一、活性多糖增强免疫调节功能的研究进展（论文文献综述）
王芙蓉,左昕怡,谢中国,郭湘蕾[1]（2022）在《食品中免疫调节物质的研究进展》文中进行了进一步梳理免疫调节是指机体依靠免疫系统识别和清除抗原性物质,维持身体的生理平衡与相对稳定的过程。随着生活方式的改变,大多数人都出现过因为免疫调节紊乱而产生的不良症状。因此,利用食品中的免疫调节物质调节人体的免疫系统成为一项重要的研究内容。在我国保健食品可以申报的18项功能中,有助于增强免疫力也成为了最受关注的功能之一。该文就食品中的免疫调节物质及其免疫调节机制的研究进展进行综述,对现有的具有免疫调节功能的食品进行介绍,以期为进一步开发利用免疫调节物质,研发具有增强免疫力的功能食品提供理论依据。
沙洲[2]（2021）在《松花粉多糖对鸡肠道黏膜免疫的影响及巨噬细胞的免疫调节作用》文中提出松花粉作为传统医学中的膳食补充剂已有数百年历史,而具有广泛生物学活性的多糖（Polysaccharides,PS）是松花粉的关键活性成分之一,已经被运用到改善和调节免疫功能等方面。黏膜免疫系统是动物（尤其是家禽）整个免疫网络的重要组成部分,也是抵抗外源抗原感染的第一道防线。肠道黏膜是食物消化和营养吸收的关键部位,其中存在的肠道微生物和大量免疫细胞共同形成坚固的防御屏障,而作为免疫细胞的巨噬细胞（Macrophages,m（?））具有趋化性运动、吞噬、分泌和抗原呈递等功能,在抗感染、抗肿瘤、免疫调节等过程中扮演积极角色。本论文以从山东省泰安市的松花粉中分离纯化的松花粉多糖（Pine pollen Polysaccharides,PPPS）作为研究对象,运用分子生物学等技术在体内探究PPPS对肠道黏膜免疫的影响;通过16S高通量测序分析PPPS对肠道内菌群结构丰度的作用;在体外以鸡巨噬细胞（HD11）作为靶细胞,揭示PPPS对其的免疫调节作用并初步探究作用机制。本研究旨在为研制对黏膜免疫具有免疫增强作用的新型免疫增强制剂提供实验基础和理论依据。主要研究内容和结果如下:1、PPPS对黏膜免疫的影响本试验首先选取120只1日龄的SPF鸡,随机分为PBS组、PPPS低剂量组（LPPPS组）、PPPS中剂量组（MPPPS组）、PPPS高剂量组（HPPPS组）,分别口服PBS和3种不同剂量的PPPS（10 mg/m L,20 mg/m L和40 mg/m L）,0.2 m L/只,持续21天。在试验的第7、14和21天分别收集各组鸡的肠道组织、粪便及血液样品。通过ELISA方法、流式细胞术、CCK-8试剂、实时荧光定量PCR（q PCR）等技术分别检测免疫学相关指标,主要包括:SIg A和Ig G抗体水平、CD4+、CD8+T淋巴细胞水平、T淋巴细胞转化率、细胞因子（白介素2、白介素4、干扰素γ）、黏膜免疫相关分子基因（CD80、CD86、MHC-I、MHC-II）。结果表明PPPS显着提高鸡的黏膜抗体SIg A和血清抗体Ig G水平,并有效促进细胞因子分泌及T淋巴细胞水平,上调黏膜免疫相关基因m RNA水平。通过HE染色观察PPPS对小肠绒毛结构的影响,分别采集PBS组及PPPS组鸡的小肠不同部位组织制成石蜡切片,测量并统计分析各组鸡的十二指肠、空肠和回肠绒毛长度、宽度、隐窝深度及V/C值（长度/深度）的变化。结果表明,PPPS能有效改善小肠绒毛发育以增强肠道黏膜抵御病原体的物理屏障。为了探究PPPS对肠道黏膜的保护作用,试验的第21天,分别对每组鸡滴鼻100μL106TCID50新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）病毒液,记录攻毒后体重变化及死亡率,并取各段小肠及肺脏采用HE染色观察病理变化,通过q PCR检测肠黏膜病毒载量。结果表明,MPPPS、HPPPS组与LPPPS、PBS组相比,显着减轻由NDV引起的体重降低、病理损伤、病毒载量及死亡率。另外通过感染H9N2病毒探究口服PPPS对呼吸道黏膜的保护作用,在口服40 mg/m L的PPPS剂量7天后,PBS组及PPPS组选取5只鸡分别滴鼻100μL 104TCID50H9N2病毒液,在攻毒后第3、5和7天采集肺脏组织HE染色,通过q PCR检测肺脏病毒量,采用免疫荧光对病毒进行定位并分析荧光强度。结果表明PPPS显着降低肺脏中病毒量,减轻肺脏病理变化。证明PPPS不仅能有效保护肠道黏膜损伤,同样对呼吸道黏膜也具有保护作用。2、PPPS对肠道菌群的影响为了探究PPPS对鸡肠道菌群的影响,在口服PPPS的第21天,收集PBS组及HPPPS组（40 mg/m L）鸡粪便样本,通过16S高通量测序对鸡肠道菌群组成、多样性等方面进行分析研究。结果表明,PBS组与PPPS组的肠道菌群组成存在较大差异,通过Venn图结果表明,PPPS组OTU值显着升高。在门水平上分析,PPPS组的Firmicutes（厚壁菌门）、Bacteroidetes（拟杆菌门）、Proteobacteria（变形菌门）与PBS组相比均有较大变化。在科水平上分析,Lactobacillaceae（乳杆菌科）、Bacteroidaceae（拟杆菌科）、Lachnospiraceae（毛螺菌科）、Rikenellaceae（理研菌科）变化较为明显。在属水平上分析,PPPS组与PBS组相比,诸如Enterococcus（肠球菌）、Bacteroides（拟杆菌属）、Alistipes（别样杆菌属）、Helicobacter（螺杆菌属）、Intestinimonas（瘤胃菌属）等均丰度上升。在种水平上分析,Lactobacillus＿reuteri（罗伊氏乳杆菌）,Enterococcus＿cecorum（盲肠链球菌）、Bacteroides＿uniformis、Bacteroides＿thetaiotaomicro（拟杆菌）,Lachnospiraceae＿bacterium＿615、Lachnospiraceae＿bacterium＿M18-1（毛螺菌）,Clostridium＿sp＿AUH-JLC140（梭状杆菌）,Alistipes＿finegoldii（别样杆菌）等丰度上升。在α多样性及UPGMA聚类树等分析发现,PPPS组的菌群物种多样性显着高于PBS组。因此说明PPPS能够改善肠道菌群结构及丰富度。3、PPPS对巨噬细胞的免疫调节作用为了探究PPPS对巨噬细胞HD11的免疫调节作用,首先用CCK-8试剂检测不同浓度的PPPS对HD11细胞的增殖作用,通过中性红及FITC-葡聚糖分析PPPS对HD11细胞的吞噬活性的影响,Griess试剂检测PPPS处理HD11细胞后分泌一氧化氮（NO）水平,荧光探针法测定活性氧（ROS）,ELISA法检测HD11细胞培养液上清液中白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。通过q PCR法检测诱导型一氧化氮合酶（i NOS）、IL-1β和TNF-α的m RNA水平变化。结果表明,当PPPS浓度高于800μg/m L时,PPPS对HD11细胞增殖具有一定的抑制作用,而在低于400μg/m L时能显着促进增殖效果。因此选用50-400μg/m L浓度范围的PPPS进行后续试验。中性红及FITC-葡聚糖试验显示PPPS均能显着提高HD11细胞吞噬活性,但各浓度间的作用效果无显着差异。PPPS以剂量依赖性方式促进HD11细胞分泌NO、IL-1β、TNF-α,且上调i NOS、IL-1β、TNF-αm RNA水平。通过高通量测序技术,对以200μg/m L PPPS处理24 h的HD11细胞与PBS组细胞进行转录组测序,分析比较差异表达m RNA、mi RNA及信号通路。结果表明,PPPS组有2358个上调表达基因和2028个下调表达基因,其中富集分析与免疫相关主要通路为内吞作用、黏附连接、内质网蛋白质加工、细胞因子-细胞因子受体相互作用、转运蛋白、Toll样受体、MAPK、Notch、C型凝集素受体、NOD样受体、RIG-I样受体等信号通路。mi RNA结果显示10个mi RNA在PPPS组中高表达,21个mi RNA下调表达。KEGG通路富集分析主要通路为内吞作用、紧密连接、溶酶体、黏合连接、细胞粘附分子、内质网蛋白加工、Notch等信号通路。为了探究PPPS作用的HD11细胞的受体以及免疫调节的信号通路,根据转录组结果,我们选择分析验证Toll样受体、MAPK、NF-κB分子对HD11细胞的影响。在PPPS处理HD11细胞后,通过q PCR方法检测Toll样受体2、4（TLR 2、4）、甘露糖受体（MR）和NF-κB分子m RNA水平。TLR4、MAPK三种亚基（p38、JNK、ERK1/2）和NF-κB抑制剂预处理细胞后,Griess法检测NO水平、ELISA法检测IL-1β和TNF-α的分泌量。结果表明,PPPS在不同时间点均上调细胞表面受体TLR4和NF-κB的m RNA水平,证明TLR4是PPPS激活HD11细胞的重要受体,NF-κB是PPPS促进HD11细胞活化的关键核因子。TLR4、MAPK、NF-κB抑制剂均能显着降低HD11细胞NO、IL-1β和TNF-α的分泌量,说明TLR4、MAPK、NF-κB均参与PPPS对HD11细胞的免疫增强作用。结果表明PPPS通过TLR4/MAPK/NF-κB信号通路激活HD11细胞产生免疫应答。综上所述,PPPS显着促进肠道黏膜免疫功能及小肠绒毛发育,有效减轻由NDV和H9N2引发的肠道及肺脏组织病理损伤,改善肠道菌群丰度且通过TLR4/MAPK/NF-κB信号通路激活HD11细胞。本课题不仅探究PPPS对鸡黏膜免疫及肠道菌群的影响,而且揭示了对巨噬细胞的免疫调节作用。因此,PPPS作为天然免疫增强剂具有良好的开发潜力和应用前景。
崔连杰[3]（2021）在《黄芪活性多糖APS-Ⅱ免疫调控机制及其酶解寡糖片段的结构和活性研究》文中指出选题依据:黄芪多糖（Astragalus polysaccharides,APS）具有广泛的生物活性,目前大多数研究以黄芪总多糖作为主要的研究对象,但黄芪多糖相对分子量分布广泛,限制了对其生物活性作用机制的深入研究,无法精确阐明免疫调节作用与其相对分子质量的关系,也难以揭示黄芪多糖在分子水平发挥免疫调节作用的机制。本课题组前期研究表明黄芪多糖APS-Ⅱ是黄芪中免疫调节活性主要物质,由于多糖结构难于精确测定,限制了黄芪多糖体内分子作用机制的深入研究。“多糖受体学说”认为免疫活性多糖分子中存在一种或多种寡糖片段“活性中心”,因此将黄多糖降解为寡糖,从寡糖水平研究多糖的活性中心,为突破黄芪多糖结构研究和作用机制研究提供了新思路。目的:超滤技术分离获得不同分子量黄芪多糖,采用“环磷酰胺免疫抑制”方式造模,通过小鼠血清代谢组学技术探讨黄芪多糖的免疫增强作用机制。将本课题组已制备的免疫活性多糖APS-Ⅱ（10 k Da组分）通过单因素试验和正交试验确定最佳降解条件,通过聚丙烯酰胺凝胶色谱制备不同聚合度寡糖组分,对不同聚合度寡糖组分进行结构分析及免疫活性筛选。研究方法与研究内容:（1）通过超滤法将黄芪总多糖得到不同分子量黄芪多糖APS-I（>2000 k Da）、APS-Ⅱ（1.02×104 Da）、APS-ⅡI（286 Da）,分别作用于“环磷酰胺免疫抑制”模型小鼠,收集小鼠血清进行UPLC-HRMS检测,结合多元统计分析探讨黄芪多糖的免疫增强作用机制。（2）免疫活性多糖APS-Ⅱ采用内切α-1,4-葡聚糖酶酶解,通过单因素试验和正交试验确定最佳降解条件,降解后的寡糖混合物通过聚丙烯酰胺凝胶色谱制备不同聚合度寡糖组分。对不同寡糖组分结构进行分析,通过高效液相色谱-紫外检测（HPLC-UV）确定单糖组成,通过甲基化方法确定寡糖结构中单糖连接方式,通过红外光谱（IR）确定APS-Ⅱ降解后寡糖的特征官能团和糖链构型,通过核磁共振波谱（NMR）确定APS-Ⅱ降解后寡糖片段的糖苷键构型,通过质谱法（MS/MS）确定APS-Ⅱ降解后寡糖片段的精细结构。（3）从机体特异性免疫和非特异性免疫两方面对不同寡糖片段活性进行研究,通过不同寡糖组分对Raw 264.7细胞吞噬活性和自然杀伤细胞（NK）的作用,探究它们对机体非特异性免疫功能的影响;通过不同寡糖组分协同伴刀豆蛋白A（Con A）和脂多糖（LPS）对小鼠脾淋巴细胞的作用,探究它们对机体特异性免疫功能的影响。研究结果:1.不同分子量黄芪多糖均可不同程度提高小鼠血清中免疫细胞数量,改善免疫器官损伤,其中APS-Ⅱ效果最佳。与空白组相比,模型组小鼠血清中29个代谢物发生显着变化,APS、APS-I、APS-Ⅱ、APS-ⅡI分别能显着回调其中24、13、25、19个代谢物至正常水平。代谢组学分析揭示了黄芪多糖中APS-Ⅱ是发挥免疫调节活性的主要成分,其机制可能与调控小鼠体内苯丙氨酸代谢、半胱氨酸和甲硫氨酸的代谢、三羧酸循环、精氨酸和脯氨酸代谢有关。2.