多聚半乳糖醛酸酶论文_崔佳,赵丰舟,刘震,曲建楠,刘铜

导读:本文包含了多聚半乳糖醛酸酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:醛酸,半乳糖,基因,霍尔,叶斑病,曲霉,细胞壁。

多聚半乳糖醛酸酶论文文献综述

崔佳,赵丰舟,刘震,曲建楠,刘铜[1](2019)在《玉米弯孢叶斑病菌多聚半乳糖醛酸酶Clpg1基因功能验证》一文中研究指出为明确玉米弯孢叶斑病菌的多聚半乳糖醛酸酶基因Clpg1在其致病过程中的作用,采用Double-joint PCR技术构建融合片段,利用PEG介导的原生质体转化技术获得18株抗潮霉素突变体,经检测得到1株Clpg1基因敲除突变体ΔClpg1。通过与野生型菌株比较,发现ΔClpg1产孢量和孢子萌发率下降、多聚半乳糖醛酸酶活性降低,致病力减弱。这些结果表明Clpg1基因影响多聚半乳糖醛酸酶活性,调控了玉米弯孢叶斑病菌的致病性。(本文来源于《植物保护》期刊2019年06期)

葛廷,黄雪,谢让金[2](2019)在《多聚半乳糖醛酸基因在果树中的研究进展》一文中研究指出多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase, PG)由多基因家族成员编码,对细胞壁果胶的降解起着重要作用,主要参与植物生长发育与逆境响应过程。基于全基因组序列,在果树如苹果(Malus pumila)、桃(Prunus persica)中,鉴定出了大量PG基因新成员,并发现其中某些成员分别参与了果实成熟软化、器官脱落、果树抗病等相关生物过程。尽管近年对果树PG的研究取得了巨大进展,但鲜见相关综述。据此,本文从PG基因结构、转录调控及其在果树中的生物功能等方面进行了综述,旨在为进一步阐明PG在果树中的生物学功能提供有用信息。(本文来源于《植物生理学报》期刊2019年08期)

