基于模块化优化策略强化大肠杆菌合成血红素

论文摘要

血红素是一种参与生物体内的氧分子传递的含铁辅基,也是一种良好的补血剂。目前有关血红素合成途径的研究较少,其调控机理尚不清楚。采用模块化组装策略,将ALA合成关键基因hemA、hemL分为第一模块,用高拷贝质粒pUC19过量表达;将血红素合成途径的7个基因分成第二、第三模块,其中,基因hemB、hemC、hemD和hemE为第二模块;基因hemF、hemG和hemH为第三模块,利用拷贝数不同的质粒pRSFDuet-2、pCDFDuet-2和pACYCDuet-2调控第二、第三模块中各基因的表达水平,对这2个模块进行组合表达。其中重组菌株Escherichia coli-D6在摇瓶发酵48 h时血红素产量最高,达到0.56μmol/（L·OD）;在3 L发酵罐中进行分批培养,发酵48 h时血红素产量达到0.954μmol/（L·OD）。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 菌株与质粒
•     1.1.2 主要试剂和工具酶
•     1.1.3 培养基
•   1.2 方法
•     1.2.1 血红素合成途径2个模块的相关表达载体构建
•     1.2.2 大肠杆菌合成血红素相关重组工程菌株的构建
•     1.2.3 菌株培养条件
•     1.2.4 分析方法
• 2 结果与讨论
•   2.1 血红素合成途径分析与模块化构建
•   2.2 血红素合成途径优化与血红素的强化
•   2.3 血红素分批发酵
• 3 结语

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 翁焕娇,丁雯雯,石雅南,李江华,康振

关键词: 血红素,氨基乙酰丙酸,模块化组合,代谢流量

来源: 食品与生物技术学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院

基金: 国家自然科学基金项目（31670092）,江苏省自然科学基金项目（BK20141107）,江苏省科技支撑计划项目（BE2014607）,教育部长江学者和创新团队发展计划项目（IRT_15R26）

分类号: TS264.4

页码: 86-94

总页数: 9

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