基于凝胶过滤色谱的β2微球蛋白标准品单体定量检测方法

论文摘要

β2微球蛋白(B2M)标准品是研究透析相关淀粉样变和评估血液透析器透过效率的重要试剂。B2M易于聚集的特性导致其作为标准品的单体浓度降低,使得检测结果准确性下降。为了准确评价B2M标准品的质量,该研究建立了基于凝胶过滤色谱的B2M样品中非聚集单体的定量检测方法。使用TSKgel SuperSW2000 (30 cm×4.6 mm, 4μm)凝胶筛分色谱柱,流动相为0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS, pH 7.2～7.4),流速为0.5 mL/min,柱温为25℃。使用紫外检测器,检测波长为280 nm,外标法定量。在0.05～0.50 g/L的B2M单体质量浓度范围内线性良好,相关系数为0.994 8。定量限(信噪比为10)为0.08 g/L,添加水平为0.10～0.30 g/L时,回收率为85.0%～96.7%,相对标准偏差为1.7%～3.3%。使用该方法对实验室自制重组人B2M标准品进行了质量检测,结果显示,该方法处理简单,准确度高,稳定性好,且不受溶液中B2M二聚体的干扰,适用于B2M标准品的质量分析。

论文目录

• 1 实验部分
•   1.1 仪器、试剂与材料
•   1.2 单体B2M和二聚体B2M的制备
•   1.3 标准蛋白质溶液的配制
•   1.4 色谱条件
•   1.5 凝胶过滤液相色谱对B2M的定性分析
•   1.6 B2M单体定量检测方法的建立
•     1.6.1 B2M标准曲线的线性范围及定量限
•     1.6.2 检测方法的精密度及稳定性
•     1.6.3 凝胶过滤液相色谱法与免疫比浊试剂盒分析B2M样品的优势比较
• 2 结果与讨论
•   2.1 单体B2M和二聚体B2M的制备及检测
•   2.2 凝胶过滤液相色谱对B2M的定性分析结果
•   2.3 方法学考察
•     2.3.1 标准曲线的线性范围及定量限
•     2.3.2 精密度及稳定性
•     2.3.3 凝胶过滤液相色谱法与免疫比浊试剂盒分析B2M样品的优势比较
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 暴晓博,任军,王玉凤,贾凌云

关键词: 凝胶过滤色谱,微球蛋白,蛋白质定量检测

来源: 色谱 2019年05期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

专业: 化学,基础医学

单位: 大连理工大学生物工程学院

分类号: O657.7;R392-33

页码: 533-538

总页数: 6

文件大小: 1359K

下载量: 107