陈皓睿[3](2019)在《四株六堡茶真菌的分离鉴定、发酵特性分析及聚半乳糖醛酸酶基因pgⅡ的研究》一文中研究指出六堡茶是广西有名的黑茶品种,其生产过程的关键步骤之一就是“渥堆”,此期间有大量微生物繁殖,在微生物的作用下产生特殊的香味及茶的各种物质。本研究目的在于探索六堡茶中的真菌微生物及基因资源,以期将其利用到烟制品和茶叶中。研究主要内容及结果如下:(1)菌株的筛选与鉴定:①从广西六堡茶中分离得到四株具有潜在利用价值的真菌。通过显微观察微观形态和分子鉴定结合的方法鉴定出这四株真菌所属的物种。分别命名为:Aspergillustubingensis GYC 501(简称GYC 501)、Aspillls chevalieri E 2(简称E2)、Aspergillus chevalieri E 3(简称E 3)和Aspergillus cristatusE 6(简称E 6)。②对这些真菌进行生理生化鉴定,发现这些真菌可以利用不同种类的多糖并各具特色。初步确定GYC 501具有产果胶酶、纤维素酶的能力;E2具有产淀粉酶、纤维素酶的能力;E 3具有产淀粉酶的能力;E 6尚未检测到能产生这几种大分子水解酶。(2)菌株的生理特性:①探索了叁株散囊菌属真菌在固体橘皮粉和固体烟粉培养基内的生长情况,发现叁株真菌在固体烟粉培养基中培养的适应性更好。E 2无法在橘皮粉培养基内生长,E 3在两种培养基中生长最快。②对叁株散囊菌属真菌在液体烟梗粉培养基和液体茶粉培养基内的生长情况进行了探索,发现其在以烟梗粉为营养物质的培养基内生长更良好。同样地,E 3在两种培养基中生长最快。③对液体发酵液进行了薄层层析分析,发现叁株真菌在烟梗粉培养基中几乎不产生可以被提取观察到的物质,而在茶粉培养基内都能产生叁种在紫外光下发粉红色光的物质。④对液体发酵液的果胶酶、纤维素酶和淀粉酶活性进行了考察,发现它们的水解酶活力都很低。总体来说E 6的叁种酶分泌能力最高、E 3次之、E 2最差。⑤对液体发酵液的还原糖和总糖含量、氨基酸含量、总抗氧化能力、DPPH·降解能力和茶多酚含量进行了测定,发现:对于液体烟梗粉培养基,相比于对照,发酵后的培养基内的总糖含量显着下降,降幅在16.29~39.98%;还原糖含量升高,增幅在2.86~3.89倍之间;氨基酸含量减少;总抗氧化能力改变不明显;DPPH·降解能力显着上升;茶多酚含量上升。对于液体茶粉培养基,相比于对照,发酵后的培养基内的总糖含量显着上升,增幅在2.07~35.25%还原糖含量升高,增幅在131.70~627.02%之间;氨基酸含量减少,降幅在0.52~32.68%;总抗氧化能力和DPPH·降解能力显着上升;茶多酚含量显着上升。(3)相关酶基因的克隆与表达:①从GYC 501中克隆到一个编码聚半乳糖醛酸酶的基因pgⅡ,epgⅡ长度为1038 bp;其成功在毕赤酵母GS115中进行了高效表达。rePGII蛋白总共由346个氨基酸残基组成,甲醇诱导7 d酶活力达到5672.85±204.39 U/mL。蛋白实际大小约为38 kDa,最适反应温度为50<℃,最适pH为5.0,其在锌离子浓度为10 mM时酶活性是对照的2.78倍。rePGII的热稳定性不是太好:若以30 min内剩余酶活力70%为稳定,rePGII在水溶液稀释时稳定温度为30℃,在含20%甘油的pH 5.0柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液稀释时稳定温度为40,在pH 5.0柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液稀释时稳定温度为20℃。以聚半乳糖醛酸为底物时Vmax值为1434士159.20 U/mg,Km值为4.319±0.86mg/mL。②从GYC 501中克隆到一个编码β-葡萄糖苷酶的基因bσN,rebgN长度为1761 bp,reBGN的氨基酸残基数为587个,并成功在毕赤酵母GS115中进行了表达。③从GYC 501中克隆到一个编码β-葡萄糖苷酶的基因bg2E,但其在毕赤酵母GS115中没有成功表达。④从GYC501中克隆到一个编码内切葡聚糖酶的基因egB,但其在毕赤酵母GS115中没有成功表达。⑤从GYC 501中克隆到一个编码果胶甲酯酶的基因pmeA,在毕赤酵母GS115中有少量表达,并具有聚半乳糖醛酸酶活性。(本文来源于《广西大学》期刊2019-05-01)

田长城,陈傲然,程柏[4](2018)在《内切聚半乳糖醛酸酶的分离和活性研究》一文中研究指出从果胶酶中分离出了一种内切聚半乳糖醛酸酶(f_(90-1)),经SDS-PAGE凝胶电泳测定其相对分子质量约为40. 5 kDa。该酶可以从分子内部断裂果胶大分子,形成相对分子质量大于1000 Da的果胶片段,催化活力达12. 5±0. 9 U;当反应温度和pH值分别为50℃和5. 0时,酶的水解活力较高;金属离子K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)和Zn~(2+)的存在可以提高酶的活性,而Cu~(2+)、Ba~(2+)和Fe~(3+)则有抑制作用。(本文来源于《蚌埠学院学报》期刊2018年05期)

陈飞飞,黄金思,王翕韫,刘婉慧,叶建仁[5](2018)在《吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007多聚半乳糖醛酸酶基因的克隆及表达分析》一文中研究指出【目的】克隆吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007(Burkholderia pyrrocinia JK-SH007)多聚半乳糖醛酸酶基因(BpPG),并阐明Bp PG基因在B.pyrrocinia JK-SH007定殖中的生物学功能。【方法】通过设计特异性引物(PG-F、PG-F)克隆Bp PG基因,并对其全长基因进行生物信息学分析;采用MEGA 5.0软件进行系统发育树分析;将B.pyrrocinia JK-SH007接种杨树,利用实时荧光定量PCR方法,分析Bp PG基因在B.pyrrocinia JK-SH007定殖过程中的差异表达。【结果】Bp PG基因全长2 001 bp,编码666个氨基酸,预测蛋白质分子量69.23 ku,理论等电点为8.37;Bp PG蛋白有6个蛋白质结合位点,属于Glycosyl hydrolases family 28家族,为亲水性蛋白,不具有信号肽。二级结构主要包括α-螺旋、β折叠、延伸链和无规则卷曲,叁级结构预测结果与二级结构相符。系统进化分析表明,Bp PG与PG(Gen Bank序列号WP 034181566.1)具有同源性。实时荧光定量PCR结果显示B.pyrrocinia JKSH007定殖过程中,不同时期的Bp PG基因表达量存在差异。【结论】克隆得到Bp PG基因,Bp PG基因在进化上是保守的,其极有可能在B.pyrrocinia JK-SH007定殖过程中发挥作用。(本文来源于《南京林业大学学报(自然科学版)》期刊2018年04期)

