导读:本文包含了弱毒株论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:病毒,柑橘,鉴定,鸭黄,猪瘟,鼠疫,脑炎。
弱毒株论文文献综述
赵海红,李存香,李翔,吴海生,冯建萍[1](2019)在《Biolog微生物鉴定系统对鼠疫菌弱毒株及其噬菌体耐受株的鉴定比较研究》一文中研究指出目的应用Biolog微生物鉴定系统鉴定比较鼠疫菌弱毒株(614F株)及其耐受菌株(R-2-12、R-2-51和R-2-56)生化、营养等表型特征。方法参照Biolog微生物鉴定系统标准规程A,使用Retro Spect’ s分析软件进行分析。结果利用Biolog微生物鉴定系统Gen III鉴定板检测显示,鼠疫菌614F株及其耐受菌株(R-2-56)不能发酵麦芽糖、密二糖、鼠李糖; 614F株L-脯氨酸反应阳性,而614F株耐受中间代R-2-12、R-2-51株和耐受株R-2-56 L-脯氨酸反应阴性; 614F株氨曲南反应阴性,而614F株耐受中间代R-2-12、R-2-51株和耐受株R-2-56氨曲南反应阳性。结论 614F株与其耐受菌株(R-2-12、R-2-51、R-2-56)比较生化表型无改变,但营养特征(脯氨酸)反应和抗生素(氨曲南)反应有差别。提示鼠疫菌弱毒菌614F株耐受株在耐受过程中营养需求和抗生素的抗性发生改变。(本文来源于《医学动物防制》期刊2019年12期)
陈毅群,易龙,钟可,王长宁[2](2019)在《柑橘衰退病毒弱毒株筛选及防控技术研究进展》一文中研究指出柑橘衰退病是由柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)引起的严重危害柑橘产业的病毒性病害,柑橘衰退病的表现症状主要为茎陷点型和速衰型,其诱发的柑橘衰退病对世界柑橘产业造成了巨大损失,而CTV弱毒株在CTV交叉保护防治中起到重要作用。本文对CTV株系分化、CTV弱毒株筛选和CTV防治方法进行综述,为柑橘衰退病的防治提供参考。(本文来源于《中国植物保护学会2019年学术年会论文集》期刊2019-10-23)
田佳琪[3](2019)在《猪源化脓隐秘杆菌强、弱毒株全基因组测序及HSP100/Clp基因转录水平差异分析》一文中研究指出化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)又名化脓放线菌或化脓棒状杆菌。化脓隐秘杆菌可通过侵染易感动物的黏膜和皮肤诱发化脓性炎症,该菌也可与其他病原菌混合感染。本研究建立的间接ELISA方法可用于调查猪群中化脓隐秘杆菌抗体情况,该方法可作为化脓隐秘杆菌抗体检测的一种新手段。本研究采用二代加叁代测序技术分别对猪源化脓隐秘杆菌强、弱毒株进行全基因组测序,完成了猪源化脓隐秘杆菌强毒株(TP-2849;NZ_CP029004.1)与弱毒株(TP4479;NZ_CP029001.1)的基因岛预测、致病菌毒力因子预测、抗生素抗性基因预测、COG注释、KEGG注释、GO注释与基因组圈图的绘制,以上结果填补了猪源化脓隐秘杆菌全基因组的相关数据。Virulence Factors Database(VFDB)数据库预测结果中发现,猪源化脓隐秘杆菌强、弱毒株中均存在5种HSP100/Clp基因。本研究以猪源化脓隐秘杆菌强毒株TP-2849与弱毒株TP4479对BABL/c小鼠进行攻毒试验,以实时荧光定量PCR检测5种HSP100/Clp基因在BALB/c小鼠的7种脏器组织和血液中的表达量,结果显示,猪源化脓隐秘杆菌强、弱毒株的5种HSP100/Clp基因表达量差异极显着。绘制猪源化脓隐秘杆菌强、弱毒株生长曲线,结果显示,弱毒株的迟缓期长于强毒株;强毒株的稳定期长于弱毒株的稳定期。综上所述,猪源化脓隐秘杆菌毒力的强弱及生长速率的快慢与5种HSP100/Clp基因转录水平表达量有着紧密的联系。(本文来源于《吉林农业大学》期刊2019-05-01)
