导读:本文包含了人脑胶质母细胞瘤论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:胶质,细胞,人脑,肿瘤,血管,蛋白,细胞株。
人脑胶质母细胞瘤论文文献综述
蒋迎娣,殷莹,浦浙宁,张博,龚玲丽[1]（2019）在《人脑胶质母细胞瘤细胞系U87的单克隆细胞构建及异质性研究》一文中研究指出目的人胶质母细胞瘤细胞细胞系U87被作为胶质母细胞瘤(GBM)异质性研究的模型,但从基因水平探讨其异质性来源的研究较少。文章旨在构建人胶质母细胞瘤细胞系U87单克隆细胞株,检测不同单克隆细胞株的表型和遗传背景差异,并探讨产生表型差异的分子机制。方法利用小分子荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)作为筛选标记,有限稀释法构建U87单克隆细胞株,并挑选具有典型形态特征的2株单克隆化细胞,经短串联重复序列(STR)鉴定后进行后续研究。采用CCK-8、EdU掺入法增殖实验和和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;肿瘤干细胞成球实验检测细胞成球能力;免疫荧光和CCK-8法黏附实验检测细胞黏附能力;3D侵袭实验检测细胞侵袭能力;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞对化疗药物的敏感性;转录组测序(RNA-seq)对细胞进行测序及生物信息学分析;qRT-PCR验证富集通路中代表性差异基因mRNA表达量。结果构建了形态较为均一U87单克隆细胞株CF5和G11。其中CF5小而短粗,G11大而细长。CCK-8增殖实验结果显示,CF5细胞增殖能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.001)。EdU掺入法增殖实验结果显示,CF5 EdU阳性细胞比例(0.54±0.05)较G11细胞(0.35±0.03)、U87(0.44±0.03)明显增加,U87较G11明显增强(P<0.01)。肿瘤干细胞成球实验显示,CF5干细胞成球能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.01)。免疫荧光法黏附实验显示,黏附1 h后G11黏附面积较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.001)。3D培养侵袭实验结果显示,G11细胞侵袭能力较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.05)。交互分析发现CF5相对G11和U87均下调的基因159个,均上调的基因303个;G11相对CF5和U87均下调的基因有281个,上调的基因则有116个;通路富集分析显示CF5和G11在细胞外基质相关的通路有最高的富集度,细胞外基质相关通路与肿瘤侵袭、耐药等功能表型密切相关。结论成功构建从形态、功能表型到基因背景具有显着差异的U87单克隆细胞株CF5、G11,为研究GBM异质性和基因功能奠定了基础。(本文来源于《医学研究生学报》期刊2019年11期）
李倩[2]（2019）在《长链非编码RNA HULC沉默表达对人脑胶质母细胞瘤细胞增殖、侵袭的影响》一文中研究指出背景和目的:胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)是大脑中最常见的原发性恶性肿瘤,其自身较强的增殖能力和侵袭性是其成功治疗的主要障碍。目前临床采用手术、放疗、化疗和生物治疗等综合治疗手段,但患者生存期改善不明显,预后仍很差,中位生存期14月左右~([1])。目前研究认为,寻求特异性针对胶质母细胞瘤增殖和侵袭机制的治疗方案,将有可能遏制肿瘤的生长,延长患者的生存期。近年相关研究发现,长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,LncRNA)在多种肿瘤中存在显着的表达改变,参与肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭转移、自噬及化疗敏感性等生物学行为的调节,在肿瘤的发生进展中发挥重要作用,有可能成为在GBM侵袭、预后的分子标记物,将为临床肿瘤的靶向治疗提供依据~([2])。