导读:本文包含了主壶腹腺论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,文库,蜘蛛,基因,序列,论文,技术。
主壶腹腺论文文献综述
贾秋品,温睿,李雪,孟清[1]（2019）在《大腹园蛛主壶腹腺蛛丝蛋白末端结构域的克隆表达》一文中研究指出牵引丝(dragline silk)由主壶腹腺蛛丝蛋白(major ampullate spidroin, MaSp)组成,是蜘蛛丝中强度最好的丝,同时具有极佳的生物相容性和可降解性,因此引起研究者的研究热潮。目前关于大腹园蛛MaSp结构和成丝机理方面的研究甚少,限制了其仿生应用。本文以大腹园蛛牵引丝的组成蛋白质之一MaSp1为研究对象,通过锚定PCR的方法首次获取了大腹园蛛MaSp1 NT的完整编码基因,并对其进行了克隆、表达、纯化,产量可达60 mg/L;同时对该MaSp1的CT进行表达纯化,产量可达80 mg/L。另外,通过CD色谱分析了MaSp1 NT和CT的二级结构,结果表明二者的二级结构均以α-螺旋为主。上述结果为大腹园蛛MaSp1的结构和成丝机理研究奠定了基础。(本文来源于《生命科学研究》期刊2019年03期）
张雪,陈格飞,孟清[2]（2015）在《大腹园蛛主壶腹腺丝基因的筛选及序列分析》一文中研究指出为研究蛛丝蛋白编码基因和蛋白的组成结构模式、进化,并为蛛丝仿生提供更多的基因资源,运用3D/PCR(three-dimensional polymerase chain reaction)技术对大腹园蛛(A.ventricosus)Fosmid基因组文库进行主壶腹腺丝(MaSp1)编码基因的筛选,并对部分序列进行分析.通过筛选实验室前期构建的Fosmid文库获得含有MaSp1基因的阳性克隆Av11-19-5,通过shotgun测序得到MaSp1部分基因序列MaSp1RC.MaSp1RC长786bp,编码的262个氨基酸(AvMaSp1RC)可划分为保守的C端非重复区(CT)和重复区(Rep).Rep主要由poly-Ala,Glyx和GlyGlyx等模块组成,Ala和Gly含量占总氨基酸的78%;CT中参与形成离子键的氨基酸及helix 4上的疏水模块高度保守.研究结果为蛛丝蛋白二聚化及仿生学研究提供了更多的基因资源.(本文来源于《东华大学学报(自然科学版)》期刊2015年01期）
任立松[3]（2005）在《大腹园蛛主壶腹腺丝蛋白基因筛选及cDNA5′端部分序列克隆及分析》一文中研究指出本研究在本室筛选的大腹园蛛(Araneus ventricosus)主壶腹腺(Majorampullate gland)基因AvF1 的基础上设计探针,构建噬菌体文库并从中筛选出1个丝蛋白基因AvF1h;直接以总RNA为模板合成cDNA,加Poly(dC)尾,设计锚定引物,以AvF1h 近5′端为模板合成下游引物,利用5′RACE原理,进行未端扩增,获得1 个丝蛋白基因AvF1s;依据CherylY. Hayashiand Randolph V. Lewis 发表的flag5 鞭毛腺cDNA5′端序列(NCBIAF027972)特征设计上下游引物,进行PCR 扩增,得到丝蛋白基因AvFU5。利用BLAST 软件在NCBI 已知序列数据库中检索分析同源性。结果显示,从文库中筛选的基因AvF1h 全长720bp,编码区625bp,预测氨基酸分子量为18990.94dal,与AvF1 的最大相似性为99%,仅有一个碱基的差异,推断该基因为AvF1 的一个片段。AvF1s 全长403bp,编码区402bp,预测氨基酸分子量19337.22dal, AvF1s 与AvF1 的相似性达到86%,具有典型的蛛丝蛋白特有的重复结构特征,是丝蛋白cDNA5′旁侧区部分重复序列,推断为一个新基因,申请NCBI 序列号为AY940091。AvFU5 全长725bp,编码区708bp,预测氨基酸分子量为22025.88dal,检索分析没有与AvFU5 同源性较高的序列,同时该基因具有蛛丝蛋白基因5′端序列特征及重复结构,推断为一个新基因,申请NCBI 序列号为AY945306。根据所获得的叁个基因片段,以及蛛丝蛋白基因的重复特征,对大腹园蛛丝蛋白基因全长进行预测,预测基因AvSF1,全长10624bp,编码氨基酸3478个,分子量为266695.77dal,申请NCBI 序列号为:DQ001900。目前国内尚未有蛛丝蛋白基因全长的报道,对该基因全长的预测为进一步研究丝蛋白基因特征,提供大腹园蛛丝蛋白基因背景和进一步研究蛛丝蛋白奠定了基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2005-04-25）