李闻,马思续,李想通,孙杨杨,魏凤灵[4](2019)在《PRRSV VR2332弱毒株经滴鼻、注射途径接种仔猪的病毒血症和抗体产生的差异分析》一文中研究指出为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)VR2332弱毒株经滴鼻和注射两种途径接种仔猪的病毒血症、抗PRRSV抗体以及抗PRRSV中和抗体的差异,选取20日龄健康仔猪9头,随机分3组,即滴鼻组、注射组和对照组。在感染后第0、3、7、11、15、19、23、27、31、35、39、43天前腔静脉采血,于第43天采血后摘取猪的脾、颌下淋巴结、腹股沟淋巴结和肠系膜淋巴结,并无菌收集猪肺泡巨噬细胞(PAM),通过实时荧光定量PCR方法检测病毒载量。用ELISA方法检测抗PRRSV抗体效价,用基于PAM的中和试验检测抗PRRSV中和抗体效价。结果显示:仔猪感染PRRSV后,①滴鼻组第3天只在2头猪血清中检测到PRRSV,第15-19天病毒血症达到高峰,病毒拷贝数均大于104拷贝·μL-1,第27天后病毒血症消失;注射组第3天从3头仔猪血清中均检测到病毒,在第15-23天病毒血症达到高峰,其中第19天病毒拷贝数大于105拷贝·μL-1,病毒血症从第31天后开始消失。②从几种淋巴结和PAM中均检测到PRRSV,且注射组的PRRSV拷贝数稍高于滴鼻组。③均在第27天从血清中检测到抗PRRSV抗体,随后抗体水平一直处于逐渐上升趋势,且第35-43天,注射组的抗PRRSV抗体水平高于滴鼻组。④滴鼻组在第35天之前抗PRRSV中和抗体效价都小于1∶2,第43天抗PRRSV中和抗体效价为1∶2;注射组在第3、11和19天的抗PRRSV中和抗体效价均小于1∶2,第27、35、43天的中和抗体效价分别为1∶4、1∶8、1∶4。试验结果表明,注射组的病毒拷贝数一直为滴鼻组的10~100倍,且病毒血症持续时间更长;注射组血清中抗PRRSV抗体产生的时间比滴鼻组早,并且抗体水平比滴鼻组高;滴鼻组抗PRRSV中和抗体水平很低,注射组产生的抗PRRSV中和抗体比滴鼻组早且抗体水平高。综上所述,VR2332弱毒株经注射免疫比滴鼻免疫能刺激猪产生更高水平的中和抗体,但同时也会引发更高水平的病毒血症。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2019年02期)
商晓桂,韩志玲,毕力格,高永伟,闫聪[5](2019)在《猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞的克隆和鉴别》一文中研究指出本研究采用有限稀释法将ST细胞进行克隆,将获取的单克隆细胞放大培养后接种猪瘟兔化弱毒株(C株),通过实时荧光定量RT-PCR技术定量检测毒液中病毒含量,筛选对猪瘟兔化弱毒株敏感的细胞株。试验结果获得D3株、C4株、C8株、D5株、E10株、E11株、F9株和H9株共8株ST单克隆细胞。其中,C4株和E11株细胞对C株高度易感,收获毒液RNA拷贝数能够维持在106 copies/mL,并且高峰期毒液拷贝数可达107 copies/mL。(本文来源于《现代畜牧兽医》期刊2019年01期)
张清水[6](2018)在《新发肾致病型鹅星状病毒的分离鉴定及弱毒株选育》一文中研究指出星状病毒属于星状病毒科,为无囊膜、单股正链RNA病毒,广泛存在于人和动物群体中,是引起婴幼儿和幼龄动物腹泻的主要病原之一。家禽星状病毒感染,除引起腹泻和生长不良外,还可导致严重的致死性肝炎和肾炎等疾病。近年来,我国部分地区商品雏鹅群陆续发生高度致死性内脏痛风病,给养鹅业造成了巨大的经济损失。该病以组织脏器及腿部肌肉、关节覆盖大量尿酸盐沉积物为特征,主要感染3周龄以内的雏鹅,感染鹅群死亡率可高达30%。本研究对雏鹅内脏痛风病的致病病原进行了鉴定,同时开展了病原检测及防控方面的研究工作,对有效的防控鹅内脏痛风病具有重大的意义。本研究首先通过细菌学培养排除常见细菌感染,之后采用PCR技术从发病鹅病料中检测到星状病毒基因片段,并在此基础上开展病毒的分离和鉴定工作。将收集的死亡雏鹅病料处理后接种鹅胚,成功分离到一株鹅源星状病毒,并将该分离株命名为AAstV/Goose/CHN/2017/SD01。