通过单因素试验和正交试验确定了APS-Ⅱ最佳降解条件,在内切α-1,4-葡聚糖酶浓度0.5 U·ml-1,酶解温度60℃,酶解时间90 min下,APS-Ⅱ降解得到的寡糖数量最多,含量最高,且降解一致性较好,寡糖混合物通过聚丙烯酰胺凝胶色谱分离得到四个寡糖组分,P1:1-3糖,P2:3-6糖,P3:7-14糖,P4:10-18糖。3.APS-Ⅱ经内切α-1,4-葡聚糖酶降解后形成聚合度1-18的寡糖,经聚丙烯酰胺凝胶色谱分离得到四个组分,对APS-Ⅱ降解后寡糖混合物结构的结构进行分析,APS-Ⅱ酶降解后产生的1-3糖、3-6糖和7-14糖主要成分为葡萄糖,而10-18糖和酶降解后总的寡糖混合物中除葡萄糖外,还存在其余单糖,其中半乳糖和阿拉伯糖含量较多。其中聚合度1-3糖和3-6糖主要结构为线性1,4-连接葡聚糖;聚合度7-14糖主要结构为线性1,4-连接葡聚糖,但相较于1-6糖,其糖链结构中分支度高的葡萄糖单糖数量增加,此外出现少量阿拉伯糖和半乳糖;聚合度10-18寡糖组分中,糖链主要连接方式为1→2,4-Glcp和1→4,6-Glcp,与前三个寡糖组分糖相比,1→4-Glcp和1-Glcp含量明显降低,半乳糖和阿拉伯糖含量增加,分支度高的葡萄糖成为糖链中主要成分。综合酶解产物结构可推测黄芪活性多糖APS-Ⅱ的结构,以α-D-1,4-连接葡聚糖为主链,主链包含连续线性九糖的直链结构和糖环C2位、C3和C6位的支链结构,此外多糖结构中还存在少量1,5-连接阿拉伯糖,1-连接阿拉伯糖以及2,3,4-连接半乳糖,2,4,6-连接半乳糖。4.APS-Ⅱ酶降解产物均可通过增强巨噬细胞的吞噬功能,增强NK细胞的杀伤活性,促进非特异性免疫功能,还可以协同Con A促进小鼠脾淋巴细胞增殖,协同LPS促进小鼠脾淋巴细胞增殖并分泌细胞因子Ig G,增强特异性免疫功能,不同寡糖组分中活性最强的为糖链C-2和C-6位存在支链的α-D-1,4-连接葡聚糖10～18寡糖组分。结论:代谢组学分析揭示了黄芪多糖中APS-Ⅱ是发挥免疫调节活性的主要成分,其机制可能与调控小鼠体内苯丙氨酸代谢、半胱氨酸和甲硫氨酸的代谢、三羧酸循环、精氨酸和脯氨酸代谢有关,因此推测黄芪多糖在体内发挥免疫活性的主要方式可能为:通过调节吞噬细胞和树突状细胞的活性,直接影响机体的非特异性免疫,通过相关代谢产物间接影响机体的特异性免疫,最终表现出较强的整体免疫功能修复活性。在“多糖受体学说”理论指导下,初步建立了活性黄芪多糖APS-Ⅱ的酶降解获得寡糖的方法,并对降解后的寡糖分离,初步探究了不同聚合度寡糖混合物的免疫活性,结果发现与免疫活性多糖APS-Ⅱ相比,不同寡糖组分在不同免疫活性有明显差异,其中聚合度10～18寡糖免疫活性最高,结合结构解析结果可知,相较于低聚合度寡糖,10～18寡糖结构为糖链C-2和C-6位存在支链的α-D-1,4-连接葡聚糖,且支链结构较多,表明带有支链结构的α-D-1,4-连接葡聚糖结构具有免疫增强活性,其中糖链C-2和C-6位存在支链的α-D-1,4-连接葡聚糖免疫活性较强。因此我们推测免疫活性多糖APS-Ⅱ多糖分子中的寡糖片段“活性中心”可能位于寡糖10-18糖结构中。本研究结果为进一步阐明黄芪多糖结构与功能奠定了基础,丰富了多糖受体学说,也为黄芪多糖的开发提供了新思路。
杨滨梦[4]（2021）在《HsPc-HA营养液的挤压制备及其功能性研究》文中研究说明本课题将挤压膨化技术与植物化学物的现代提取分离技术有效结合,建立能够提升Hs Pc-HA营养液中有效组分提率的创新性方法,并将该组分应用于恶性肿瘤的治疗及治疗后期的营养支持。从体内及体外两个方面探讨其作用效果,并从分子水平阐明其作用机理。主要研究内容如下:（1）采用挤压膨化预处理提取有效组分,并以猴头菇为例,确定最佳挤压膨化参数以及挤压膨化预处理对多糖提取率的影响。响应面分析优化结果表明猴头菇多糖最佳挤压膨化预处理提取条件为:螺杆转速400r/min,水分含量16%,挤压温度120℃。经验证,确定在此条件下提取率达到最高可达3.63±0.02%。将有效组分根据对脾淋巴细胞增殖作用效果进行配伍,最终将猴头菇多糖:刺五加多糖:茯苓多糖:白术内酯四种有效组分按照1:1:2:1的比例配置成Hs Pc-HA营养液（Hs Pc-HA）。（2）体外构建IEC-6细胞损伤模型,从细胞水平探讨Hs Pc-HA的作用效果。MTT结果表明1.5mg/m L环磷酰胺（CTX）作用48h时,可以成功构建IEC-6细胞损伤模型。且Hs Pc-HA对于IEC-6细胞的最佳修复率可达47.18±1.23%。细胞划痕实验与HE染色结果显示造模给药培养24h后模型组愈合率为8.20±1.03%,Hs Pc-HA组愈合率可达16.35±1.57%。表明Hs Pc-HA可以促进IEC-6细胞损伤迁移,能够提高细胞损伤愈合率,并能适当提高细胞存活率。（3）皮下接种S180腹水瘤细胞可成功构建荷瘤鼠模型,腹腔注射一周12mg/m L环磷酰胺（CTX）后,可成功构建化疗后荷瘤鼠模型。较模型组（CTX组）相比,灌服Hs Pc-HA后,小鼠体重、摄食量、存活率均有明显提高,CTX组存活率仅有62.5%,给药营养支持后,存活率可达到75%,说明Hs Pc-HA可提高免疫低下荷瘤鼠的存活率,延长放化疗小鼠生存时间。另外,Hs Pc-HA可以有效促进化疗后荷瘤鼠的胃排空率及小肠推进率,提升小鼠胸脾指数,降低小鼠耳肿胀率及肉芽肿抑制率,对化疗后荷瘤鼠表现出一定增强免疫及抗炎功效。HE染色结果发现Hs Pc-HA能够减轻由CTX引起的各组织器官损伤。生化法及ELISA法结果表明Hs Pc-HA能够显着降低化疗后荷瘤鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、尿素氮（BUN）,同时能够提升血清中免疫因子超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因子-ɑ（TNF-α）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-8（IL-8）、免疫球蛋白M（Ig M）、免疫球蛋白A（Ig A）含量,达到降低肝肾损伤及调节机体免疫功能的作用。Western Blot法测定了小鼠脾脏组织中核转录因子-кB（NF-кB p65）蛋白含量,阐述其抗炎作用机理。结果表明Hs Pc-HA能够下调化疗后荷瘤鼠脾脏组织中NF-κB P65的蛋白表达量,通过抑制NF-кB信号通路的传导来减轻CTX引起的炎症反应。
石丽霞[5]（2021）在《黄芪活性多糖APS-Ⅱ三氟乙酸降解寡糖片段的免疫活性筛选与结构初探》文中研究表明选题依据:黄芪是多年生豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根,在中医药研究中被推崇为补益良药,具有扶正固本、益卫固表的药理功能,在临床研究中具有数千年的历史。黄芪中的黄芪多糖（APS）为含量丰富、活性较强的天然成分,课题组前期研究发现分子量约为10 k Da的黄芪多糖组分APS-Ⅱ的免疫活性最强。但是多糖的分子量较大,结构分支复杂,且多糖标准品的缺乏也为其结构表征带来了巨大挑战。近年来,随着多糖受体理论学说的推广以及自上而下研究策略的指引,相对分子量相对较小的寡糖研究受到了广泛的关注,不仅可以促进多糖结构的研究,还对糖类药物的开发提供了新思路。然而,黄芪寡糖的研究还十分有限,因此本文将APS-Ⅱ采用三氟乙酸降解成寡糖,从寡糖水平研究APS-Ⅱ的免疫活性中心片段,有助于突破APS-Ⅱ结构研究的技术瓶颈,为黄芪糖类药物的研发及其构效关系奠定基础,进一步丰富多糖受体理论学说。目的:将黄芪免疫活性多糖通过单因素实验和正交试验确定最优酸解条件,按聚合度分布情况通过制备液相色谱仪分离制备不同寡糖片段,分析不同寡糖片段的结构组成并筛选出免疫活性较强的寡糖片段。方法:（1）中药黄芪利用水提醇沉法提取黄芪多糖,接着通过超滤机截留法制备黄芪免疫活性多糖,然后通过单因素实验以及正交试验优化三氟乙酸降解APS-Ⅱ的最佳酸解条件,该过程主要考察了酸解温度、酸解时间和酸浓度对降解产物的影响,最后在确保最优降解条件的重复性和稳定性以后批量制备黄芪寡糖（APOS）。（2）黄芪寡糖通过纯化制备色谱仪分离制备不同聚合度（DP）的黄芪寡糖片段,通过化学和仪器分析相结合的方法研究APOS的结构特征,采用超高效液相色谱-电喷雾电离高分辨飞行时间质谱（UPLC-ESI-QTOF-MS）分析了混寡糖的质谱信息,用高效液相色谱仪对寡糖片段的聚合度进行分析,用完全酸水解结合衍生化的方法研究了寡糖片段的单糖组成,用傅里叶变换红外光谱（FT-IR）测定了寡糖片段中存在的特殊官能团结构,用气相质谱联用（GC-MS）的检测手段分析黄芪寡糖片段中单糖残基的连接方式。（3）利用多种体外免疫细胞的活性评价以及免疫球蛋白G（IgG）的试剂盒检测来探讨不同聚合度黄芪寡糖片段对免疫活性的影响:通过巨噬细胞的吞噬活性和自然杀伤细胞（NK）的细胞毒活性了解不同聚合度黄芪寡糖片段对固有免疫的影响;通过脂多糖（LPS）诱导脾淋巴细胞中T淋巴细胞的增殖以及刀豆蛋白A（ConA）诱导脾淋巴细胞中B淋巴细胞的增殖了解不同聚合度黄芪寡糖片段对适应性免疫的影响;用不同聚合度的黄芪寡糖片段干预小鼠脾淋巴细胞,通过检测脾细胞分泌IgG的情况来分析黄芪寡糖对特异性免疫的作用。结果:1.黄芪免疫活性多糖（纯度大于98.5%）利用三氟乙酸部分水解为寡糖的最佳条件为水解温度80℃,三氟乙酸浓度1.0 mol·L-1,水解时间1 h,该条件具有良好的重复性和稳定性（RSD%﹤3%）,重复批量制备表明APOS的产率约为75%。2.APOS经制备液相色谱的分离得到六个寡糖片段,APOS-1主要以DP2为主,APOS-2包括DP3～DP7,APOS-3包括DP5～DP9,APOS-4包括DP9～DP14,APOS-5包括DP12～DP17,APOS-6包括DP16～DP19。通过一系列的化学仪器分析表明APOS的糖链断裂呈规律性,表现为Ci、0,2Ai、2,5Ai、2,4Ai型的碎片离子,结构以→4)-Hex-(1→连接的六碳糖为主链,包括葡萄糖、半乳糖和甘露糖,主要以葡萄糖为主要成分,此外在主链糖环的C2、C3和C6位存在支链结构,且C6位分支较多,并且APOS-5和APOS-6的主链糖环存在更复杂的多支链结构。3.不同聚合度寡糖片段对体外免疫细胞均具有免疫增强作用,平均分子量较大的组分显示出更强的免疫活性,与APS-Ⅱ相比,APOS-4/5/6表现出的差异活性具有统计学意义,且在200μg·m L-1时达到最强活性,推测在DP9以上的黄芪寡糖片段中更有可能存在免疫活性中心片段。结论:本研究以免疫活性多糖为研究对象,通过“自上而下”的研究策略使用三氟乙酸将APS-Ⅱ部分酸水解,得到不同聚合度的寡糖,并利用制备液相将寡糖分为六个片段,分析比较了不同寡糖片段之间的结构差异,表明APOS是以→4)-Hex-(1→连接的六碳糖为主链,在主链糖环的C2、C3和C6位存在分支的糖链结构,通过体外免疫活性筛选试验找到聚合度为DP9以上的高聚合度寡糖免疫活性最强,推测糖APS-Ⅱ中的免疫“活性中心”可能位于DP9以上的糖链结构中。本研究为进一步探索不同结构APOS与免疫活性之间的构效关系奠定了基础,也为其他植物多糖的寡糖研究提供了研究思路。
李美东[6]（2021）在《壶瓶碎米荠多糖分离纯化、结构鉴定及生物活性研究》文中认为目的:本文以恩施超富硒植物壶瓶碎米荠为原料,通过对壶瓶碎米荠多糖的提取、分离、纯化,旨在能清晰的了解到壶瓶碎米荠多糖的结构,为后期研究其构效关系打下基础。方法:利用酶、超声波辅助壶瓶碎米荠多糖的提取,并使用响应面法对其条件进行优化;利用柱层析法对多糖进行纯化;之后利用相应结构解析技术对分离出的多糖结构进行分析;最后对使用体外活性研究方法对多糖的生物活性进行探究。结果:通过单因素以及响应面法对壶瓶碎米荠多糖进行优化提取,所得模型具有显着性,并且失拟项不显着,证明模型是合适的,并得到最优条件为液料比30:1、超声波时间24.80 min、纤维素酶占比2%、提取温度90°C、提取时间120 min,按照最优条件进行提取实验,得到多糖的提取量为48.53 mg/g;对壶瓶碎米荠粗多糖进行分离纯化,得到4种不同的多糖,分别命名为CHP-1、CHP-2、CHP-3、CHP-4;对4种多糖进行结构分析,可得到前三种多糖的主要成分均为葡萄糖、CHP-4的主要组成为半乳糖,分子量分别为238.3 kDa、21.75 kDa、80.64 kDa、7.423 kDa,均含有大量的α-、β-糖苷键和少量糖醛酸;通过对粗多糖对ABTS自由基、羟基自由基以及总还原力的测定并与同浓度Vc作比较得出,壶瓶碎米荠粗多糖具有体外抗氧化活性,但在同浓度下远小于Vc的抗氧化能力;通过体外细胞学的研究可以发现,CHP-3对人肺癌A549的细胞活性、增殖能力、迁移能力、侵袭能力均有明显的抑制作用;对A549细胞凋亡机制研究中发现,通过上调A549细胞中的P53、BAX、Caspase-3基因的表达,并下调Bcl2基因的表达,从而使细胞凋亡。结论:本实验建立了壶瓶碎米荠中多糖提取的新工艺,同时也建立了DEAE-52纤维素阴离子层析柱和Sephadex G-100葡聚糖凝胶层析柱分离纯化壶瓶碎米荠多糖的技术;对4种多糖的结构进行了简单的探讨;证实了CHP-3的体外抗肿瘤活性。