梁恩兴[6](2018)在《玉米多聚半乳糖醛酸酶抑制基因ZmPGIP3在抗水稻纹枯病中的功能研究》一文中研究指出植物暴露于不利环境中,会遭受各种形式的胁迫包括非生物胁迫如干旱,盐度和低温,以及由病原体和害虫攻击引起的生物胁迫。这些逆境胁迫会直接影响植物,尤其是农作物的产量和品质,导致减产甚至绝收。为了适应千变万化的环境,植物通过长期的进化,形成了一套复杂的防卫逆境胁迫系统。植物识别各种胁迫信号,并通过加工处理,激活相应的信号转导途径,最终诱导大量植物防卫相关基因的转录表达,从而保护植物免受胁迫的影响。植物多聚半乳糖醛酸抑制蛋白(PGIP)是一种能够特异性识别和结合真菌多聚半乳糖醛酸酶(PG)的结构蛋白,其富含亮氨酸重复(LRR)结构,在植物抗真菌病害中起重要作用。本研究比较实验室前期转录组筛选结果,利用PCR克隆得到了一个玉米PGIP蛋白基因,通过序列比对发现该基因具有LRR结构域,并且存在疏水性N端信号肽结构和保守的半胱氨酸残基对,初步认为是玉米PGIP家族基因。进化树分析表明该基因与其他物种PGIP亲缘关系较近,且与水稻OsPGIP1基因高度同源,确定其为玉米PGIP家族基因,命名为ZmPGIP3。亚细胞定位显示ZmPGIP3基因位于细胞膜或细胞壁中,荧光定量PCR显示ZmPGIP3基因在玉米根、茎、叶、雄蕊、雌蕊、种子中均有表达,并且在根中表达量最高。胁迫处理后发现ZmPGIP3受到胁迫损伤处理的极显着诱导,同时植物激素茉莉酸(JA)和水杨酸(SA)能显着诱导ZmPGIP3的表达,推测ZmPGIP3基因可能与抗病相关,并且很有可能通过JA或SA路径参与植物抗病调控。为进一步验证ZmPGIP3的基因功能,构建了 ZmPGIP3表达载体,通过农杆菌介导法将ZmPGIP3转入水稻之中,使其在水稻中过表达,通过PCR进行了阳性鉴定和纯系鉴定,共检测获得了 7个T3代纯系。荧光定量PCR表明ZmPGIP3在7个转基因株系中均有很高的表达量,表明ZmPGIP3已经整合到水稻基因组中,且能够转录。利用随机筛选出的纯系植株,我们对ZmPGIP3的抗病功能进行分析,在接种水稻纹枯病的初步研究中显示,转入ZmPGIP3基因的水稻具有较好的水稻纹枯病抗性。在接种纹枯病菌7天后,野生型对照植株受到了纹枯病害的胁迫,茎干上出现典型的水稻纹枯病菌斑,并且随着感染时间的增加,病斑开始扩散并且数量也增多;但转基因水稻的3个纯系植株在接种的第7天仅仅轻微遭受病菌影响,并没有出现病斑的情况,在第15天才出现明显病斑情况。因此初步认为ZmPGIP3能够增强水稻抗纹枯病能力。为分析转基因水稻的可能抗病机制,测定了转基因植株中胁迫相关基因的表达。荧光定量PCR结果显示,在转ZmPGIP3基因水稻中抗病防御基因PR3、PR8、PR10和OsPAL的表达被诱导,同时转基因水稻中JA合成基因AOC和AOS的表达也被诱导。上述结果表明ZmPGIP3可能通过JA路径来调控水稻抗纹枯病抗性,为今后进一步研究其功能机制做准备,也为分子育种提供了基因资源。(本文来源于《扬州大学》期刊2018-05-01)