分离病毒SD01通过口服、滴鼻及皮下注射的方式感染健康雏鹅,可引起与临床病例相似的病症,实验感染雏鹅表现为精神沉郁、采食减少、拉稀等症状,发病率达50%以上,死亡率最高为23%,且存活雏鹅生长发育受到显着影响。RT-PCR检测结果表明,病毒对雏鹅组织有广泛的侵嗜性,感染雏鹅可通过粪便向外界环境持续排毒,排毒期持续12天左右。死亡雏鹅组织学检查可见病毒感染引起肾小管上皮细胞损伤及脑组织非化脓性脑炎,该实验结果最终确诊星状病毒感染是引起雏鹅致死性痛风的病原。为了了解新分病原的基因组结构组成、序列特征及分类地位,本研究对鹅胚繁殖第4代病毒的全基因组序列进行测定。结果表明病毒基因组全长为7175nt,包括5'UTR、3' UTR及ORF1a、ORF1b和ORF2叁个开放阅读框,编码蛋白中含有星状病毒特征性的跨膜域、丝氨酸蛋白酶、核定位信号、核糖体移位信号及RdRp等结构,与经典星状病毒结构一致,同时含有保守氨基酸基序。同源性比较分析发现,SD01分离株与已报道的星状病毒同源性均低于70%;ORF2蛋白遗传距离比较显示该病毒与火鸡2型星状病毒、鸭1型星状病毒相对较近,小于作为星状病毒种间划分依据的0.576-0.741;进化分析显示病毒与火鸡星状病毒、部分鸭星状病毒等禽星状病毒处于同一分支;表明新分鹅源星状病毒与火鸡2型星状病毒等禽星状病毒划分为相同的种,但具有显着的遗传学差异。基于鹅源星状病毒的遗传学和生物学特性,本研究选用杆状病毒表达系统对SD01衣壳纤突蛋白进行表达,利用纯化重组蛋白免疫小鼠制备针对病毒衣壳蛋白的多克隆抗体及特异性的单克隆抗体,并以此为基础,建立了用于病毒抗原的检测和鉴定的间接免疫荧光及免疫组化方法。同时基于几种水禽常见星状病毒保守序列设计引物,建立了可用于水禽常见星状病毒检测的叁重RT-PCR方法及用于鹅源星状病毒检测的荧光定量PCR方法。比较鹅源星状病毒在不同实验室宿主系统中的繁殖状态,选择鹅胚作为最佳的繁殖系统,将SD01在鹅胚中连续传代,选育获得了可在鹅胚中高滴度繁殖的弱毒株。动物感染实验结果显示,病毒传至60代(G-60)已经充分致弱,且在易感雏鹅体内连续传代未出现毒力返强现象。攻毒保护实验结果显示,雏鹅皮下接种5X107拷贝后10天可完全抵抗强毒攻击,保护率可达100%,雏鹅免疫后可产生高水平的中和抗体。对传代病毒全基因组序列进行分析和比较,发现病毒传代过程中共出现8个氨基酸突变,且突变位点主要集中于ORF2蛋白。综上所述,本研究成功分离到一株鹅源星状病毒,并证明该病毒是鹅内脏痛风的主要致病病原;建立了用于星状病毒检测的免疫学、分子生物学方法,并筛选出一株免疫原性好、安全可靠的弱毒疫苗侯选株。为进一步开展雏鹅星状病毒感染及致病机制、疾病诊断和免疫防治奠定了良好的科学基础。(本文来源于《中国农业大学》期刊2018-12-01)
吕俊峰,杨立新,曲胜华,王笑言,张大丙[7](2018)在《鼠传TMUV弱毒株免疫原性的检测》一文中研究指出引言坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)感染是严重危害我国养鸭业的新发传染病~([1])。实验室前期利用TMUV野生毒株PS株,经BHK-21细胞连续传代,获得了第180代细胞毒弱毒疫苗候选株。该毒株对1日龄北京鸭无致病性,但在体内诱导产生的中和抗体水平与野毒株相比下降极显着~([2])。本研究拟选择在小鼠脑内连续传代的方式~([3]),对TMUVPS180株继续传代,以期获得能够刺激机体产生较高水平(本文来源于《中国畜牧兽医学会2018年学术年会禽病学分会第十九次学术研讨会论文集》期刊2018-11-21)
徐洋,尹文林,姚嘉赟,蔺凌云,袁雪梅[8](2018)在《黄颡鱼鲇鱼爱德华氏菌弱毒株的分离、鉴定及免疫原性》一文中研究指出为了研发1种黄颡鱼鲇鱼爱德华氏菌弱毒活疫苗,以开展候选弱毒株的筛选,从湖州地区患"裂头病"的黄颡鱼体内分离到1株细菌,暂命名为AW30726K。应用理化特性及16S rRNA对其进行鉴定,并展开致病性和免疫原性研究。结果显示,AW30726K为鲇鱼爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri),该菌对黄颡鱼(100±2) g的LD50为9. 33×109CFU/mL,不同免疫途径下的活菌免疫保护率为74%~100%,血清抗体效价均在21 d达到峰值,且免疫效果以注射免疫为最佳,而浸泡与口服免疫效果相近。上述研究表明,新分离的AW30726K为鲇鱼爱德华氏菌弱毒株,能有效防御鲇鱼爱德华氏菌的感染,可作为弱毒疫苗的候选株。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2018年20期)