徐小轻[7]（2021）在《食源性干酪乳杆菌NA-2抑菌特性及其胞外多糖功效研究》文中研究指明乳酸菌是常见的益生菌,具有抑制病原菌、调节肠道菌群、免疫和抗肿瘤等活性。乳酸菌分泌的胞外多糖也是具有多种功能活性的天然化合物,其功能活性有抗病原菌生物膜、抗氧化和免疫调节等。发酵蔬菜是一种酸性发酵食品,富含丰富的乳酸菌。本论文选择了东北传统的发酵蔬菜（酸菜）作为原材料,筛选出了一株新的产胞外多糖的乳酸杆菌,在评价了该乳酸杆菌的一些生理活性后,提取了该菌的胞外多糖,并对其物化性质、结构特征和生理功能做了一系列研究。产胞外多糖的乳酸菌菌落一般具有“拉丝”和“粘液”两种表型。本研究依据菌落表型特征从酸菜中发现了一株具有“粘液”表型的产胞外多糖乳酸杆菌。经过16S r DNA测序、进化分析和全基因组测序分析,确定该乳酸杆菌为干酪乳杆菌,并命名为干酪乳杆菌NA-2（Lactobacillus casei NA-2）。由体外耐酸耐胆盐评价结果可知,L.casei NA-2在p H为2～4的培养条件下,培养2 h时,存活率可达70%,且培养4 h后存活率仍高于50%,在含有0.03%～0.3%胆盐的培养基中培养2 h后,存活率可达90%,培养4 h时,存活率依然高达70%,具有较好的耐酸耐胆盐特性。将L.casei NA-2与蜡样芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7和金黄色葡萄球菌共培养24 h,结果表明,在L.casei NA-2生长不受影响的情况下,四种常见食源性病原菌的存活率均低于0.5%,甚至在共培养48 h后已检测不到某些存活的病原菌。通过扫描电子显微镜观察到共培养体系中的出现了L.casei NA-2和病原菌粘附在一起的现象。进一步将L.casei NA-2和四种病原菌等量混合后的菌液与Caco-2细胞共同培养,发现L.casei NA-2可以不同程度地抑制四种病原菌粘附Caco-2细胞,最高抑制率可达50%。本研究通过热水提取和乙醇沉淀的方法提取了附着在L.casei NA-2表面的胞外多糖,用TCA除去蛋白质后,进一步对所得L.casei NA-2胞外多糖进行了初步的结构分析。经红外光谱分析测定,可知该L.casei NA-2胞外多糖样品具有羟基和C-H等多糖的特征吸收峰;通过苯酚硫酸法和考马斯亮蓝法测定L.casei NA-2胞外多糖的总糖和蛋白含量分别为88%和0.28%;经硫酸酸解,TLC和HPLC测定,得出该胞外多糖是由鼠李糖、甘露糖和葡萄糖三种单糖组成的杂多糖,且三种单糖的摩尔比为24.3:1.0:42.9;采用HPLC测定L.casei NA-2胞外多糖分子量,可知其主要是由6.4×105 Da、2.0×105 Da和1.4×104Da三种分子量的多糖组成的混合物。通过荧光显色分析了L.casei NA-2胞外多糖抗生物膜活性,结果表明L.casei NA-2胞外多糖可以不同程度的抑制蜡样芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7和金黄色葡萄球菌生物膜的形成和分散四种病原菌已形成的生物膜,与L.casei NA-2抑制病原菌生长结果呈正相关。体外抗氧化的实验结果表明,L.casei NA-2胞外多糖具有清除羟基自由基、超氧自由基和DPPH的能力,且对超氧自由基的清除率显着高于抗坏血酸。L.casei NA-2胞外多糖处理RAW264.7巨噬细胞后,发现其至少可以通过调节NF-κB和JNK信号通路,上调细胞中ROS和TNF-α的产量,激活细胞免疫;L.casei NA-2胞外多糖与LPS叠加诱导细胞后,细胞中i NOS表达量降低,NO产量减少,表现出潜在的抗炎功能。
陈贤双[8]（2021）在《基于多糖糖谱技术的山西仿野生黄芪、甘肃移栽黄芪比较》文中研究说明选题依据:黄芪在全国各地都有分布,主产于山西、甘肃等地。黄芪用药历史悠久,黄芪药理作用广泛。黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷这两个主要药效成分是现行《中国药典》上黄芪的质量评价指标。中药品质评判标准只以某几种单一成分的含量为指标,这显然是不够全面的。黄芪多糖是黄芪中含量最多、活性最强的物质。前期课题组[1]通过体外免疫活性实验筛选、动物实验验证,比较了山西仿野生黄芪不同分子量免疫活性,发现分子量10 k Da多糖APS-II含量占比最大、免疫活性最强。然而甘肃移栽芪市场销量最大,其多糖分子量图谱与山西仿野生黄芪是否相同?甘肃移栽芪中是否也含有分子量10 KDa左右的多糖,两种不同生长方式的黄芪10 KDa的多糖结构和活性是否存在差异?因此为了阐明山西仿野生黄芪和甘肃移栽芪在多糖糖谱中的差异,建立以活性多糖组分为质量评价指标的黄芪质控方法。本论文通过建立黄芪多糖分子量糖谱,并比较了山西仿野生黄芪和甘肃移栽芪糖谱的区别,采用多元统计分析方法找出差异多糖,然后通过ROC曲线分析对两个产地不同种植方式差异多糖的临界值进行判定,并对差异多糖进行一级结构、高级结构分析以及体内免疫活性比较。目的是建立以差异活性多糖为含量测定指标的黄芪质控方法。本研究为黄芪多糖质量控制方法提供理论基础。目的:对山西仿野生黄芪多糖糖谱进行测定,并以其黄芪多糖糖谱作为标准。通过多糖糖谱方法比较山西仿野生黄芪和甘肃移栽芪黄芪多糖,找出差异的多糖组分。通过ROC曲线分析对两个产地不同种植方式差异多糖的临界值进行判定。然后利用超滤技术对差异多糖进行分离。然后进行差异多糖的体外免疫活性比较,并对一级结构和高级结构进行分析。方法:1.采用水提醇沉法对山西浑源仿野生黄芪多糖成分进行提取,然后对黄芪多糖糖谱进行测定。并检测多糖中的总糖含量、蛋白质含量、糖醛酸含量。2.将山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪多糖糖谱进行测定,应用多元统计分析比较多糖糖谱找出差异多糖组分,并通过ROC曲线分析找出两个产地不同种植方式差异多糖的临界值。3.运用超滤技术将山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪黄芪多糖中的差异多糖制备,对差异多糖一级结构如单糖组成,红外光谱,甲基化和核磁共振（NMR）波谱分析和高级结构如扫描电子显微镜,圆二色谱等技术进行分析,比较它们之间的结构差异。4.对分离出来的山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪差异多糖多糖从特异性免疫和非特异性免疫层面进行体外免疫活性的比较。5.通过ROC曲线确定山西仿野生黄芪和甘肃移栽芪APS-II峰面积比例限度。结果:1.采用高效凝胶色谱法对20批山西浑源仿野生黄芪多糖分子量糖谱进行测定,发现不同批次黄芪多糖具有相似的分子量分布。多糖分子量主要分成三个部分,其中一、二部分的多糖分子量高于500 k Da,超出线性范围。另一部分多糖分子量在10 k Da左右。还对山西浑源仿野生黄芪多糖中总糖含量、蛋白质含量、葡萄糖醛酸含量进行测定。发现山西仿野生黄芪中黄芪多糖的总糖含量为90.8%、蛋白质含量为0.36%、葡萄糖醛酸含量为12.8%。还进行了黄芪多糖的专属性研究,采用相同的方法对其他药材糖谱进行测定,发现黄芪多糖糖谱具有专属性。2.采用山西仿野生黄芪多糖糖谱相同的方法,对20批甘肃移栽黄芪多糖分子量糖谱进行测定。发现不同批次黄芪多糖同样具有相似的分子量分布。甘肃移栽芪多糖分子量主要分成四个部分,其中一、二部分的多糖分子量高于500 k Da,超出线性范围。第三部分多糖分子量在10 k Da左右。第四部分多糖分子量小于1 k Da。甘肃黄芪总多糖含量为88.6%,甘肃移栽黄芪蛋白质含量为0.45%,甘肃移栽黄芪糖醛酸含量为11.6%。还利用多元统计分析如PCA、PLS-DA、OPLS-DA比较了两个产地不同种植方式黄芪多糖糖谱,发现分子量10 k Da左右的多糖为两个产地黄芪多糖的差异多糖组分。3.对山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪差异多糖组分APS-II进行一级结构和高级结构的解析,发现两种APS-II的一级结构和高级结构高度相似。在单糖组成方面,两个产地黄芪中APS-ⅠI都是由Ara,Glu,Gal,Gal A和Rha这5种单糖组成,且单糖组成比例没有显着性差异。从红外光谱可以看出两个产地APS-ⅠI具有相同的官能团,主要为吡喃型的葡聚糖。根据甲基化和NMR分析发现,两个产地APS-II以葡萄糖为主要单体,连接方式为→4)-α-D-Glcp-（1→,→6）-α-D-Glcp-(1→。从高级结构层面分析发现两个产地APS-ⅠI。两个产地黄芪中APS-ⅠI均呈长直的条带状,表面光滑,有规整的三螺旋结构结构。4.采用体外细胞实验比较两个产地差异多糖组分APS-II对特异性免疫和非特异性免疫的影响。在最适浓度下,两个产地APS-II对非特异性免疫（巨噬细胞吞噬活性、NK细胞杀伤活性）、特异性免疫（B/T淋巴细胞、脾淋巴细胞分泌Ig G）均无显着性差异。5.通过黄芪多糖糖谱发现山西仿野生黄芪APS-II峰面积比例明显高于甘肃移栽芪。ROC曲线分析发现两种种植方式黄芪APS-II的峰面积比例临界值为89.75%。山西仿野生黄芪差异活性APS-II的峰面积比例高于89.75%,而甘肃移栽芪低于89.75%。结论:本论文比较了山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪黄芪多糖糖谱差异多糖组分为APS-II。山西仿野生黄芪APS-II峰面积比例明显高于甘肃移栽芪。通过ROC曲线分析发现两种种植方式黄芪APS-II的峰面积比例临界值为89.75%。还发现两个产地差异多糖组分APS-II一级结构和高级结构基本一致。体外细胞实验发现APS-Ⅱ在最适浓度下,两个产地APS-II对非特异性免疫和特异性免疫影响均无显着性差异。
王妍[9]（2021）在《党参多糖CPC的结构解析及其免疫活性研究》文中认为目的:现代研究表明,党参多糖是党参发挥生物活性重要的成分之一。目前,有关党参多糖的理化性质及免疫调节作用的研究已有报道,但是对党参多糖的免疫作用与其分子量、结构特征是否存在相关性的研究,仍不够系统和明确。因此,本文以党参为材料,提取、分离、纯化粗多糖后获得均一组分多糖CPC,对其进行结构解析;以RAW264.7细胞为靶细胞,对其体外免疫调节活性进行系统评估,从而为党参多糖资源的开发与利用提供理论依据。方法:（1）党参多糖CPC的分离纯化:本文参照课题组前期已获得的党参多糖提取专利进行多糖提取。即称取干燥后的党参粉末10 kg,按照料液比为1:10加入蒸馏水回流提取三次,每次提取1 h。将提取液浓缩至1/10体积,加入95%乙醇溶液至醇沉浓度为80%,4℃静置12 h,抽滤,将醇沉物分别用无水乙醇、丙酮和石油醚各洗3次,冷冻干燥后得党参总多糖。取党参总多糖沉淀物600 g溶解在适量蒸馏水中,经5000、3000和1000级超滤膜处理,冷冻干燥后得到多糖CPC 120 g。（2）党参多糖CPC的结构解析:采用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定CPC的分子量和均一性,利用紫外光谱（UV）、红外光谱（IR）、酸水解、甲基化分析、气相质谱（GC-MS）以及核磁共振波谱（NMR）等对其进行化学结构的鉴定。（3）党参多糖CPC的体外免疫活性研究:本文以RAW264.7细胞为模型,采用CCK-8法检测巨噬细胞的增殖能力,中性红染色法测定细胞的吞噬活性,DCFH-DA法检测细胞释放活性氧（ROS）的水平,Griess法测定细胞上清液中一氧化氮（NO）的释放水平,酶联免疫吸附法（ELISA）以及实时荧光定量PCR法（RT-qPCR）检测巨噬细胞中细胞因子（iNOS、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10）的分泌和基因表达情况。结果:（1）党参多糖CPC的结构分析:HPGPC测得CPC是一个峰值相对分子量约为1698 Da的均一多糖。然后结合酸水解、红外光谱扫描、甲基化分析、气相质谱以及核磁共振波谱法解析CPC的基本结构,推断出CPC由葡萄糖组成,主要的糖苷键类型是β-D-Glcp-（1→、→4）-α-Glcp-（1→、→4,6）-α-Glcp-(1→,且其摩尔比为1.7:6.4:1.7。（2）党参多糖CPC的体外免疫活性研究:本文在以小鼠巨噬细胞为模型的免疫活性评价试验中,从细胞水平上探究了CPC的免疫调节作用。结果表明在250～1000μg/mL浓度范围内的CPC通过提高RAW264.7细胞的增殖能力、增强细胞对中性红染料的吞噬能力、促进细胞NO和ROS的释放以及促进iNOS、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10的分泌和上调细胞因子的基因表达来增强免疫活性。结论:从党参总多糖中分离出的CPC是一种均一葡聚糖,表现出良好的免疫调节活性,有望成为一种新型的免疫调节剂,这为党参多糖更深入的研究和应用奠定了基础。