肝癌高表达转录本(highly up-regluated in 1iver cancer,HULC)是LncRNA的一种,被发现在多种恶性肿瘤中表达上调,但其与GBM之间的研究较少,作用机制尚不清楚。众所周知,在肿瘤细胞增殖凋亡侵袭等一系列复杂的行为过程中有多种蛋白进行参与,其中PI3K/AKT信号通路在癌细胞增殖、凋亡、侵袭过程中发挥重要作用~([3,4])。结合本课题组生物信息学预测,HULC可能通过粘着斑激酶(Focal Adhesion Kinase,FAK)调控PI3K-AKT信号通路上及下游靶蛋白的表达来发挥生物学功能,影响着胶质母细胞瘤细胞增殖及侵袭等生物学行为。故本实验以胶质母细胞瘤细胞SHG44和U87细胞株为研究对象,通过细胞功能及分子机制实验,试图探讨LncRNA HULC是否通过FAK激活PI3K-AKT信号通路促进胶质母细胞瘤细胞的增殖和侵袭。方法:1.培养人胶质母细胞瘤细胞SHG44和U87,通过HULC慢病毒干扰载体构建技术获得HULC沉默表达组及其阴性对照组的稳转细胞株;2.通过CCK8细胞增殖实验、平板克隆形成实验、细胞周期及细胞凋亡实验检测两组细胞的增殖及凋亡能力;3.通过细胞划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测两组细胞的迁移及侵袭能力;4.通过qRT-PCR检测两组细胞中HULC的表达水平;Western blot检测PI3K-AKT信号通路上下游靶蛋白(FAK、PI3K、AKT、PTEN)的表达水平。结果:1.增殖和凋亡实验结果示HULC沉默表达组细胞增殖率较低,克隆形成率较少,早期凋亡率较高,G1期细胞较多,S期细胞数较少,提示HULC促进细胞增殖并抑制其凋亡;2.侵袭和迁移实验结果示HULC沉默表达组细胞穿孔细胞数较少,迁移速度较慢,提示HULC促进细胞的侵袭和迁移;3.qRT-PCR结果示沉默表达组的HULC表达量显着降低,即HULC沉默表达稳转细胞系构建成功;4.Western blot检测方法结果示FAK、PI3K、AKT蛋白表达明显减少,PTEN蛋白的表达较高,提示HULC可通过调控PI3K-AKT信号通路上下游靶蛋白的表达水平来发挥生物学功能。结论:lncRNA HULC可能通过FAK激活PI3K-AKT信号通路促进胶质母细胞瘤细胞的增殖和侵袭。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2019-03-01）
李倩,尹恬恬,胡宇辰,吴景,张敏[3]（2019）在《长链非编码RNA HULC沉默表达对人脑胶质母细胞瘤细胞SHG44增殖和凋亡的影响》一文中研究指出【目的】探讨长链非编码RNA肝癌高表达转录本(LncRNA HULC)沉默表达对人脑胶质母细胞瘤细胞株SHG44增殖和凋亡的影响。【方法】实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证HULC沉默表达组(HULC-siRNA)及其阴性对照组(NC组)HULC的表达水平。CCK8增殖实验和平板克隆形成实验检测瘤细胞的增殖能力。细胞周期和细胞凋亡实验检测瘤细胞的周期分布及凋亡能力。【结果】qRT-PCR证实HULC-siRNA组较NC组的HULC表达量显着降低(P=0.003)。CCK8增殖实验显示HULC-siRNA组较NC组细胞增殖率显着降低(第2天P=0.003;第3天P=0.005;第4天P=0.009)。平板克隆形成实验显示NC组和HULC-siRNA组的克隆形成率分别为(34.11±1.24)%,(14.44±0.87)%,沉默表达HULC后细胞克隆形成率显着降低(P<0.001)。细胞周期实验显示NC组和HULC-siRNA组的细胞数分别为G1期(36.89±4.09、51.74±0.68),S期(46.95±2.49、36.89±2.13),沉默表达HULC后细胞周期明显被阻滞在G1/S期(G1期P=0.023,S期P=0.038)。细胞凋亡实验显示NC组和HULC-siRNA组的早期凋亡率分别为(2.57±0.22)%,(7.063±0.71)%,沉默表达HULC后细胞早期凋亡率显着增加(P=0.004)。【结论】LncRNA HULC沉默表达后可抑制胶质母细胞瘤细胞的增殖,促进其凋亡。(本文来源于《中山大学学报(医学版)》期刊2019年01期）