杨伟,韦冠东,汤德元,曾智勇,黄涛[9](2018)在《日本乙型脑炎病毒强、弱毒株非结构蛋白NS1、NS2A和NS1-NS2A诱导小鼠CD4~+T细胞应答的研究》一文中研究指出为了解日本乙型脑炎病毒(JEV)强、弱毒株非结构蛋白的免疫效果,笔者分析了JEV强、弱毒株非结构蛋白NS1、NS2A和NS1-2A真核表达的差异。通过观察JE减毒活疫苗(SA14-14-2株)和JEV贵州分离株(GZ株)分别在BHK-21细胞上出现的CPE,并收集强、弱毒株的细胞悬液,提取总RNA,分别设计6对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增非结构蛋白NS1、NS2A和NS1-2A的编码基因,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-NS1r、pcDNA3.1(+)-NS2Ar、pcDNA3.1(+)-NS1-2Ar、pcDNA3.1(+)-NS1q、pcDNA3.1(+)-NS2Aq和pcDNA3.1(+)-NS1-2Aq,将构建成功的6种真核表达质粒免疫健康小鼠,最后采集小鼠的血液和组织分别进行JEV抗体检测和细胞免疫水平检测。研究结果显示:JEV GZ强毒株与JEV SA14-14-2弱毒株能在BHK21细胞上增殖并产生CPE现象;构建的6种真核表达质粒免疫小鼠后经血常规和T淋巴亚群检测可以极显着或显着增加CD4+和CD8+细胞的含量。表明JEV强毒株非结构蛋白所诱导的细胞免疫略优于弱毒株非结构蛋白诱导的细胞免疫,但差异不明显。本研究结果可为日本乙型脑炎病毒的病原基础研究提供参考。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2018年08期)
赵峰[10](2018)在《江苏省猪流行性腹泻病毒G2b亚型变异株的流行状况调查和致弱毒株的研制》一文中研究指出猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种急性、高度传染性肠道疾病。自1984年起,PEDV G1a亚型一直是引起我国仔猪腹泻的重要病原,给养猪业造成了巨大的经济损失。2010年开始,我国南方多个省份暴发了由PEDVG2b亚型变异毒株引起的仔猪腹泻,并迅速蔓延至全国。与经典的G1a亚型毒株相比,新出现的G2b亚型毒株致病性更强。由于G1a亚型疫苗株CV777不能针对G2b亚型变异毒株提供有效的保护,因此迫切需要研制G2b亚型变异毒株疫苗。本研究调查了 2015~2017年间江苏省部分规模化猪场PEDV G2b亚型变异株的流行状况,并对本实验室分离鉴定的1株G2b亚型变异株进行传代致弱,为进一步研制弱毒疫苗奠定了基础。1、江苏省2015~2017年PEDV G2b亚型变异株的流行状况调查2015~2017年间,从江苏省发生仔猪腹泻的规模化猪场收集临床病料176份,通过实时荧光定量PCR方法从中检测出19份PEDV阳性。对这19份阳性病料中的PEDV进行分离鉴定,成功分离到1株G2b亚型毒株(命名为PED-JS-2016-05-4)。以PCR从19份PEDV阳性病料中扩增PEDV的纤突蛋白(S)基因,测序和遗传进化分析,发现其中17份为G2b亚型变异株,另外2份为G1b亚型毒株。检测到的G2b亚型变异株与国内外报道的G2b亚型变异株的S基因核苷酸同源性高达98.5~99.7%;与G1a亚型疫苗株CV777及其他毒株亲缘关系比较远,S基因核苷酸同源性为93.6~94.3%。检测到的2个G1b亚型毒株与在美国最早发现的该亚型代表毒株OH851的S基因核苷酸同源性高达99.5%;与G1a亚型毒株S基因核苷酸同源性只有95.6~96.8%。