顾婷[10]（2021）在《美洲大蠊糖蛋白对免疫低下小鼠的免疫调节活性及其机制初探》文中研究说明目的:优化药用昆虫美洲大蠊糖蛋白提取工艺,并对其进行分离纯化和体外免疫活性筛选。建立免疫低下小鼠模型,对筛选得到的活性组分进行体内活性研究,评价美洲大蠊糖蛋白的免疫调节活性及其对NF-κB信号通路各相关因子mRNA的表达的影响,初步探讨其免疫调节的作用机制。方法:1.美洲大蠊经水提,醇沉,Sevage法除游离蛋白得到PAG组分,采用响应面优化PAG的提取工艺。2.通过大孔树脂、DEAE-FF对PAG进行分离纯化,并用MTT法研究分离纯化得到的各组分对RAW264.7增殖能力影响。3.采用UV-Vis法测定PAG、PAGW中多糖和蛋白的含量,HPLC法测定单糖组成;采用体外抗氧化活性研究PAG、PAGW对DPPH自由基清除率、总还原率、羟自由基和ABTS自由基清除率。4.以免疫低下小鼠为研究对象,采用全自动动物血细胞分析仪测定小鼠RBC、WBC、HGB、PLT的含量,研究PAG和PAGW对免疫低下小鼠血液指标的影响;采用MTT法测定PAG和PAGW对小鼠脾淋巴细胞的增殖能力的影响;采用流式细胞仪分析测定PAG和PAGW对脾细胞CD3+、CD4+、CD8+的影响;采用ELISA法测定血清中Ig G、Ig A、Ig M、IL-1β,IL-6和TNF-α的含量;采用RT-q PCR法检测小鼠脾细胞中NF-κB信号通路相关因子mRNA的表达。结果:1.PAG提取的最佳工艺:料液比1∶9:提取温度90℃,提取时间2.25 h,提取次数4次,糖蛋白的提取率约5.10%,与模型预测值相对误差为2.62%。2.PAG经大孔树脂洗脱得到PAGW,得率约2.26%,PAGW经分离纯化后得到PAGW-1、PAGW-2、PAGW-3、PAGW-4、PAGW-5、PAGW-6组分。给药剂量为800μg/m L时,PAGW,PAG对RAW264.7增殖能力大于100%,其余组分几乎无增殖能力。3.PAG、PAGW的多糖含量分别为20.64%、21.24%;PAG、PAGW的蛋白含量分别为65.99%、76.35%。PAG和PAGW的单糖组成:甘露糖、盐酸氨基葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖组成,PAG各单糖摩尔比为17.0∶13.2∶9.6∶53.4∶21.8∶1.0∶4.6∶1.3;PAGW单糖的摩尔比为21.3∶16.7∶12.3∶73.4∶31.8∶1.0∶5.2∶1.5;PAG和PAGW对DPPH自由基清除作用的IC50数值为0.028 mg/m L、0.025 mg/m L;总还原能力测定中,当PAG、PAGW的浓度为0.16 mg/m L时,吸光度分别为0.531、0.593,证明具有一定的还原能力;PAG、PAGW对羟自由基清除作用的IC50值为0.78 mg/m L、0.748 mg/m L;对ABTS自由基清除能力的IC50值分别为0.091 mg/m L、0.075 mg/m L。4.在给药剂量下,各项指标变化如下:（1）脏器指数:PAG和PAGW能使免疫低下小鼠的脾和胸腺指数增加,PAG-H、PAGW-L、PAGW-M、PAGW-H组的脾、胸腺指数较模型组明显增加（P<0.05,P<0.01）;（2）全血RBC、WBC、HGB、PLT:PAG与PAGW能改善免疫低下小鼠的血液指标,给药组WBC与RBC含量升高,差异均具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）,PAGW组HGB、PLT含量明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）;（3）脾淋巴细胞增殖:PAG和PAGW能促进脾淋巴细胞的增殖;与模型组比较,PAG-M、PAG-H、PAGW-L、PAGW-M、PAGW-H对B淋巴细胞的增殖能力显着增强（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,PAG和PAGW低中高剂量组对T淋巴细胞的增殖能力显着增强（P<0.05,P<0.01）;（4）PAG和PAGW能调节CD3+、CD4+与CD8+的细胞数,使紊乱的机体逐渐恢复;与模型组比较,给药组CD3+的细胞数增多,CD4+细胞数减少,CD8+细胞数基本不变;与模型组相比,PAG-H和PAGW组CD4+/CD8+明显降低,差异有统计学意义（P<0.01）;（5）PAG和PAGW能使免疫低下小鼠血清中Ig G、Ig A、Ig M、IL-1β,IL-6和TNF-α的含量升高,与模型组比较,除PAG-L组外,其余各组差异均有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;（6）CTX能使NF-κB通路中TLR4、My D88、TRAF-6、NF-κB p65、p-IκBα、p-NF-κB p65 mRNA的表达升高,与模型组比较,给药组TLR4、My D88、TRAF-6、NF-κB p65、p-IκBα、p-NF-κB p65 mRNA的表达均显着降低（P<0.01）,表明PAG和PAGW可能是通过NF-κB信号通路来调节机体的免疫功能。结论:1.研究得到美洲大蠊中糖蛋白PAG的最佳提取工艺:料液比1∶9,提取温度90℃,提取时间2.25 h,提取次数4次;2.PAG、PAGW均具有较好的体外免疫调节活性,但PAGW的免疫活性大于PAG;PAGW经进一步分离得到6各组分,其活性均较PAG、PAGW差,美洲大蠊中免疫调节活性最佳的糖蛋白为PAGW。3.PAG、PAGW中多糖含量小于蛋白含量,PAG与PAGW有清除DPPH自由基、羟自由基、ABTS自由基和一定的总还原能力,它们均有体外抗氧化活性,且体外抗氧化活性PAG﹤PAGW;4.PAG和PAGW能使免疫低下小鼠的体重、脏器指数、血液指标、脾组织、血清中免疫球蛋白和细胞因子得以恢复,使脾淋巴细胞增多,增殖能力加快。PAG和PAGW能使CTX所致的NF-κB信号通路中高表达的相关因子mRNA表达下调,说明PAG和PAGW有较好的免疫调节活性,其调节机制可能是通过NF-κB信号通路发挥作用。PAGW组对小鼠的免疫活性优于PAG组。
二、活性多糖增强免疫调节功能的研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、活性多糖增强免疫调节功能的研究进展（论文提纲范文）
（1）食品中免疫调节物质的研究进展（论文提纲范文）
| 1 人体的免疫调节 |
| 2 免疫调节功能物质的研究 |
| 2.1 多糖类 |
| 2.1.1 植物多糖 |
| 2.1.2 动物多糖 |
| 2.1.3 微生物多糖 |
| 2.2 氨基酸类 |
| 2.3 脂肪酸类 |
| 2.4 维生素类 |
| 2.5 其他 |
| 3 具有免疫调节功能的食品 |
| 4 结论与展望 |
（2）松花粉多糖对鸡肠道黏膜免疫的影响及巨噬细胞的免疫调节作用（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1 松花粉及多糖概述 |
| 2 多糖的生物活性 |
| 2.1 多糖的免疫调节活性 |
| 2.2 多糖的抗病毒活性 |
| 2.3 多糖的抗肿瘤活性 |
| 2.4 多糖的其他生物学活性 |
| 3 黏膜免疫 |
| 3.1 肠道黏膜免疫屏障 |
| 3.2 多糖对肠道黏膜免疫的影响 |
| 4 肠道菌群 |
| 4.1 肠道菌群高通量测序 |
| 4.2 多糖对肠道菌群的影响 |
| 5 巨噬细胞 |
| 5.1 多糖对巨噬细胞的免疫调节活性 |
| 5.2 巨噬细胞表面受体 |
| 5.3 多糖对巨噬细胞的免疫调节信号转导途径 |
| 6 研究目的与意义 |
| 第二章 松花粉多糖对黏膜免疫的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.1.1 多糖 |
| 1.1.2 实验动物及毒株 |
| 1.1.3 主要试剂 |
| 1.1.4 主要仪器 |
| 1.1.5 多糖溶液配制 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 实验动物分组及处理 |
| 1.2.2 体重及免疫器官称重 |
| 1.2.3 外周血淋巴细胞转化率测定 |
| 1.2.4 外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞含量检测 |
| 1.2.5 SIg A含量测定 |
| 1.2.6 血清中IgG含量的检测 |
| 1.2.7 qPCR检测肠道黏膜细胞因子 |
| 1.2.8 qPCR检测肠道黏膜免疫相关分子 |
| 1.2.9 PPPS对肠绒毛结构的影响 |
| 1.2.10 PPPS的攻毒保护作用 |
| 1.3 统计分析 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 PPPS对体重及免疫器官的影响 |
| 2.2 PPPS对外周血淋巴细胞转化率的影响 |
| 2.3 PPPS对外周血CD4+、CD8+T 淋巴细胞含量变化的影响 |
| 2.4 PPPS对肠道黏膜SIgA和血清IgG的影响 |
| 2.5 PPPS对肠道黏膜细胞因子的影响 |
| 2.6 PPPS对肠道黏膜免疫相关分子mRNA的影响 |
| 2.7 PPPS对肠绒毛结构的影响 |
| 2.7.1 PPPS对十二指肠绒毛长度、宽度、隐窝深度及V/C值的影响 |
| 2.7.2 PPPS对空肠绒毛长度、宽度、隐窝深度及V/C值的影响 |
| 2.7.3 PPPS对回肠绒毛长度、宽度、隐窝深度及V/C值的影响 |
| 2.8 PPPS对肠绒毛形态的影响 |
| 2.8.1 口服PPPS7 天对肠绒毛形态的影响 |
| 2.8.2 口服PPPS14 天对肠绒毛形态的影响 |
| 2.8.3 口服PPPS21 天对肠绒毛形态的影响 |
| 2.9 PPPS对 NDV攻毒保护作用 |
| 2.9.1 攻毒后PPPS对体重及存活率的影响 |
| 2.9.2 攻毒后PPPS对肠道黏膜中病毒载量的影响 |
| 2.9.3 攻毒后肠道黏膜及肺脏组织学观察 |
| 2.10 PPPS对 H9N2 攻毒保护作用 |
| 2.10.1 攻毒后PPPS对肺脏病理变化影响 |
| 2.10.2 攻毒后PPPS对肺脏中病毒载量的影响 |
| 3 分析与讨论 |
| 第三章 松花粉多糖对鸡肠道菌群的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.1.1 多糖及溶液配制 |
| 1.1.2 实验动物 |
| 1.1.3 主要试剂 |
| 1.1.4 主要仪器 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 样品采集 |
| 1.2.2 样本DNA提取 |
| 1.2.3 PCR扩增与产物纯化 |
| 1.2.4 生物信息学和统计分析 |
| 1.2.5 测序数据质量优化 |
| 1.2.6 OTU聚类及Venn图绘制 |
| 1.2.7 物种相对丰度图及热图 |
| 1.2.8 α多样性及UPGMA聚类树分析 |
| 1.2.9 qPCR验证测序结果 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 数据质量分析 |
| 2.2 基于OTU的 Venn图 |
| 2.3 物种相对丰度图 |
| 2.4 α多样性指数分析 |
| 2.5 等级聚类曲线 |
| 2.6 稀释曲线 |
| 2.7 UPGMA聚类树 |
| 2.8 qPCR验证 |
| 3 分析与讨论 |