黄昌林,陈典刚,朱虹帆,汤金梁,王东林[4]（2019）在《抑制LITAF基因对人脑胶质母细胞瘤U251细胞增殖、凋亡和放疗敏感度的影响》一文中研究指出目的分析人脑胶质母细胞瘤组织中LITAF基因mRNA表达情况,并通过抑制人脑胶质母细胞瘤U251细胞中LITAF基因表达,观察其对U251细胞增殖、凋亡和放疗敏感度的影响。方法分析TCGA数据库中人脑胶质母细胞瘤组织中LITAF基因mRNA表达;通过RNAi抑制U251细胞中LITAF基因表达,采用胸腺嘧啶核苷类似物(EDU)检测U251细胞增殖变化,流式细胞仪分析U251细胞凋亡的变化,克隆形成实验和流式细胞分析U251细胞放疗敏感度的变化。结果 TCGA数据库分析结果显示人脑胶质母细胞瘤组织LITAF表达显着高于正常脑组织;抑制LITAF表达后,U251细胞的增殖和凋亡未见明显变化,但在电离辐射后,LITAF抑制组U251细胞凋亡显着低于对照组,克隆形成显着高于对照组,对放疗敏感度减弱。结论 LITAF基因高表达于人脑胶质母细胞瘤组织,抑制人脑胶质母细胞瘤U251细胞中LITAF基因表达不影响细胞的增殖和凋亡,但显着降低细胞的放疗敏感度。(本文来源于《肿瘤防治研究》期刊2019年02期）
郭彩丽,郭高超,黄强,张振中[5]（2018）在《核因子-κB抑制物激酶ε促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展的实验研究》一文中研究指出目的探讨核因子-κB抑制物激酶ε(IKKε)通过IKKε-Yes相关蛋白1(Yap1)-miR-Let-7b/i途径促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展的具体作用机制。方法构建IKKε短发夹核糖核酸(shRNA)慢病毒及YAP1小干扰RNA(siRNA)。以IKKεshRNA慢病毒转染U87-MG细胞,下调细胞中IKKε的表达水平。通过RT-PCR及Western blot检测细胞中IKKε、YAP1及miR-Let-7b/i的表达;通过Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力的变化。以YAP1 siRNA转染U87-MG细胞株,下调细胞中YAP1的表达水平。通过RT-PCR及Western blot检测细胞中YAP1及miR-Let-7b/i的表达。结果与对照组和无义序列组相比较,转染IKKεshRNA组IKKε蛋白及mRNA水平明显降低;YAP1蛋白水平明显降低;miR-Let-7b/i水平明显升高;穿过小室细胞数明显降低(P均<0.05)。与对照组和无义序列组相比较,转染YAP1 siRNA组YAP1蛋白及mRNA水平明显降低;miR-Let-7b/i水平明显升高(P均<0.05)。结论 IKKε可以通过IKKε-YAP1-miR-Let-7b/i途径促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展,有望为人胶质母细胞瘤的治疗提供新的治疗策略。(本文来源于《肿瘤基础与临床》期刊2018年06期）
