豆制品转基因检测中不同DNA提取方法的比较

豆制品转基因检测中不同DNA提取方法的比较

论文摘要

高品质的DNA是分子生物学研究的关键,大豆及豆制品中含有较多的蛋白质、酚类、糖类和脂类物质,从中提取高品质的DNA比较困难。拟采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,简称SDS)法、改良CTAB法、十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,简称CTAB)法、SDS-聚乙烯吡咯烷酮(简称SDS-PVP)法和TIANGEN试剂盒法对大豆MON 89788、小黄豆、豆腐及大豆油中的DNA进行提取,对试验过程中的蛋白酶K、RNA酶A的浓度进行优化,并对DNA浓度及纯度进行综合分析。结果表明,对于大豆MON 89788、小黄豆和豆腐,用SDS法提取的DNA的D260 nm/D280 nm值在1.8左右,DNA产量最高,用改良CTAB法提取的DNA的D260 nm/D280 nm值在1.8左右,用TIANGEN试剂盒法提取的DNA的D260 nm/D280 nm值在1.75左右,2种方法的DNA产量均比SDS法低,而用SDS-PVP法与CTAB法提取的DNA含有较多杂质。综合分析可知,大豆油的最佳DNA提取方法为改良CTAB法。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 DNA提取方法
  •   1.4 酶的优化
  •   1.5 DNA的浓度和纯度
  • 2 结果与分析
  •   2.1 蛋白酶K、RNA酶A的浓度优化
  •   2.2 5种方法提取不同样品DNA纯度、浓度的鉴定
  •   2.3 琼脂糖凝胶电泳检测
  • 3 总结与展望
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 孙梦梦,黄欢欢,沈晓芳,庞月红

    关键词: 大豆,豆制品,提取,琼脂糖凝胶电泳

    来源: 江苏农业科学 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 江南大学食品学院

    基金: 国家自然科学基金(编号:31501397),江苏省重大科技示范项目(编号:BE2016635)

    分类号: TS214

    DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.04.010

    页码: 47-50

    总页数: 4

    文件大小: 582K

    下载量: 499

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