| 第四章 松花粉多糖对巨噬细胞的免疫调节作用 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.1.1 多糖及溶液配制 |
| 1.1.2 细胞 |
| 1.1.3 主要试剂 |
| 1.1.4 主要仪器 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 巨噬细胞的复苏与培养 |
| 1.2.2 PPPS对 HD11 细胞增殖的影响 |
| 1.2.3 PPPS对 HD11 细胞吞噬作用的影响 |
| 1.2.4 PPPS对 HD11 细胞活性氧水平的影响 |
| 1.2.5 PPPS对 HD11 细胞分泌NO的影响 |
| 1.2.6 PPPS对 HD11 细胞分泌IL-1β和TNF-α的影响 |
| 1.2.7 细胞总RNA提取及质量检测 |
| 1.2.8 mRNA测序及数据分析 |
| 1.2.9 miRNA测序及数据分析 |
| 1.2.10 PPPS对 HD11 细胞受体的影响 |
| 1.2.11 MAPK抑制剂对HD11 细胞分泌NO、TNF-α和IL-1β的影响 |
| 1.2.12 PPPS对 HD11 细胞NF-κB分子的影响 |
| 1.3 统计分析 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 PPPS对 HD11 细胞的免疫增强作用 |
| 2.1.1 PPPS对 HD11 细胞增殖作用 |
| 2.1.2 PPPS对 HD11 细胞吞噬作用的影响 |
| 2.1.3 PPPS对 HD11 细胞释放ROS的影响 |
| 2.1.4 PPPS对 HD11 细胞释放NO和 i NOS mRNA水平的影响 |
| 2.1.5 PPPS对 HD11 细胞分泌细胞因子的影响 |
| 2.2 PPPS对 HD11 细胞免疫调节作用转录组分析 |
| 2.2.1 测序数据与参考序列比对结果 |
| 2.2.2 皮尔逊相关系数和PCA分析结果 |
| 2.2.3 DEGs的鉴定和分析 |
| 2.2.4 DEGs的 GO和 KEGG通路富集分析 |
| 2.2.5 差异表达mRNA qPCR验证 |
| 2.2.6 miRNA测序分析及测序数据质量 |
| 2.2.7 miRNA差异表达鉴定和分析 |
| 2.2.8 miRNA靶基因的GO和 KEGG通路富集分析 |
| 2.2.9 差异表达miRNA的 qPCR验证 |
| 2.3 PPPS对 HD11 细胞受体的影响 |
| 2.3.1 PPPS对 HD11 细胞受体TLR2、4、MR的影响 |
| 2.3.2 TLR4 抑制剂抑制HD11 细胞分泌IL-1β、TNF-α、NO |
| 2.4 MAPK抑制剂抑制PPPS诱导HD11 细胞分泌IL-1β、TNF-α、NO |
| 2.5 PPPS对 HD11 细胞NF-κB分子的影响 |
| 2.5.1 PPPS上调HD11 细胞NF-κB分子mRNA水平 |
| 2.5.2 NF-κB抑制剂抑制HD11 细胞分泌IL-1β、TNF-α、NO |
| 3 分析与讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
（3）黄芪活性多糖APS-Ⅱ免疫调控机制及其酶解寡糖片段的结构和活性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 引言 |
| 1.1 立题背景及意义 |
| 1.2 研究内容、技术流程图及创新点 |
| 1.2.1 研究内容 |
| 1.2.2 技术路线图 |
| 1.2.3 创新点 |
| 第二章 文献综述 |
| 2.1 黄芪多糖结构与活性研究现状 |
| 2.2 活性多糖降解制备寡糖方法 |
| 2.3 寡糖结构与活性研究现状 |
| 2.3.1 寡糖生物活性研究现状 |
| 2.3.2 寡糖结构解析研究现状 |
| 第三章 不同分子量黄芪多糖血清代谢组学研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料和仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 不同分子量黄芪多糖的制备 |
| 3.3.2 实验动物 |
| 3.3.3 分组与给药 |
| 3.3.4 药效学评价 |
| 3.3.5 LC-MS代谢组学数据采集 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 不同分子量黄芪多糖的纯度及分子量 |
| 3.4.2 药效学评价 |
| 3.4.3 UHPLC Q-Exactive MS代谢组学研究 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 免疫活性多糖APS-Ⅱ酶降解 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和仪器 |
| 4.2.1 材料 |
| 4.2.2 仪器与试剂 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 APS-Ⅱ分离制备的操作方法 |
| 4.3.2 黄芪多糖定向酶解 |
| 4.3.3 APS-Ⅱ酶解寡糖混合物的分离纯化 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 APS-Ⅱ分离制备 |
| 4.4.2 黄芪多糖定向酶解条件 |
| 4.4.3 寡糖混合物分离纯化 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 酶解寡糖的结构研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料和仪器 |
| 5.2.1 试剂 |
| 5.2.2 仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 酶解寡糖的红外光谱测定 |
| 5.3.2 酶解寡糖单糖组成分析 |
| 5.3.3 酶解寡糖甲基化分析 |
| 5.3.4 酶解寡糖核磁共振波谱分析 |
| 5.3.5 酶解寡糖质谱解析 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 酶解寡糖红外光谱分析 |
| 5.4.2 酶解寡糖单糖组成分析 |
| 5.4.3 酶解寡糖甲基化分析 |
| 5.4.4 酶解寡糖核磁共振波谱分析 |
| 5.4.5 酶解寡糖质谱分析 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 不同寡糖组分免疫活性比较研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料和仪器 |
| 6.2.1 材料 |
| 6.2.2 仪器 |
| 6.3 实验方法 |
| 6.3.1 不同寡糖组分对Raw264.7细胞吞噬活性影响 |
| 6.3.2 不同寡糖组分对NK细胞的细胞杀伤活性的影响 |
| 6.3.3 不同寡糖组分对淋巴细胞增殖影响 |
| 6.3.4 不同寡糖组分对脾淋巴细胞分泌IgG的影响 |
| 6.4 结果与讨论 |
| 6.4.1 不同寡糖组分对Raw264.7细胞吞噬活性影响 |
| 6.4.2 不同寡糖组分对小鼠脾NK细胞杀伤活性的影响 |
| 6.4.3 不同寡糖组分协同LPS对小鼠脾淋巴细胞增殖功能的影响 |
| 6.4.4 不同寡糖组分协同ConA对小鼠脾淋巴细胞增殖功能的影响 |
| 6.4.5 不同寡糖组分协同LPS对小鼠脾淋巴细胞分泌IgG的影响 |
| 6.5 小结 |
| 第七章 总结与展望 |
| 7.1 工作总结 |
| 7.1.1 不同分子量黄芪多糖血清代谢组学研究 |
| 7.1.2 免疫活性多糖APS-Ⅱ酶降解方法建立 |
| 7.1.3 活性多糖APS-Ⅱ酶降解寡糖结构解析 |
| 7.1.4 不同寡糖组分免疫活性比较研究 |
| 7.2 展望 |
| 参考文献 |
| 研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简况及联系方式 |
（4）HsPc-HA营养液的挤压制备及其功能性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 挤压膨化技术 |
| 1.1.1 挤压膨化技术简介 |
| 1.1.2 挤压膨化技术的应用 |
| 1.2 多糖研究进展 |
| 1.2.1 猴头菇多糖研究进展 |
| 1.2.2 刺五加多糖研究进展 |
| 1.2.3 茯苓多糖研究进展 |
| 1.3 白术内酯研究进展 |
| 1.4 多糖作用效果 |
| 1.4.1 抗肿瘤作用 |
| 1.4.2 免疫调节作用 |
| 1.4.3 降血糖降血脂作用 |
| 1.4.4 抗炎作用 |
| 1.5 选题意义及内容 |
| 第二章 HsPc-HA原料组分的挤压膨化预处理 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与仪器设备 |
| 2.2.1 材料 |
| 2.2.2 主要试剂及耗材 |
| 2.2.3 主要仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 猴头菇挤压膨化预处理 |
| 2.3.2 猴头菇多糖的提取 |
| 2.3.3 葡萄糖标准曲线的建立 |
| 2.3.4 多糖含量的测定 |
| 2.3.5 挤压膨化预处理单因素实验设计 |
| 2.3.6 响应面优化试验 |
| 2.3.7 统计学分析 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 单因素实验结果与分析 |
| 2.4.2 响应面试验结果与分析 |
| 2.4.3 最优条件验证分析 |
| 2.4.4 原料挤压膨化预处理 |
| 2.4.5 挤压膨化预处理对多糖提取率的影响 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 HsPc-HA营养液的制备及其对IEC-6 细胞修复、损伤迁移能力的研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与仪器设备 |
| 3.2.1 材料 |
| 3.2.2 主要试剂及耗材 |
| 3.2.3 主要仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 HsPc-HA营养液的制备 |
| 3.3.2 脾淋巴细胞的制备 |
| 3.3.3 不同多糖组分对脾淋巴细胞的增殖作用 |
| 3.3.4 细胞培养 |
| 3.3.5 MTT法筛选CTX诱导IEC-6 细胞损伤模型最佳造模条件 |
| 3.3.6 HsPc-HA对 CTX诱导IEC-6 细胞损伤模型的修复作用 |
| 3.3.7 HsPc-HA对 CTX诱导IEC-6 细胞损伤模型的迁移作用 |
| 3.3.8 HsPc-HA对 CTX诱导IEC-6 细胞损伤模型的HE染色 |
| 3.3.9 统计学分析 |
| 3.4 实验结果分析 |
| 3.4.1 有效组分配比筛选结果 |
| 3.4.2 CTX诱导IEC-6 细胞损伤模型造模条件结果 |
| 3.4.3 HsPc-HA对 CTX诱导IEC-6 细胞损伤模型的修复作用结果 |
| 3.4.4 HsPc-HA对 CTX诱导IEC-6 细胞损伤模型的迁移作用结果 |
| 3.4.5 HsPc-HA对 CTX诱导的IEC-6 细胞损伤模型HE染色结果 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 化疗后荷瘤鼠体内调节及作用机理研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与仪器设备 |
| 4.2.1 原料 |
| 4.2.2 主要试剂及耗材 |
| 4.2.3 主要仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 安全性实验 |
| 4.3.2 模型建立 |
| 4.3.3 实验分组及给药方案 |
| 4.3.4 HsPc-HA对化疗后荷瘤鼠胃肠改善功能研究 |
| 4.3.5 HsPc-HA对化疗后荷瘤鼠抗炎功能研究 |
| 4.3.6 HsPc-HA对化疗后荷瘤鼠行为学作用研究 |