宋洪旺,王鹏斐,孔令伟,邢攸学,闫长祥[6]（2018）在《成人脑胶质母细胞瘤术前非影像学预后危险因素综合评估》一文中研究指出目的综合脑胶质母细胞瘤(GBM)术前非影像学危险因素评估预后。方法回顾性分析159例脑GBM病人术前非影像学因素对总生存期(OS)的影响,对性别、发病年龄、术前KPS评分、血小板与淋巴细胞比(PLR)、肿瘤部位、肿瘤最大直径等因素行Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析,并利用回归系数计算预后指数(PI),利用Cutoff Finder网页工具求PI界值划分高危、低危组,并对两组病人的OS进行统计学分析。结果术前KPS评分(RR=1.78)、PLR(RR=1.68)、年龄(RR=1.45)是影响GBM病人预后的独立危险因素(P<0.05)。PI界值为2.25,PI>2.25为高危组,PI≤2.25为低危组,两组OS差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PI计算简单易于推广,对GBM病人具有较高的预后预测价值。(本文来源于《中国微侵袭神经外科杂志》期刊2018年09期）
高树梓,安德柱,李佳岩,鲍洪,张喜平[7]（2018）在《PP4C在人脑胶质细胞瘤组织中表达及其临床病理特征相关性》一文中研究指出目的:探究蛋白磷酸酶4催化亚基(PP4 C)在人脑胶质细胞瘤组织中的表达及其与临床病理特征相关性。方法:收集手术切除的新鲜胶质瘤标本65例,均经细胞学或组织病理学证实;另收集经颅脑手术治疗的脑外伤或脑出血内减压切除的正常脑组织20例作为正常对照。通过免疫组织化学染色检测所有脑组织标本中PP4 C蛋白的表达。分析胶质瘤标本、正常脑组织标本PP4 C蛋白阳性表达程度;收集和整理胶质瘤病人的人口学特征资料、病理特征资料,并分析其与PP4 C表达的关系。结果:胶质瘤、正常脑组织PP4 C蛋白阳性表达程度分布比较有统计学意义(P<0.05),胶质瘤标本PP4 C蛋白高表达率为64.62%,显着高于正常脑组织标本的10.00%(P<0.05)。与低PP4 C蛋白表达相比,高PP4 C蛋白表达的胶质瘤病人中,星形细胞瘤、病灶≥3 cm、Ⅲ~Ⅳ级的病人占比显着高,二者在病理类型、病灶大小、WHO分级方面差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果显示,病理类型、病灶大小、WHO分级是胶质瘤病人PP4 C蛋白高表达的独立危险因素(P<0.05)。结论:胶质瘤病人存在高PP4 C蛋白表达,其表达水平与病理类型、病灶大小、WHO分级等病理特征密切相关。(本文来源于《内蒙古医科大学学报》期刊2018年03期）
方川[8]（2018）在《人脑胶质母细胞瘤PDX模型的建立及应用》一文中研究指出胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)是恶性程度高、侵袭性强的中枢神经系统肿瘤。GBM具有高度异质性特性,因此针对特定分子亚型的靶向治疗在GBM治疗中将有重要的意义。间质型(mesenchymal,MES)在GBM亚型中具有更高的恶性程度,近年有研究提出转化生长因子-β(transforming growth factor-βTGF-β)在GBM的间质型亚型过表达,然而TGF-β信号通路在GBM间质亚型作用尚未完全阐明。病人来源的异种移植(patient derived xenograft,PDX)模型已经成为生物学研究的重要工具,更能模拟肿瘤在体内的生长过程和肿瘤微环境的影响,迄今被认为是最接近患者肿瘤的体内动物模型。PDX移植瘤模型在GBM亚型的鉴定特别是预测治疗反应中发挥了重要作用。本研究以胶质母细胞瘤来源的PDX模型和原代培养细胞为研究对象,通过转化生长因子-β受体2(transforming growth factor-βreceptor 2,TGF-βR2)小分子抑制剂研究体内外干预治疗,结合生物信息学方法,基于胶质母细胞瘤的PDX模型,对TGF-βR2小分子抑制剂的体内抑制效果进行验证,阐明TGF-β信号传导通路在GBM间质亚型中的作用。第一部分:使用手术切除的新鲜人脑胶质母细胞瘤组织通过皮下成瘤,然后再传代进行颅内原位PDX模型的建立,此种方法增加PDX的成功率。HE染色观察原发肿瘤和PDX肿瘤形态学相似,PDX肿瘤保留了原发肿瘤的胶质母细胞瘤的形态学特点。PDX保留了与原发肿瘤的生物学特性,可以作为药物检测和功能分析的理想动物模型。PDX移植瘤模型的建立,为人脑胶质瘤PDX模型提供了行之有效的技术方法,为胶质瘤的个体化治疗提供重要的途径。第二部分:基于胶质母细胞瘤原代培养细胞为研究对象,TGFβR小分子抑制剂LY2109761抑制原代培养细胞,结果提示间质型GBM相关的标记物表达下降。