关瑞攀,白智伟,王倩,唐笔锋,崔秀明[7](2018)在《叁七多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的功能分析》一文中研究指出多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是植物抗病防御系统的重要组成部分。在前期研究中,从叁七中分离得到一个编码PGIP蛋白的基因PnPGIP,PnPGIP在转录水平响应叁七根腐病菌茄腐镰刀菌的侵染。为深入分析PnPGIP的功能,构建PnPGIP的原核表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行大量表达,纯化获得PnPGIP的重组蛋白,并进行体外平板抑菌试验;构建PnPGIP的植物超表达载体,通过根癌农杆菌介导产生了PnPGIP转基因烟草,分析T2转基因烟草离体叶片对茄腐镰刀菌的抗性。PnPGIP原核重组蛋白对茄腐镰刀菌、胶孢炭疽菌、核盘菌和轮枝状镰刀菌的菌丝生长具有很强的抑制作用,并且随着蛋白量的增加,抑制活性也逐渐增强。q RT-PCR分析结果显示,PnPGIP在T2转基因烟草中大量表达。此外,与野生型烟草相比,转基因烟草对茄腐镰刀菌的抗性显着增强。PnPGIP是叁七中参与茄腐镰刀菌防御反应的重要抗病基因。(本文来源于《华北农学报》期刊2018年02期)

毕秀芳,陈丽伊,赵彩霞,车振明[8](2018)在《热与超声波对多聚半乳糖醛酸酶的钝化动力学》一文中研究指出以多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)为研究对象,探讨了在热与超声波作用下PG的钝化动力学。采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定酶活力。结果表明:单独的热(≤45℃)或超声波(频率20 kHz,温度0℃,功率密度242、605、968 W/cm~2)处理对PG钝化作用不明显,残留活力均在80%以上,并且处理15 min后,酶活力基本不变,动力学符合部分转化模型。但两者同时处理能使PG显着失活,钝化效果符合一级动力学模型。在20 kHz、35℃、605 W/cm~2条件下处理16 min可使酶活力降至13.72%。先进行热处理(35℃、5 min)再进行超声波处理(0℃、605 W/cm~2、0~10 min)或先进行超声波处理(0℃、605 W/cm~2、5 min)再进行热处理(35℃、0~10 min)均不能有效钝化PG,表明只有在两者同时作用的前提下,才能表现出协同效应,达到更好的钝酶效果。PG是影响果蔬汁品质的主要酶之一,本实验不仅为超声波钝化PG提供了理论数据,也为果蔬汁加工提供了研究参考。(本文来源于《食品科学》期刊2018年19期)

罗艳,涂涛,罗会颖,姚斌[9](2017)在《第28家族多聚半乳糖醛酸酶分子改良研究》一文中研究指出多聚半乳糖醛酸酶是研究最广泛的商业果胶酶之一。广泛用于食品,饲料,造纸,纺织,燃料和化学工业上。此外,果胶酶还可以用于生产果胶寡糖,在抗肥胖和抗氧化方面有一定的作用。在CAZy数据库中显示,有3000多个多聚半乳糖醛酸酶属于28家族糖基水解酶,其中,有几个真菌多聚半乳糖醛酸酶最适温度高于60℃为最适。为了更好的应用于工业生产,挖掘高比活和高催化效率的果胶酶和利用蛋白质工程,分子生物学对果胶酶进行改造具有重要的意义。本研究从真菌中克隆得到了一个28家族的多聚半乳糖醛酸酶TePG28b基因,经过酶活测定,TePG28b对聚半乳糖醛酸的比活性为25900±502U/mg。最适作用温度为70℃,最适作用pH为3.5,为了提高其催化效率,经过多序列比对和Discovery studio软件分析,在其拇指loop上找到叁个位点,成功构建了四个突变体,N85E,S86W△S88N85E/S86W.并己成功酵母表达。经过酶活测定发现突变体N85E催化效率比野生型TePG28b提高了0.3倍,△S88突变体催化效率比野生型TePG28b提高了0.17倍,如表1数据所示。(本文来源于《第十一届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2017-10-18)