| 4.3.7 HsPc-HA对化疗后荷瘤鼠体内免疫调节作用研究 |
| 4.3.8 对降低肝肾功能损伤作用研究 |
| 4.3.9 ELISA检测化疗后荷瘤鼠血清细胞因子含量 |
| 4.3.10 Western Blot检测化疗后荷瘤鼠脾脏组织中NF-кB p65 蛋白的表达量 |
| 4.3.11 统计学分析 |
| 4.4 结果与分析 |
| 4.4.1 安全性实验结果 |
| 4.4.2 HsPc-HA对化疗后荷瘤鼠胃肠改善功能研究结果 |
| 4.4.3 HsPc-HA对化疗后荷瘤鼠抗炎功能研究结果 |
| 4.4.4 HsPc-HA对化疗后荷瘤鼠行为学作用研究结果 |
| 4.4.5 HsPc-HA对化疗后荷瘤鼠体内免疫调节作用研究结果 |
| 4.4.6 HsPc-HA对降低化疗后荷瘤鼠肝肾功能损伤作用研究结果 |
| 4.4.7 HsPc-HA对化疗后荷瘤鼠血清细胞因子含量影响的结果 |
| 4.4.8 HsPc-HA对化疗后荷瘤鼠脾脏组织中NF-кB p65 蛋白表达的影响 |
| 4.5 本章小结 |
| 结论、展望与创新点 |
| 1 结论 |
| 2 创新点 |
| 3 展望 |
| 参考文献 |
| 个人简历及攻读学位期间科研成果 |
| 致谢 |
（5）黄芪活性多糖APS-Ⅱ三氟乙酸降解寡糖片段的免疫活性筛选与结构初探（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 立题背景及意义 |
| 1.2 研究内容、技术路线图及创新点 |
| 1.2.1 研究内容 |
| 1.2.2 技术路线图 |
| 1.2.3 创新点 |
| 第二章 文献综述 |
| 2.1 糖类的研究 |
| 2.1.1 多糖的研究现状 |
| 2.1.2 寡糖的基本概述 |
| 2.1.3 寡糖的研究成果 |
| 2.2 多糖的降解方法 |
| 2.2.1 化学降解 |
| 2.2.2 生物降解 |
| 2.2.3 物理降解 |
| 2.3 寡糖的分离制备 |
| 2.3.1 制备液相分离制备 |
| 2.3.2 聚丙烯酰胺凝胶柱分离制备 |
| 2.3.3 膜分离制备 |
| 2.4 寡糖的结构解析方法 |
| 2.4.1 寡糖的液相表征分析 |
| 2.4.2 寡糖的高效液相色谱质谱联用分析 |
| 2.4.3 寡糖的气相色谱质谱联用分析 |
| 2.4.4 寡糖的红外检测 |
| 2.4.5 寡糖的核磁测定 |
| 2.5 寡糖的生物活性 |
| 2.5.1 促进免疫功能 |
| 2.5.2 抗抑郁作用 |
| 2.5.3 降低血糖 |
| 2.5.4 保护心肌受损 |
| 2.5.5 调节菌群比例 |
| 2.5.6 其他作用 |
| 第三章 黄芪免疫活性多糖的三氟乙酸水解 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料试剂和仪器 |
| 3.2.1 研究对象 |
| 3.2.2 试剂 |
| 3.2.3 仪器 |
| 3.3 实验内容 |
| 3.3.1 黄芪免疫活性多糖的制备 |
| 3.3.2 黄芪免疫活性多糖酸水解的单因素考察 |
| 3.3.3 黄芪免疫活性多糖酸水解的L_9(3~3)正交试验 |
| 3.3.4 酸水解的重复性实验 |
| 3.3.5 酸水解的稳定性实验 |
| 3.3.6 黄芪混寡糖的批量制备 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 黄芪免疫活性多糖的液相表征 |
| 3.4.2 黄芪免疫活性多糖酸水解的单因素实验结果 |
| 3.4.3 黄芪免疫活性多糖酸水解的最优条件分析 |
| 3.4.4 酸水解的重复性评价 |
| 3.4.5 酸水解的稳定性评价 |
| 3.4.6 黄芪混寡糖的产率 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 黄芪免疫活性多糖降解寡糖的分离制备及结构解析 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料试剂和仪器 |
| 4.2.1 研究对象 |
| 4.2.2 试剂 |
| 4.2.3 仪器 |
| 4.3 实验内容 |
| 4.3.1 黄芪混寡糖的质谱检测 |
| 4.3.2 不同寡糖片段的分离制备 |
| 4.3.3 不同寡糖片段的单糖组成测定 |
| 4.3.4 不同寡糖片段的红外测定 |
| 4.3.5 不同寡糖片段的甲基化分析 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 黄芪混寡糖的质谱分析 |
| 4.4.2 不同寡糖片段的制备及液相表征 |
| 4.4.3 不同寡糖片段的单糖组成分析 |
| 4.4.4 不同寡糖片段的红外分析 |
| 4.4.5 不同寡糖片段的甲基化分析 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 基于体外免疫细胞的黄芪免疫活性多糖中活性寡糖片段的筛选 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料试剂和仪器 |
| 5.2.1 研究对象 |
| 5.2.2 试剂 |
| 5.2.3 仪器 |
| 5.3 实验内容 |
| 5.3.1 不同聚合度寡糖片段的固有免疫 |
| 5.3.1.1 对巨噬细胞的吞噬活性测定 |
| 5.3.1.2 对自然杀伤细胞的细胞毒性测定 |
| 5.3.2 不同聚合度寡糖片段的特异性免疫 |
| 5.3.2.1 对刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞的影响 |
| 5.3.2.2 对脂多糖诱导的B淋巴细胞的影响 |
| 5.3.2.3 对脂多糖诱导的脾淋巴细胞分泌Ig G的影响 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 不同寡糖片段的对巨噬细胞的吞噬活性 |
| 5.4.2 不同寡糖片段对自然杀伤细胞的杀伤活性 |
| 5.4.3 不同寡糖片段对T淋巴细胞的影响 |
| 5.4.4 不同寡糖片段对B淋巴细胞的影响 |
| 5.4.5 不同寡糖片段对脾淋巴细胞分泌Ig G的影响 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 总结与展望 |
| 6.1 研究工作总结 |
| 6.2 展望 |
| 6.3 学习心得 |
| 参考文献 |
| 研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简况及联系方式 |
（6）壶瓶碎米荠多糖分离纯化、结构鉴定及生物活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第一章 前言 |
| 1 研究背景 |
| 1.1 壶瓶碎米荠简介 |
| 1.2 植物多糖的研究进展 |
| 1.2.1 生物活性多糖调节作用及机制 |
| 1.2.2 多糖的构效关系 |
| 1.3 多糖结构鉴定的研究进展 |
| 1.3.1 多糖的一级结构 |
| 1.3.2 多糖的高级结构 |
| 2 研究目的及意义 |
| 3 研究的主要内容及特色 |
| 第二章 壶瓶碎米荠多糖的提取分离工艺 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料与仪器 |
| 1.1.1 实验材料 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 壶瓶碎米荠多糖提取工艺 |
| 1.2.2 壶瓶碎米荠多糖提取工艺优化 |
| 1.2.3 多糖含量测定 |
| 1.2.4 统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 单因素分析 |
| 2.1.1 液料比影响 |
| 2.1.2 纤维素酶酶量影响 |
| 2.1.3 提取时间影响 |
| 2.1.4 提取温度影响 |
| 2.1.5 超声波时间影响 |
| 2.2 响应面结果分析 |
| 3 结论与讨论 |
| 第三章 壶瓶碎米荠多糖的纯化及结构分析 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料与仪器 |
| 1.1.1 实验材料 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 壶瓶碎米荠粗多糖的提取 |
| 1.2.2 脱蛋白 |
| 1.2.3 阴离子层析柱洗脱 |
| 1.2.4 多糖测定方法 |
| 1.2.5 红外光谱扫描 |
| 1.2.6 单糖组成分析 |
| 1.2.7 分子量检测 |
| 1.2.8 SEM检测 |
| 1.2.9 X-射线衍射扫描 |
| 1.2.10 核磁共振扫描 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 壶瓶碎米荠多糖的纯化 |
| 2.2 CHP-1 的结构分析 |
| 2.2.1 CHP-1凝胶洗脱曲线 |
| 2.2.2 CHP-1 的分子量 |
| 2.2.3 CHP-1 的单糖组成 |
| 2.2.4 CHP-1 红外光谱分析 |
| 2.3 CHP-2 的结构分析 |
| 2.3.1 CHP-2凝胶洗脱曲线 |
| 2.3.2 CHP-2 的分子量 |
| 2.3.3 CHP-2 的单糖组成 |
| 2.3.4 CHP-2 的傅里叶红外光谱分析 |
| 2.3.5 CHP-2的X-射线衍射(XDR)分析 |
| 2.3.6 CHP-2 的扫描电镜(SEM)分析 |
| 2.3.7 CHP-2 的核磁共振(NMR)分析 |
| 2.4 CHP-3 的结构分析 |
| 2.4.1 CHP-3的凝胶洗脱曲线 |
| 2.4.2 CHP-3 的分子量 |
| 2.4.3 CHP-3 的单糖组成 |
| 2.4.4 CHP-3 的傅里叶红外光谱分析 |
| 2.4.5 CHP-3的X-射线衍射(XDR)分析 |
| 2.4.6 CHP-3 的扫描电镜(SEM)分析 |
| 2.4.7 CHP-3 的核磁共振(NMR)分析 |
| 2.5 CHP-4 的结构分析 |
| 2.5.1 CHP-4的凝胶洗脱曲线 |
| 2.5.2 CHP-4 的分子量 |
| 2.5.3 CHP-4 的单糖组成 |
| 2.5.4 CHP-4 的傅里叶红外光谱分析 |
| 2.5.5 CHP-4的X-射线衍射(XDR)分析 |
| 2.5.6 CHP-4 的扫描电镜(SEM)分析 |
| 2.5.7 CHP-4 的核磁共振(NMR)分析 |
| 3 结论与讨论 |
| 第四章 壶瓶碎米荠多糖的生物活性研究 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料与仪器 |
| 1.1.1 实验材料 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 ABTS自由基清除能力测定 |
| 1.2.2 羟基自由基清除能力测定 |
| 1.2.3 总还原能力测定 |
| 1.2.4 CHP-3 对A549 细胞的影响 |
| 1.2.5 CHP-3 对A549 细胞的凋亡验证 |
| 1.2.6 CHP-3 对A549 细胞的凋亡机制研究 |
| 2 实验结果与分析 |
| 2.1 壶瓶碎米荠粗多糖的抗氧化活性 |
| 2.1.1 ABTS自由基清除能力 |
| 2.1.2 羟基自由基清除能力 |
| 2.1.3 总还原能力测定 |
| 2.2 CHP-3 对A549 细胞的影响分析 |
| 2.2.1 CHP-3 对A549 细胞的细胞活力影响 |
| 2.2.2 CHP-3 对A549 细胞的增殖能力影响 |
| 2.2.3 CHP-3 对A549 细胞的迁移能力影响 |
| 2.2.4 CHP-3 对A549 细胞的侵袭能力影响 |
| 2.3 CHP-3 对A549 细胞凋亡能力影响机制 |
| 2.3.1 TUNEL法对A549 细胞凋亡检测结果 |
| 2.3.2 流式细胞仪对A549 细胞凋亡检测结果 |
| 2.3.3 A549 细胞中RNA表达检测结果 |
| 2.3.4 A549 细胞中蛋白表达结果检测 |
| 2.3.5 A549 细胞中Caspase-3 活性检测结果 |
| 3 结论与讨论 |
| 第五章 结论与展望 |
| 1 结论 |
| 1.1 壶瓶碎米荠多糖提取的响应面优化 |
| 1.2 壶瓶碎米荠多糖的结构解析 |