进一步进行了RNA转录测序技术(RNA-seq)分析发现间质表型相关基因如MET、LIF、IL-6和OSM表达下调,TGF-βR2作为GBM的间质型亚型的核心标志物,并通过调控其它间质表型相关基因在维持GBM间质表型中起关键作用。为了阐明TGF-β信号通路在GBM中的作用,通过TGF-βR小分子抑制剂LY2109761抑制TGF-β信号通路,采用多种生物信息学方法对差异表达基因进行了多维分析。通过DAVID数据库对差异表达基因进行KEGG通路富集分析,结果发现富集前几位的生物过程(Biological Process)涉及上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT),细胞增殖,TGF-β信号通路,细胞因子--细胞因子受体相互作用,PI3K-Akt传导通路等。TGF-β信号通路是信号传导网络中的核心,调节多种生物学功能,在胶质母细胞瘤细胞增殖和分化,炎症,血管生成,上皮-间质转化(EMT)中发生中发挥重要作用。通过STRING在线软件建立蛋白质-蛋白质相互作用网络分析,阐明TGFβR2、RUNX1、PPARG、GIT2、ACSL1和RAP1B蛋白-蛋白的相互作用,TGFβR2、RUNX1、PPARG、GIT2、ACSL1和RAP1B在蛋白质-蛋白质网络中彼此相互作用可以作为胶质母细胞瘤细胞间质亚型的分型标记物,具有重要诊断价值。基于GBM的PDX模型应用于TGF-β2 R抑制剂药物敏感性的研究,体内研究LY2109761抑瘤效果,结果发现TGF-β2 R抑制剂能够抑制肿瘤细胞的增殖和肿瘤微血管生成,具有抗肿瘤效应,TGF-β信号通路可以成为GBM间质亚型治疗的潜在靶点。基于胶质母细胞瘤模型个体化评估靶向治疗效果有重要意义。第叁部分:人脑胶质瘤组织TGF-β1、RUNX1与EMT的关系及临床意义。为了探讨TGF-β1、P-Smad3、RUNX1与EMT的关系及临床意义,本研究以人脑胶质瘤组织为研究对象,运用免疫组化方法检测TGF-β1,P-Smad3,RUNX1,Vimentin,E-cadherin在胶质瘤不同病理级别中表达水平及相关性,采用Log Rank检验进行生存分析并绘制Kaplan-Meier生存曲线。45例胶质瘤组织中TGF-β1,P-Smad3,RUNX1,Vimentin的表达显着升高(P<0.01),在高级别组中表达增强,表达阳性的患者生存期短;E-cadherin的表达下调(P<0.01),与病理级别呈负相关,表达阳性的患者生存期长。TGF-β1,P-Smad3,RUNX1,Vimentin四者表达呈正相关,均与E-cadherin呈负相关。TGF-β1、P-Smad3、RUNX1与EMT有关,高级别胶质瘤TGF-β1高表达且EMT显着,生存期短。本研究在蛋白水平上研究发现TGF-β1,P-Smad3,RUNX1,Vimentin,E-cadherin的表达与胶质瘤的病理级别和生存期有关,临床上可作为胶质瘤的恶性度和预后预测提供有价值的指标,为针对TGF-β1信号通路的靶向治疗策略提供了理论依据。本研究基于胶质母细胞瘤患者来源移植瘤PDX模型进行TGF-βR2激酶小分子抑制剂LY2109761药物敏感性的个体化研究,弥补了既往以细胞株为研究对象的不足,证实了TGF-βR2激酶小分子抑制剂抗肿瘤效应,TGF-βR2可作为GBM临床治疗潜在靶点。本研究阐明了TGF-β信号通路在维持GBM间质亚型中有重要作用,多维角度和方法证实TGFβR2及RUNX1,PPARG,ACSL1,GIT2和RAP1B可以作为GBM间质型亚型的标志物,TGFβR2作为GBM间质亚型核心调控基因具有重要的诊断价值。(本文来源于《天津医科大学》期刊2018-06-01）
