合物使探针PBIs发生聚集,由于聚集诱导猝灭效应,体系荧光强度骤降。基于以上原理,实现了甲基苯丙胺的高灵敏度、选择性检测。探针PBIs浓度为5μmol/L、适配体浓度0. 8μmol/L、Exo I酶切时间40 min为检测甲基苯丙胺的最佳条件,该方法的检出限为436. 7 nmol/L。(本文来源于《分析试验室》期刊2019年09期)

陈思锐,侯建军,刘细霞,王芳,张婷[10](2019)在《基于核酸适配体的微囊藻毒素LR纳米金生物传感检测方法的建立及其识别机制研究》一文中研究指出目的建立微囊藻毒素-LR(microcystin-LR, MC-LR)的纳米金生物传感比色检测法,并探究核酸适配体截短后对此方法检测效果的影响。方法采用柠檬酸钠还原法制备纳米金,通过优化盐浓度、适配体浓度、适配体与MC-LR的反应时间,建立了MC-LR的纳米金生物传感比色检测法。然后,采用组合型核酸适配体截短策略,探究了截短后的核酸适配体对比色法检测MC-LR的影响。结果 NaCl浓度为0.9mol/L,适配体浓度为0.4μmol/L, MC-LR与核酸适配体的反应时间为10 min时为其最适检测条件。在最适条件下,该方法的目测最低检测限为0.4μg/mL,仪器读数最低检测限为(1.05±0.002)ng/mL,线性检测范围为0~1.1μg/m L。探究得出核酸适配体截短后会影响其对MC-LR的识别活性。结论该方法简单、易行,线性检测范围宽,为小分子危害物核酸适配体的快速鉴定奠定了理论基础,同时,对截短核酸适配体与小分子危害物的识别活性研究提供了技术支撑。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年17期)

核酸适配体论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

采用带正电的表面活性剂十二烷基叁甲基溴化铵(DTAB)与带负电的Hg(Ⅱ)核酸适配体(5′-TTCTTTCTTCCCTTGTTTGTT-3′),通过静电作用与疏水作用结合为超分子组装体,在组装体中包埋荧光染料尼罗红作为荧光探针。当加入待测物Hg(Ⅱ)后,Hg(Ⅱ)与胸腺嘧啶T形成"T-Hg(Ⅱ)-T"发夹状结构,从而诱导其解组装。利用尼罗红在水环境与疏水腔中荧光强度的不同构建"荧光关"的Hg(Ⅱ)的检测体系。该检测体系对Hg(Ⅱ)的检出限达到5.1×10~(-12) mol·L~(-1),线性检测范围为1.0×10~(-11)~1.0×10~(-10) mol·L~(-1)。其它离子对检测体系的影响可基本忽略不计,检测体系具有良好的选择性。方法可用于自来水中Hg(Ⅱ)的检测,回收率为92%~107%。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

核酸适配体论文参考文献

[1].柳艳,陆峰.基于SERS技术的GTX1/4及其核酸适配体相互作用研究[C].第二十届全国光散射学术会议(CNCLS20)论文摘要集.2019

[2].高菲,贾兰,陈松.基于阳离子表面活性剂/核酸适配体的超分子组装体荧光检测Hg(Ⅱ)的研究[J].分析科学学报.2019

[3].杨梅,张何,雷湘玲,傅昕,王青.基于核酸适配体功能化荧光氧化石墨烯的免标记“Turn-off”型Hg~(2+)传感器研究[J].分析测试学报.2019

[4].翟蒙,张蕾,袁红霞,田彩平,王维君.应用双向热循环消减SELEX技术筛选胃癌血清核酸适配体[J].中国生物化学与分子生物学报.2019

[5].张李钰,刘瑞萍,杨颖,孙宏利,王猛.基于量子点荧光共振能量转移(FRET)效应的裂开型CD20核酸适配体探针用于非霍奇金淋巴瘤的检测研究[J].现代生物医学进展.2019

[6].高金娥,戴先凯.基于核酸适配体的电化学法检测铅离子[J].食品安全质量检测学报.2019

[7].高金娥,戴先凯.核酸适配体检测食品中的重金属研究进展[J].食品安全质量检测学报.2019

[8].曾家豫,张蕾,翟蒙,许金苓,袁红霞.双向热循环消减-SELEX方法筛选肝癌血清核酸适配体[J].中国生物化学与分子生物学报.2019

[9].张天源,郝红霞,杨瑞琴.基于核酸适配体/苝酰亚胺的非标记荧光技术检测甲基苯丙胺[J].分析试验室.2019

[10].陈思锐,侯建军,刘细霞,王芳,张婷.基于核酸适配体的微囊藻毒素LR纳米金生物传感检测方法的建立及其识别机制研究[J].食品安全质量检测学报.2019

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