| 1.3 壶瓶碎米荠多糖的生理活性 |
| 2 展望 |
| 2.1 继续研究 |
| 2.1.1 壶瓶碎米荠多糖的结构详细探究 |
| 2.1.2 壶瓶碎米荠多糖的硒含量检测 |
| 2.1.3 壶瓶碎米荠多糖对肿瘤细胞的机制研究 |
| 2.2 深入研究 |
| 2.2.1 壶瓶碎米荠多糖的硒结合位点探究 |
| 2.2.2 壶瓶碎米荠的无硒化育苗 |
| 2.2.3 无硒壶瓶碎米荠多糖的种类与功能 |
| 2.2.4 壶瓶碎米荠无机硒转化为有机硒的通路研究 |
| 2.2.5 多糖的硒化改性研究 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间主要研究成果、参加学术会议及获奖 |
| 致谢 |
（7）食源性干酪乳杆菌NA-2抑菌特性及其胞外多糖功效研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 益生菌简介 |
| 1.2 乳酸菌 |
| 1.2.1 乳酸菌定义及分类 |
| 1.2.2 乳酸菌的生物学特性 |
| 1.2.3 益生乳酸菌的功能活性 |
| 1.2.4 益生乳酸菌的应用 |
| 1.3 多糖简介 |
| 1.3.1 微生物多糖 |
| 1.4 乳酸菌胞外多糖研究现状 |
| 1.4.1 产胞外多糖的乳酸菌 |
| 1.4.2 乳酸菌胞外多糖定义及分类 |
| 1.4.3 胞外多糖生物合成途径 |
| 1.4.4 影响胞外多糖产量的因素 |
| 1.4.5 胞外多糖的分离纯化 |
| 1.4.6 胞外多糖的功能特性及应用 |
| 1.5 传统发酵东北酸菜研究进展 |
| 1.5.1 酸菜简介 |
| 1.5.2 东北酸菜的微生态系统及其发酵过程 |
| 1.5.3 东北酸菜中微生物的研究进展 |
| 1.6 本论文的研究目的和意义 |
| 1.7 本论文的研究目标和内容 |
| 1.8 技术路线 |
| 第二章 产胞外多糖乳酸杆菌的筛选和鉴定 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与设备 |
| 2.2.1 实验材料与试剂 |
| 2.2.2 实验设备与仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 样品采集与处理 |
| 2.3.2 样品处理 |
| 2.3.3 乳酸杆菌的分离纯化 |
| 2.3.4 乳酸杆菌的16S rDNA鉴定 |
| 2.3.5 产胞外多糖乳酸杆菌的鉴定和进化分析 |
| 2.3.6 乳酸杆菌全基因组测序分析 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 乳酸杆菌的分离与初步鉴定 |
| 2.4.2 产胞外多糖乳酸杆菌的鉴定 |
| 2.4.3 L.casei NA-2进化分析 |
| 2.4.4 L.casei NA-2全基因组测序分析 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 L.casei NA-2特性及抑菌功效评价 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与设备 |
| 3.2.1 实验材料与试剂 |
| 3.2.2 实验设备与仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 L.casei NA-2耐酸特性评价 |
| 3.3.2 L.casei NA-2耐受高浓度胆盐特性评价 |
| 3.3.3 L.casei NA-2与病原菌共培养 |
| 3.3.4 L.casei NA-2抑制病原菌粘附Caco-2细胞 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 L.casei NA-2耐酸结果 |
| 3.4.2 L.casei NA-2耐受高浓度胆盐结果 |
| 3.4.3 L.casei NA-2与病原菌共培养的实验结果 |
| 3.4.4 L.casei NA-2抑制病原菌粘附Caco-2细胞的实验结果 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 L.casei NA-2胞外多糖提取及检测 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与设备 |
| 4.2.1 实验材料与试剂 |
| 4.2.2 实验设备与仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 L.casei NA-2胞外多糖的提取 |
| 4.3.2 傅立叶转换红外光谱测定L.casei NA-2胞外多糖 |
| 4.3.3 L.casei NA-2胞外多糖中总糖和蛋白质含量测定 |
| 4.3.4 L.casei NA-2胞外多糖中单糖组分的测定 |
| 4.3.5 L.casei NA-2胞外多糖分子量测定 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 L.casei NA-2胞外多糖傅立叶红外光谱检测结果 |
| 4.4.2 L.casei NA-2胞外多糖中总糖和蛋白质含量 |
| 4.4.3 L.casei NA-2胞外多糖中单糖组分及其含量 |
| 4.4.4 L.casei NA-2胞外多糖分子量结果 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 L.casei NA-2胞外多糖抗生物膜和抗氧化活性评价 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料与设备 |
| 5.2.1 实验材料与试剂 |
| 5.2.2 实验设备与仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 荧光显微镜观察L.casei NA-2胞外多糖对病原菌生物膜的影响 |
| 5.3.2 定量检测L.casei NA-2胞外多糖抗生物膜活性 |
| 5.3.3 L.casei NA-2胞外多糖体外抗氧化活性检测 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 L.casei NA-2胞外多糖抑制病原菌生物膜形成 |
| 5.4.2 L.casei NA-2胞外多糖分散病原菌生物膜活性测定 |
| 5.4.3 L.casei NA-2胞外多糖体外抗氧化活性 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 L.casei NA-2胞外多糖免疫调节和抗炎活性研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验材料与设备 |
| 6.2.1 实验材料与试剂 |
| 6.2.2 实验设备与仪器 |
| 6.3 实验方法 |
| 6.3.1 细胞培养 |
| 6.3.2 L.casei NA-2胞外多糖免疫活性测定 |
| 6.3.3 L.casei NA-2胞外多糖对LPS诱导细胞的细胞活性和NO的影响 |
| 6.3.4 蛋白免疫印迹法检测iNOS、NF-κB p65和c-jun的蛋白表达量 |
| 6.4 结果与讨论 |
| 6.4.1 L.casei NA-2胞外多糖对细胞活性、NO、IL-6和TNF-α的影响 |
| 6.4.2 L.casei NA-2胞外多糖对巨噬细胞产生ROS的影响 |
| 6.4.3 L.casei NA-2胞外多糖对LPS诱导处理巨噬细胞的细胞活性和NO的影响 |
| 6.4.4 L.casei NA-2胞外多糖诱导巨噬细胞中iNOS、NF-κB p65和c-jun蛋白的表达结果 |
| 6.5 小结 |
| 第七章 结论与建议 |
| 7.1 结论 |
| 7.2 创新点 |
| 7.3 有待进一步研究和解决的问题 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（8）基于多糖糖谱技术的山西仿野生黄芪、甘肃移栽黄芪比较（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 引言 |
| 1.1 立题背景和意义 |
| 1.2 本课题的研究内容、技术路线图及创新点 |
| 1.2.1 本课题的研究内容 |
| 1.2.2 本课题的技术路线图 |
| 1.2.3 创新点 |
| 第二章 文献综述 |
| 2.1 多糖分离纯化研究进展 |
| 2.1.1 分级沉淀法 |
| 2.1.2 超滤法 |
| 2.1.3 季铵盐沉淀法 |
| 2.1.4 柱分离法 |
| 2.2 多糖一级结构研究 |
| 2.2.1 单糖组成分析 |
| 2.2.2 多糖连接位点分析 |
| 2.2.3 官能团分析 |
| 2.2.4 糖苷键构型及连接顺序测定 |
| 2.3 多糖高级结构研究 |
| 2.4 中药多糖免疫调节研究进展 |
| 2.4.1 中药多糖对非特异性免疫的影响 |
| 2.4.2 中药多糖对特异性免疫的影响 |
| 第三章 山西仿野生黄芪多糖糖谱的建立 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料和仪器 |
| 3.2.1 植物材料 |
| 3.2.2 仪器 |
| 3.2.3 试剂 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 黄芪多糖的提取制备 |
| 3.3.2 黄芪多糖总糖含量的测定 |
| 3.3.3 黄芪多糖蛋白含量的测定 |
| 3.3.4 黄芪多糖糖醛酸含量测定 |
| 3.3.5 黄芪多糖糖谱的测定 |
| 3.3.6 黄芪多糖糖谱测定方法的方法学考察 |
| 3.3.7 黄芪多糖糖谱专属性研究 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 黄芪多糖的分析鉴定 |
| 3.4.2 黄芪多糖糖谱的测定 |
| 3.4.3 黄芪多糖糖谱测定方法的方法学考察 |
| 3.4.4 黄芪多糖糖谱的专属性 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪多糖糖谱差异多糖组分的筛选 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和仪器 |
| 4.2.1 植物材料 |
| 4.2.2 仪器 |
| 4.2.3 试剂 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 甘肃移栽黄芪多糖的提取制备 |
| 4.3.2 甘肃移栽黄芪多糖总糖含量的测定 |
| 4.3.3 甘肃移栽黄芪多糖蛋白含量的测定 |
| 4.3.4 甘肃移栽黄芪多糖糖醛酸含量测定 |
| 4.3.5 甘肃移栽黄芪多糖糖谱的测定方法 |
| 4.3.6 数据处理 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 甘肃移栽黄芪黄芪多糖的分析鉴定 |
| 4.4.2 甘肃移栽黄芪多糖糖谱的测定 |
| 4.4.3 多元统计分析 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪差异多糖APS-Ⅱ的结构解析 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料和仪器 |
| 5.2.1 仪器 |
| 5.2.2 试剂 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的制备 |
| 5.3.2 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的单糖组成的测定 |
| 5.3.3 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的甲基化分析 |
| 5.3.4 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的红外光谱分析 |
| 5.3.5 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的核磁共振波谱分析 |
| 5.3.6 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的扫描电子显微镜分析 |