徐阳,袁凡恩,杨雪,杨吉安,刘宝辉[9]（2018）在《贝伐单抗在人脑胶质母细胞瘤抗血管生成中的研究进展》一文中研究指出胶质母细胞瘤是成人中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤。血管生成是其重要特征之一,而血管内皮生长因子在其中发挥重要作用。贝伐单抗能够特异性地阻止血管内皮生长因子与其受体的结合,从而抑制肿瘤的血管生成,使肿瘤血管正常化实现抗肿瘤作用。但是在初诊及复发的脑胶质瘤患者中治疗效果不够满意,甚至还有耐药现象。本文就血管生成机制、贝伐单抗的作用机制及近年来临床试验和耐药机制的研究进展展开综述,以期总结目前抗血管治疗的研究成果,并预测下一步的研究方向。(本文来源于《中国医药导报》期刊2018年15期）
李召卿[10]（2018）在《STAT3抑制剂HJC0152在人脑胶质母细胞瘤中的抗肿瘤效果研究》一文中研究指出目的:探究信号传导与转录激活因子3(Signal Transducer and Activator of Transcription 3,STAT3)抑制剂HJC0152在人脑胶质母细胞瘤中的抗肿瘤效果,为探索人脑胶质母细胞瘤的治疗方式和将HJC0152用于癌症治疗提供理论基础。方法:本研究选用U87、U251、LN229叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系,用DMSO和HJC0152处理,分别作为对照组和实验组,通过对比两组细胞在药物处理后的状态判断HJC0152的抗肿瘤活性。实验研究分为体外实验和体内实验两部分。体外实验:MTT法测得HJC0152在U87、U251和LN229叁个细胞系中的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50)),并将其作为刺激细胞的药物浓度;Western blot检测DMSO和HJC0152处理后,细胞内STAT3、p-STAT3(Tyr705)、p-STAT3(Ser727)、上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白、增殖和衰老相关蛋白以及凋亡相关蛋白的表达水平;Transwell实验检测叁细胞系在经DMSO和HJC0152处理后运动能力的改变;克隆形成实验检测不同浓度HJC0152对叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系增殖能力的抑制效果;β-半乳糖苷酶实验检测DMSO和HJC0152对叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系衰老的影响。流式细胞学实验检测DMSO和HJC0152对叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系周期分布和凋亡状况的影响。使用线粒体提取试剂盒将DMSO或HJC0152处理后的叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系中的线粒体提取出来,分别检测DMSO和HJC0152处理对Bax和细胞色素C在线粒体内外分布的影响。通过JC-1探针检测叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系中线粒体的膜电位,对比DMSO和HJC0152对人脑胶质母细胞瘤细胞线粒体膜电位的影响。使用或不使用HJC0152对叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系进行预处理,然后检测顺铂在叁个细胞系中的IC_(50),分析HJC0152对顺铂在人脑胶质母细胞瘤细胞中的增敏效果。通过克隆形成实验检测叁个人脑胶质母细胞瘤细胞系分别在DMSO、顺铂和HJC0152联合顺铂作用下存活及克隆形成能力的影响,分析比较HJC0152在叁个人脑胶质母细胞瘤细胞系中对顺铂毒性的增敏作用。体外实验:应用人脑胶质母细胞瘤细胞系U87建立免疫缺陷鼠皮下荷瘤动物模型。将免疫缺陷鼠随机分为对照组和实验组,分别瘤内注射DMSO和HJC0152,并持续观测小鼠体重和肿瘤大小。4周后处死小鼠,对比两组小鼠荷瘤大小及重量,评估HJC0152对肿瘤生长的抑制效果,进一步验证体外实验的结果。