李烨青,涂涛,王苑,马锐,姚斌[10](2017)在《Bispora sp.MEY-1来源的新型嗜热多聚半乳糖醛酸酶的酶学性质研究及其应用评估》一文中研究指出果胶酶作为添加剂广泛应用于食品行业的果汁澄清工艺中,发现和挖掘适用于工业应用的优质果胶酶,能够为工业应用提供更多的选择。从嗜酸的Bispora sp.MEY-1基因组中克隆得到一个多聚半乳糖醛酸酶基因Bspg28b,并在毕赤酵母GS115中实现高效异源表达。对重组蛋白纯化后进行酶学性质的测定,其最适pH 3.5,最适温度为65℃,在酸性至中性的环境中具有很好的pH稳定性,完全满足果汁澄清工艺的需求;BsPG28b在55℃下保持高度稳定,在65℃中保温10 min后仍能剩余50%的酶活,是真菌来源中少见的耐高温优质果胶酶。对BsPG28b的应用效果进行评估发现,可显着提高葡萄汁的澄清度,体现巨大的应用潜力。(本文来源于《中国农业科技导报》期刊2017年10期)

多聚半乳糖醛酸酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase, PG)由多基因家族成员编码,对细胞壁果胶的降解起着重要作用,主要参与植物生长发育与逆境响应过程。基于全基因组序列,在果树如苹果(Malus pumila)、桃(Prunus persica)中,鉴定出了大量PG基因新成员,并发现其中某些成员分别参与了果实成熟软化、器官脱落、果树抗病等相关生物过程。尽管近年对果树PG的研究取得了巨大进展,但鲜见相关综述。据此,本文从PG基因结构、转录调控及其在果树中的生物功能等方面进行了综述,旨在为进一步阐明PG在果树中的生物学功能提供有用信息。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

多聚半乳糖醛酸酶论文参考文献

[1].崔佳,赵丰舟,刘震,曲建楠,刘铜.玉米弯孢叶斑病菌多聚半乳糖醛酸酶Clpg1基因功能验证[J].植物保护.2019

[2].葛廷,黄雪,谢让金.多聚半乳糖醛酸基因在果树中的研究进展[J].植物生理学报.2019

[3].陈皓睿.四株六堡茶真菌的分离鉴定、发酵特性分析及聚半乳糖醛酸酶基因pgⅡ的研究[D].广西大学.2019

[4].田长城,陈傲然,程柏.内切聚半乳糖醛酸酶的分离和活性研究[J].蚌埠学院学报.2018

[5].陈飞飞,黄金思,王翕韫,刘婉慧,叶建仁.吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007多聚半乳糖醛酸酶基因的克隆及表达分析[J].南京林业大学学报(自然科学版).2018

[6].梁恩兴.玉米多聚半乳糖醛酸酶抑制基因ZmPGIP3在抗水稻纹枯病中的功能研究[D].扬州大学.2018

[7].关瑞攀,白智伟,王倩,唐笔锋,崔秀明.叁七多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的功能分析[J].华北农学报.2018

[8].毕秀芳,陈丽伊,赵彩霞,车振明.热与超声波对多聚半乳糖醛酸酶的钝化动力学[J].食品科学.2018

[9].罗艳,涂涛,罗会颖,姚斌.第28家族多聚半乳糖醛酸酶分子改良研究[C].第十一届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2017

[10].李烨青,涂涛,王苑,马锐,姚斌.Bisporasp.MEY-1来源的新型嗜热多聚半乳糖醛酸酶的酶学性质研究及其应用评估[J].中国农业科技导报.2017

论文知识图

多聚半乳糖醛酸酶PG3的叁级结...多聚半乳糖醛酸酶PG5的叁级结...多聚半乳糖醛酸酶PG2的叁级结构不同影响因子对多聚半乳糖醛酸酶...外源乙烯对不同成熟度网纹甜瓜果实中...贮藏期间甘薯多聚半乳糖醛酸酶的...

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