单增李斯特菌srtA基因缺失株的构建及srtA基因对其毒力的影响研究

论文摘要

为了研究srtA基因对单增李斯特菌LM90SB2毒力的影响,本研究利用同源重组技术构建了LM90SB2 srtA基因缺失株LM90SB2-?srt A,比较分析了亲本株LM90SB2与缺失株LM90SB2-?srt A对MBMEC、HBMEC、RAW264.7、SIEC 4种细胞系的粘附、侵袭、胞内增值能力及LM90SB2和LM90SB2-?srt A感染小鼠后,小鼠的LD50及肝脏、脾脏、脑载菌量变化差异。结果显示,本研究成功构建了srt A基因缺失株;与亲本株LM90SB2比较,缺失株LM90SB2-?srt A对RAW264.7和SIEC的粘附率、侵袭率及胞内细菌数量均下降,且差异具有显著统计学意义（p<0.05）;小鼠LD50降低了21.38倍,肝脏、脾脏载菌量降低,差异具有显著统计学意义（p<0.05）。本研究结果表明,srt A基因对单增李斯特菌LM90SB2的毒力具有关键作用,参与粘附、侵袭BMEC,该研究结果为进一步阐明单增李斯特菌毒力因子的致病机制提供理论依据。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 菌株、质粒、细胞
•     1.1.2 主要试剂
•     1.1.3 实验小鼠
•     1.1.4 相关引物
•   1.2 方法
•     1.2.1 srtA基因的克隆与分析
•     1.2.2 LM90SB2-?srtA缺失株的构建
•     1.2.3 细胞侵染实验
•       1.2.3. 1 细胞和细菌的培养
•       1.2.3. 2 细菌对细胞的粘附与侵袭
•       1.2.3. 3 细菌在细胞内的增殖
•     1.2.4 小鼠毒力实验
•     1.2.5 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 LM分离株LM90SB2 srtA基因的扩增与分析
•   2.2 LM90SB2 srtA基因缺失株的构建
•   2.3 LM分离株LM90SB2和缺失株LM90SB2-?srtA对不同种类细胞的感染能力分析
•   2.4 srtA基因的缺失对小鼠致病能力的影响
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张奇文,凌晨,吴学林,马勋,薄新文

关键词: 单增李斯特菌,基因,毒力,粘附,侵袭

来源: 中国动物传染病学报 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 石河子大学动物科技学院,天康生物股份有限公司,新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室

基金: 国家自然科学基金项目(31360614),人力资源和社会保障部留学回国人员科技活动项目(RSLX201302)

分类号: S852.61

页码: 23-31

总页数: 9

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