| 5.3.7 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的圆二色谱分析 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的单糖组成的测定 |
| 5.4.2 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的甲基化分析 |
| 5.4.3 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的红外光谱分析 |
| 5.4.4 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的核磁共振波谱分析 |
| 5.4.5 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的扫描电子显微镜分析 |
| 5.4.6 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的圆二色谱分析 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪差异多糖APS-Ⅱ体外免疫活性比较 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料和仪器 |
| 6.2.1 植物材料 |
| 6.2.2 仪器 |
| 6.2.3 试剂 |
| 6.3 实验方法 |
| 6.3.1 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ的制备 |
| 6.3.2 细胞吞噬活性测定 |
| 6.3.3 T淋巴细胞增殖试验 |
| 6.3.4 B淋巴细胞增殖试验 |
| 6.3.5 NK细胞的细胞毒性测定 |
| 6.3.6 脾淋巴细胞分泌IgG的检测 |
| 6.4 实验结果 |
| 6.4.1 Raw264.7细胞吞噬活性测定 |
| 6.4.2 T淋巴细胞增殖试验 |
| 6.4.3 B淋巴细胞增殖试验 |
| 6.4.4 NK细胞的杀伤活性测定 |
| 6.4.5 脾淋巴细胞分泌IgG的检测 |
| 6.5 小结 |
| 第七章 基于ROC曲线确定山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪差异多糖APS-Ⅱ峰面积比例限度研究 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 材料和仪器 |
| 7.3 实验方法 |
| 7.3.1 黄芪多糖糖谱的测定方法 |
| 7.3.2 数据分析 |
| 7.4 实验结果 |
| 7.4.1 山西仿野生黄芪和甘肃移栽芪APS-Ⅱ峰面积比例分布 |
| 7.4.2 山西仿野生黄芪APS-Ⅱ峰面积比例的数据分析 |
| 7.4.3 甘肃移栽芪APS-Ⅱ峰面积比例的数据分析 |
| 7.4.4 ROC曲线确定山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪APS-Ⅱ峰面积比例临界值 |
| 7.5 小结 |
| 第八章 总结和展望 |
| 8.1 研究工作总结 |
| 8.1.1 山西仿野生黄芪多糖糖谱的建立 |
| 8.1.2 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪多糖糖谱差异多糖组分的筛选 |
| 8.1.3 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪差异多糖组分APS-Ⅱ的结构解析 |
| 8.1.4 山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪差异多糖组分APS-Ⅱ体外免疫活性比较 |
| 8.1.5 基于ROC曲线确定山西仿野生黄芪、甘肃移栽芪差异多糖APS-Ⅱ峰面积比例限度研究 |
| 8.2 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简况及联系方式 |
（9）党参多糖CPC的结构解析及其免疫活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 党参多糖CPC的分离纯化和结构鉴定 |
| 1 材料、仪器与试剂 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验仪器设备 |
| 1.3 实验试剂及耗材 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 党参总多糖的提取 |
| 2.2 党参多糖CPC的分离纯化 |
| 2.3 党参多糖CPC的结构表征 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 CPC均一性和分子量测定结果 |
| 3.2 CPC的紫外光谱分析 |
| 3.3 CPC的红外光谱分析 |
| 3.4 CPC单糖组成分析结果 |
| 3.5 CPC的甲基化分析结果 |
| 3.6 CPC的刚果红实验结果分析 |
| 3.7 CPC的 NMR分析 |
| 3.8 CPC的结构信息 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分 党参多糖CPC对巨噬细胞的免疫调节活性研究 |
| 1 实验材料与仪器 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 细胞培养 |
| 2.2 实验分组与给药 |
| 2.3 CCK-8 法检测RAW264.7 细胞的增殖活力 |
| 2.4 中性红法测定RAW264.7 细胞的吞噬能力 |
| 2.5 Griess法检测RAW264.7 细胞释放的NO含量 |
| 2.6 活性氧检测试剂盒检测RAW264.7 细胞ROS的生成 |
| 2.7 ELISA法检测RAW264.7 细胞分泌细胞因子的水平 |
| 2.8 RT-qPCR法检测i NOS、TNF-α、IL-6、IL-10及IL-1βmRNA表达 |
| 2.9 数据分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 党参多糖CPC对 RAW264.7 细胞活力的影响 |
| 3.2 党参多糖CPC对 RAW264.7 细胞吞噬能力的影响 |
| 3.3 党参多糖CPC对 RAW264.7 细胞NO分泌和i NOS表达的影响 |
| 3.4 党参多糖CPC对 RAW264.7 细胞ROS分泌的影响 |
| 3.5 党参多糖CPC对 RAW264.7 细胞分泌细胞因子的影响 |
| 3.6 党参多糖CPC对 TNF-α、IL-6、IL-1β和 IL-10 m RNA表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 植物多糖分离纯化与结构分析的研究进展 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）美洲大蠊糖蛋白对免疫低下小鼠的免疫调节活性及其机制初探（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 缩略词表 |
| 第一章 美洲大蠊糖蛋白的提取优化实验 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验药物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 美洲大蠊糖蛋白的提取 |
| 2.2 PAG提取的单因素实验 |
| 2.3 PAG提取的响应面优化实验 |
| 3 结果 |
| 3.1 PAG提取的单因素实验 |
| 3.2 PAG提取的响应面优化实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二章 美洲大蠊糖蛋白的分离纯化及体外免疫活性筛选 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 实验药品 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 PAG的分离纯化 |
| 2.2 体外免疫活性筛选 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 PAG的分离纯化 |
| 3.2 体外免疫活性筛选 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第三章 PAG和 PAGW的单糖组成及抗氧化活性研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验药物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 PAG、PAGW的单糖组成 |
| 2.2 PAG、PAGW的抗氧化活性测定 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 PAG、PAGW多糖的含量测定 |
| 3.2 PAG、PAGW蛋白的含量测定 |
| 3.3 PAG、PAGW的单糖组成 |
| 3.4 PAG、PAGW的抗氧化活性测定 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第四章 PAG及 PAGW对免疫低下小鼠免疫活性及其机制初探 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 造模 |
| 2.2 分组及给药 |
| 2.3 一般情况观察 |
| 2.4 肝脏、胸腺指数和脾脏指数的测定 |
| 2.5 脾组织病理学检测 |
| 2.6 小鼠全血四项指标测定 |
| 2.7 小鼠脾淋巴细胞增殖实验 |
| 2.8 小鼠脾T淋巴细胞及其亚群 |
| 2.9 小鼠血清中免疫球蛋白和细胞因子的含量测定 |
| 2.10 RT-qPCR检测小鼠脾细胞mRNA的表达 |
| 2.11 数据处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 一般情况观察 |
| 3.2 肝脏、胸腺指数和脾脏指数的测定 |
| 3.3 脾组织病理学观察 |
| 3.4 小鼠全血四项指标测定 |
| 3.5 小鼠脾淋巴细胞增殖实验 |
| 3.6 小鼠脾T淋巴细胞及其亚群 |
| 3.7 小鼠血清中免疫球蛋白的含量测定 |
| 3.8 小鼠血清中细胞因子的含量测定 |
| 3.9 RT-qPCR检测小鼠脾组织中NF-κB信号通路相关因子mRNA的表达 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 多糖的免疫调节作用及其机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
四、活性多糖增强免疫调节功能的研究进展（论文参考文献）
- [1]食品中免疫调节物质的研究进展[J]. 王芙蓉,左昕怡,谢中国,郭湘蕾. 食品研究与开发, 2022
- [2]松花粉多糖对鸡肠道黏膜免疫的影响及巨噬细胞的免疫调节作用[D]. 沙洲. 山东农业大学, 2021
- [3]黄芪活性多糖APS-Ⅱ免疫调控机制及其酶解寡糖片段的结构和活性研究[D]. 崔连杰. 山西大学, 2021(12)
- [4]HsPc-HA营养液的挤压制备及其功能性研究[D]. 杨滨梦. 沈阳师范大学, 2021(09)
- [5]黄芪活性多糖APS-Ⅱ三氟乙酸降解寡糖片段的免疫活性筛选与结构初探[D]. 石丽霞. 山西大学, 2021
- [6]壶瓶碎米荠多糖分离纯化、结构鉴定及生物活性研究[D]. 李美东. 湖北民族大学, 2021(12)
- [7]食源性干酪乳杆菌NA-2抑菌特性及其胞外多糖功效研究[D]. 徐小轻. 中国农业科学院, 2021(01)
- [8]基于多糖糖谱技术的山西仿野生黄芪、甘肃移栽黄芪比较[D]. 陈贤双. 山西大学, 2021
- [9]党参多糖CPC的结构解析及其免疫活性研究[D]. 王妍. 山西医科大学, 2021(01)
- [10]美洲大蠊糖蛋白对免疫低下小鼠的免疫调节活性及其机制初探[D]. 顾婷. 大理大学, 2021(09)