表达HSA/IL2的重组CHO细胞的无血清培养基优化研究

论文摘要

优化适合重组CHO细胞生长及表达人血清白蛋白与白介素2(HSA/IL2)的低成本无血清悬浮培养基。以无血清悬浮培养基M1为基础,考察了3种不同质量浓度(1.0、2.5、5.0、10.0 g/L)的蛋白水解物(酵母提取物(YE)、大豆蛋白胨(Soy)及胰蛋白胨(Tyr))对CHO细胞生长、细胞周期、细胞凋亡及HSA/IL2融合蛋白表达的影响。5 g/L的YE促进细胞生长,提高HSA/IL2表达量的效果最佳。流加培养过程中,在含5.0 g/L YE的培养基中CHO细胞密度可达9.95×10~6cells/mL,HSA/IL2表达量提高至104.06 mg/L,分别是对照组的1.42倍和1.51倍。细胞对数生长期时,YE可以提高细胞周期进展而利于细胞生长;细胞表达期时,YE可以提高细胞G1期比例,延长细胞表达期时间而利于HSA/IL2表达。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 细胞株
•   1.2 主要试剂
•   1.3 细胞培养
•   1.4 分析方法
•     1.4.1 细胞密度及活力的检测
•     1.4.2 融合蛋白质量浓度测定
•     1.4.3 细胞周期测定
•     1.4.4 细胞凋亡测定
•     1.4.5 渗透压测定
•     1.4.6 氨基酸分离测定
• 2 结果与讨论
•   2.1 分批培养筛选最优水解物质量浓度
•   2.2 流加培养过程中水解物对细胞生长及目的蛋白表达的影响
•   2.3 酵母提取物YE促进CHO细胞生长及HSA IL2表达机理的初步探究
•     2.3.1渗透压影响
•     2.3.2 氨基酸影响
•     2.3.3 YE对细胞周期、细胞凋亡的影响
• 3 结语

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 缪亚娜,熊文典,万爱妮,张晶晶,蔡燕飞,陈蕴,金坚

关键词: 细胞,培养基优化,蛋白水解物,细胞周期

来源: 食品与生物技术学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 江南大学药学院,江南大学生物工程学院

基金: 国家863计划项目（2014AA021003）

分类号: TS201.2

页码: 95-101

总页数: 7

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