结果:HJC0152处理后,叁种人脑胶质母细胞瘤细胞中p-STAT3(Tyr705)水平相较DMSO处理组显着下降,STAT3和p-STAT3(Ser727)水平无明显变化;EMT相关蛋白中N-Cadherin、Twist-1、Vimentin的表达量下降,E-Cadherin表达量上升;与细胞侵袭能力相关的MMP-2和MMP-9的表达量也显着减少。在铺matrigel/不铺matrigel的检测细胞侵袭/迁移能力的Transwell实验中,叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系的HJC0152处理组相较DMSO处理组跨膜细胞数均明显减少,差异具有统计学意义。克隆形成实验中,HJC0152对叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系的克隆形成能力均有较强的抑制效果,并呈浓度依赖性。β-半乳糖苷酶实验显示,叁种人脑胶质母细胞瘤细胞的HJC0152处理组细胞衰老比例显着高于DMSO处理组;Western blot结果显示HJC0152处理组细胞内p16的表达量显着高于DMSO处理组。流式细胞学实验结果表明,HJC0152处理后,叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系处于G_1期的细胞比例显着升高,凋亡细胞的比例也明显增多;Western blot结果显示HJC0152处理组的CyclinD1表达量相较DMSO组明显降低,p21则明显升高,凋亡相关指标中proCaspase3和Bcl-2水平下降,cleaved Caspase3和Bax水平上升。共聚焦显微镜下观察JC-1探针显示,叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系HJC0152处理组细胞内线粒体膜电位较DMSO组显着降低。Western blot结果显示,HJC0152处理后叁种人脑胶质母细胞瘤细胞线粒体内的细胞色素C含量下降,细胞质中细胞色素C含量上升;Bax的变化则相反。MTT实验显示,叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系经HJC0152预处理后,顺铂对其的IC_(50)均明显下降。克隆形成实验显示,HJC0152联合顺铂比顺铂单药对叁种人脑胶质母细胞瘤细胞系的存活和克隆形成能力的抑制效果均更强。荷U87人脑胶质母细胞瘤裸鼠动物模型结果显示,HJC0152组小鼠皮下移植瘤的大小和生长速度明显低于DMSO组,差异具有统计学意义。体内外实验结果一致。结论:HJC0152作为一种STAT3 Tyr705位点的抑制剂,可以显着抑制人脑胶质母细胞瘤细胞的增殖和侵袭,促进人脑胶质母细胞瘤细胞的衰老和凋亡,并增加其对顺铂的敏感性。HJC0152在体内实验中同样具有较强的抗肿瘤活性,能显着抑制裸鼠皮下人脑胶质母细胞瘤的生长,且无明显毒副作用。本实验为HJC0152成为未来治疗人脑胶质母细胞瘤的STAT3靶向药物提供了初步的实验基础。(本文来源于《天津医科大学》期刊2018-05-01）
人脑胶质母细胞瘤论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景和目的:胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)是大脑中最常见的原发性恶性肿瘤,其自身较强的增殖能力和侵袭性是其成功治疗的主要障碍。目前临床采用手术、放疗、化疗和生物治疗等综合治疗手段,但患者生存期改善不明显,预后仍很差,中位生存期14月左右~([1])。目前研究认为,寻求特异性针对胶质母细胞瘤增殖和侵袭机制的治疗方案,将有可能遏制肿瘤的生长,延长患者的生存期。近年相关研究发现,长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,LncRNA)在多种肿瘤中存在显着的表达改变,参与肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭转移、自噬及化疗敏感性等生物学行为的调节,在肿瘤的发生进展中发挥重要作用,有可能成为在GBM侵袭、预后的分子标记物,将为临床肿瘤的靶向治疗提供依据~([2])。