任洪林,柳增善,潘风光,赵君,李延松[4]（2002）在《大腹圆蛛主壶腹腺cDNA文库构建和丝蛋白基因筛选》一文中研究指出首次通过反转录 -置换法和使用pUC18质粒成功构建大腹圆蛛 (Araneusventricosus)主壶腹腺 (majorampullategland)cDNA基因文库 ,并以鸟枪法从中筛选出具有典型重复结构的大腹圆蛛主壶腹丝蛋白cDNA基因AvF1,大小为 174 4bp ,编码区为15 72bp ,编码氨基酸 5 2 4个 ,分子量为 4 2 4 89 5 5Da,典型的重复结构为(GGP)nGGX。与现有已知的蛛丝蛋白基因中叁带金蛛 (Argiopetrifas ciata)鞭毛样丝基因 (AtfF)有最高的同源性 6 9 3%。大腹圆蛛主壶腹腺cDNA文库的构建和蛛丝蛋白新基因的克隆 ,为提供大腹圆蛛蛛丝蛋白基因背景和进一步研究蛛丝蛋白奠定了基础。(本文来源于《生物技术》期刊2002年05期）
任洪林[5]（2002）在《大腹园蛛主壶腹腺cDNA文库构建和丝蛋白基因筛选》一文中研究指出本研究在国内外首次构建了大腹园蛛(Araneus ventricosus)主壶腹腺(Major ampullate gland)cDNA文库，并以鸟枪法从中筛选出两个蛛丝蛋白和一个非丝蛋白cDNA新基因。首先剥离大腹园蛛主壶腹腺，提取总RNA和分离纯化mRNA，反转录合成cDNA，凝胶层析除去小于400bp片段，并在双链cDNA两端引入EcoRⅠ的衔接头，对其进行磷酸化处理。同时以EcoRⅠ酶切消化pUC18质粒DNA，CIAP对载体5′端去磷酸化处理。将cDNA与载体连接，并导入DH5α感受态细胞中，构建成cDNA文库。以海选的方式从中筛选具有典型丝蛋白基因重复序列特点的大腹园蛛蛛丝蛋白基因。利用BLAST软件在NCBI已知序列数据库中检索分析同源性。试验结果，该文库容量为4.9×10~6。从文库中筛选到AvF1和AvF2蛛丝蛋白新基因，具有典型重复序列多，G／C含量高，密码子第叁个碱基偏爱使用A／T及编码蛋白中含有大量Gly和Ala残基等特点。AvF1序列1744bp，编码区1572bp，编码氨基酸524个，分子量为42489.55dal。其典型重复结构是(GGP)_nGGX。与现有已知的蛛丝蛋白基因中叁带金蛛(Argiope trifasciata)鞭毛样丝基因(AtfF)有最高的同源性69.3％。AvF2序列1408bp，编码区为1288bp，编码氨基酸429个，分子量为34070.35dal。其典型重复结构为(GA)_nA_m(GA)_N。与现有已知的蛛丝蛋白基因中十字园蛛(Araneus diadematus)丝蛋白基因ADF1有最高的同源性69.3％。还筛选到非丝蛋白基因Avg1，序列长1253bp，编码区1002bp，编码334个氨基酸，分子量为36953.00dal。NCBI检索未见同源性高的基因序列，但发现含有典型的肽酶结构域，编码蛋白与组织蛋白酶B结构域部分一致性高达90％，其具体功能有待于进一步验证。大腹园蛛主壶腹腺cDNA文库的构建和两个蛛丝蛋白新基因的克隆，为提供大腹园蛛蛛丝蛋白基因背景和进一步研究蛛丝蛋白奠定了基础。(本文来源于《中国人民解放军军需大学》期刊2002-05-01）
主壶腹腺论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为研究蛛丝蛋白编码基因和蛋白的组成结构模式、进化,并为蛛丝仿生提供更多的基因资源,运用3D/PCR(three-dimensional polymerase chain reaction)技术对大腹园蛛(A.ventricosus)Fosmid基因组文库进行主壶腹腺丝(MaSp1)编码基因的筛选,并对部分序列进行分析.通过筛选实验室前期构建的Fosmid文库获得含有MaSp1基因的阳性克隆Av11-19-5,通过shotgun测序得到MaSp1部分基因序列MaSp1RC.MaSp1RC长786bp,编码的262个氨基酸(AvMaSp1RC)可划分为保守的C端非重复区(CT)和重复区(Rep).Rep主要由poly-Ala,Glyx和GlyGlyx等模块组成,Ala和Gly含量占总氨基酸的78%;CT中参与形成离子键的氨基酸及helix 4上的疏水模块高度保守.研究结果为蛛丝蛋白二聚化及仿生学研究提供了更多的基因资源.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
主壶腹腺论文参考文献
[1].贾秋品,温睿,李雪,孟清.大腹园蛛主壶腹腺蛛丝蛋白末端结构域的克隆表达[J].生命科学研究.2019
[2].张雪,陈格飞,孟清.大腹园蛛主壶腹腺丝基因的筛选及序列分析[J].东华大学学报(自然科学版).2015
[3].任立松.大腹园蛛主壶腹腺丝蛋白基因筛选及cDNA5′端部分序列克隆及分析[D].吉林大学.2005
[4].任洪林,柳增善,潘风光,赵君,李延松.大腹圆蛛主壶腹腺cDNA文库构建和丝蛋白基因筛选[J].生物技术.2002
[5].任洪林.大腹园蛛主壶腹腺cDNA文库构建和丝蛋白基因筛选[D].中国人民解放军军需大学.2002
论文知识图