研究表明,当前江苏省主要流行的PEDV毒株为G2b亚型变异株。本研究检测到的G2b亚型变异株与CV777疫苗毒株在S蛋白中和表位区存在较多的氨基酸差异,并且主要集中在COE中和表位区,在SS6中和表位区只存在1个突变,SS2和2C10中和表位区没有突变。此外,通过CBS在线软件包进行S蛋白潜在糖基化位点预测发现,与CV777疫苗毒株相比,17株G2b亚型变异株具有6个相同的潜在糖基化位点突变,其中3个位点氨基酸突变(N57V,N127I,T232I)导致对应部位的潜在糖基化位点缺失,而另外3个氨基酸位点突变(S59N,I116T,T1193N)产生了新的潜在糖基化位点。与CV777相比,2株G1b亚型毒株只有1个潜在糖基化位点存在差异,即1193位氨基酸由T突变为N产生了一个新的潜在糖基化位点。2、PEDV G2b亚型变异株JSX2014的致弱研究选取实验室前期分离鉴定的PEDV G2b亚型变异株JSX2014进行致弱研究,以期培育弱毒疫苗株。JSX2014毒株在Vero细胞连续传代后产生的典型CPE为:细胞肿胀、变圆,细胞单层形成网眼状并逐渐崩解脱落。JSX2014毒株在细胞上可以形成大小不同的空斑,推测与不同代次病毒的复制能力有关。为了筛选到复制能力较好的毒株,在传代过程中分别挑取形态大小差异明显的空斑,进行空斑纯化,通过测定TCID50来评价不同空斑克隆株的复制能力。结果表明,大空斑克隆株复制能力显着优于小空斑克隆株。因此,多次挑取大空斑进行克隆化,连续传代至130代,获得的毒株命名为JSX2014/ATT。选取未吸吮母乳的3日龄初生仔猪对JSX2014/ATT进行致病性试验,每只仔猪肌肉注射2 ×107TCID50的病毒。每天观察是否有呕吐和腹泻等临床症状,并采集肛拭子以及血液进行PEDV检测。5 d后处死仔猪,对肠管进行组织病理学检查。结果显示,感染仔猪未出现腹泻相关的临床症状;仅在第1 d血液中检测到PEDV,肛拭子中不能检测到PEDV;仔猪肠组织结构完整,肠绒毛未发生萎缩、脱落,表明JSX2014/ATT株已经致弱。对JSX2014/ATT株的全基因组进行测序,并且与原始的JSX2014株作了比较。两者在S基因上共有11个核昔酸发生突变,E和N基因都只有一个核苷酸发生突变,M基因除了 2个核苷酸的突变外还有1个15 nt的插入。非结构基因的突变主要集中在ORF1ab上,共有13个核苷酸发生突变,ORF3在第14位核苷酸插入一个T而导致翻译提前终止。综上所述,江苏省近期的PEDV流行毒株为G2b亚型变异株,同时也存在少量G1b亚型毒株。通过Vero细胞连续传代结合病毒空斑纯化技术,成功致弱了一株PEDV G2b亚型变异株,为进一步研制弱毒活疫苗奠定了基础。(本文来源于《扬州大学》期刊2018-06-01)
弱毒株论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
柑橘衰退病是由柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)引起的严重危害柑橘产业的病毒性病害,柑橘衰退病的表现症状主要为茎陷点型和速衰型,其诱发的柑橘衰退病对世界柑橘产业造成了巨大损失,而CTV弱毒株在CTV交叉保护防治中起到重要作用。本文对CTV株系分化、CTV弱毒株筛选和CTV防治方法进行综述,为柑橘衰退病的防治提供参考。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
弱毒株论文参考文献
[1].赵海红,李存香,李翔,吴海生,冯建萍.Biolog微生物鉴定系统对鼠疫菌弱毒株及其噬菌体耐受株的鉴定比较研究[J].医学动物防制.2019
[2].陈毅群,易龙,钟可,王长宁.柑橘衰退病毒弱毒株筛选及防控技术研究进展[C].中国植物保护学会2019年学术年会论文集.2019
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[10].赵峰.江苏省猪流行性腹泻病毒G2b亚型变异株的流行状况调查和致弱毒株的研制[D].扬州大学.2018