肝癌高表达转录本(highly up-regluated in 1iver cancer,HULC)是LncRNA的一种,被发现在多种恶性肿瘤中表达上调,但其与GBM之间的研究较少,作用机制尚不清楚。众所周知,在肿瘤细胞增殖凋亡侵袭等一系列复杂的行为过程中有多种蛋白进行参与,其中PI3K/AKT信号通路在癌细胞增殖、凋亡、侵袭过程中发挥重要作用~([3,4])。结合本课题组生物信息学预测,HULC可能通过粘着斑激酶(Focal Adhesion Kinase,FAK)调控PI3K-AKT信号通路上及下游靶蛋白的表达来发挥生物学功能,影响着胶质母细胞瘤细胞增殖及侵袭等生物学行为。故本实验以胶质母细胞瘤细胞SHG44和U87细胞株为研究对象,通过细胞功能及分子机制实验,试图探讨LncRNA HULC是否通过FAK激活PI3K-AKT信号通路促进胶质母细胞瘤细胞的增殖和侵袭。方法:1.培养人胶质母细胞瘤细胞SHG44和U87,通过HULC慢病毒干扰载体构建技术获得HULC沉默表达组及其阴性对照组的稳转细胞株;2.通过CCK8细胞增殖实验、平板克隆形成实验、细胞周期及细胞凋亡实验检测两组细胞的增殖及凋亡能力;3.通过细胞划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测两组细胞的迁移及侵袭能力;4.通过qRT-PCR检测两组细胞中HULC的表达水平;Western blot检测PI3K-AKT信号通路上下游靶蛋白(FAK、PI3K、AKT、PTEN)的表达水平。结果:1.增殖和凋亡实验结果示HULC沉默表达组细胞增殖率较低,克隆形成率较少,早期凋亡率较高,G1期细胞较多,S期细胞数较少,提示HULC促进细胞增殖并抑制其凋亡;2.侵袭和迁移实验结果示HULC沉默表达组细胞穿孔细胞数较少,迁移速度较慢,提示HULC促进细胞的侵袭和迁移;3.qRT-PCR结果示沉默表达组的HULC表达量显着降低,即HULC沉默表达稳转细胞系构建成功;4.Western blot检测方法结果示FAK、PI3K、AKT蛋白表达明显减少,PTEN蛋白的表达较高,提示HULC可通过调控PI3K-AKT信号通路上下游靶蛋白的表达水平来发挥生物学功能。结论:lncRNA HULC可能通过FAK激活PI3K-AKT信号通路促进胶质母细胞瘤细胞的增殖和侵袭。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人脑胶质母细胞瘤论文参考文献
[1].蒋迎娣,殷莹,浦浙宁,张博,龚玲丽.人脑胶质母细胞瘤细胞系U87的单克隆细胞构建及异质性研究[J].医学研究生学报.2019
[2].李倩.长链非编码RNAHULC沉默表达对人脑胶质母细胞瘤细胞增殖、侵袭的影响[D].安徽医科大学.2019
[3].李倩,尹恬恬,胡宇辰,吴景,张敏.长链非编码RNAHULC沉默表达对人脑胶质母细胞瘤细胞SHG44增殖和凋亡的影响[J].中山大学学报(医学版).2019
[4].黄昌林,陈典刚,朱虹帆,汤金梁,王东林.抑制LITAF基因对人脑胶质母细胞瘤U251细胞增殖、凋亡和放疗敏感度的影响[J].肿瘤防治研究.2019
[5].郭彩丽,郭高超,黄强,张振中.核因子-κB抑制物激酶ε促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展的实验研究[J].肿瘤基础与临床.2018
[6].宋洪旺,王鹏斐,孔令伟,邢攸学,闫长祥.成人脑胶质母细胞瘤术前非影像学预后危险因素综合评估[J].中国微侵袭神经外科杂志.2018
[7].高树梓,安德柱,李佳岩,鲍洪,张喜平.PP4C在人脑胶质细胞瘤组织中表达及其临床病理特征相关性[J].内蒙古医科大学学报.2018
[8].方川.人脑胶质母细胞瘤PDX模型的建立及应用[D].天津医科大学.2018
[9].徐阳,袁凡恩,杨雪,杨吉安,刘宝辉.贝伐单抗在人脑胶质母细胞瘤抗血管生成中的研究进展[J].中国医药导报.2018
[10].李召卿.STAT3抑制剂HJC0152在人脑胶质母细胞瘤中的抗肿瘤效果研究[D].天津医科大学.2018
论文知识图
