导读:本文包含了红豆杉悬浮细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:南方红豆杉,悬浮细胞,紫杉醇,优化
红豆杉悬浮细胞论文文献综述
徐志荣,王婷,娄佳兰,魏赛金[1]（2019）在《南方红豆杉细胞悬浮培养体系优化及动力学研究》一文中研究指出[目的]南方红豆杉细胞悬浮培养体系优化及动力学模型构建。[方法]以南方红豆杉1年生枝条诱导产生的愈伤组织为材料,在优化愈伤组织接种量、培养基初始pH、植物激素类型及配比的基础上,分析南方红豆杉悬浮细胞生长和紫杉醇积累的动力学关系及主要营养成分的变化。[结果]适合南方红豆杉悬浮培养的培养基为:B5+0.4 mg·L~(-1) 2,4-D+0.3 mg·L~(-1) NAA+1.2 mg·L~(-1) 6-KT+30 g·L~(-1)蔗糖,培养基最佳初始pH为5.8,最佳接种量为0.09 g·mL~(-1)。在1个培养周期内,培养液中的糖、磷元素,铵态氮、硝态氮在细胞培养的第18天基本被消耗完全或保持不变;动力学拟合表明,南方红豆杉细胞悬浮培养生长符合Logistic生长模型,最大比生长速率为0.143 65 d~(-1),底物消耗和紫杉醇合成可用Luedeking-Piret模型描述,悬浮细胞生长与紫杉醇积累属于部分生长偶联型。[结论]南方红豆杉细胞悬浮培养体系优化后,通过模型的回归拟合,获得了反映南方红豆杉细胞培养的动力学参数,试验所构建的发酵动力学模型在一定程度上揭示了南方红豆杉细胞产紫杉醇代谢过程的特征。(本文来源于《林业科学研究》期刊2019年01期）
徐志荣,魏赛金[2]（2018）在《果糖补料与真菌诱导对南方红豆杉细胞悬浮培养的协同效应》一文中研究指出采用5 L反应器悬浮培养南方红豆杉细胞,研究果糖补料和真菌诱导子协同作用对南方红豆杉细胞悬浮培养体系中生理状态变化的影响。结果表明:果糖补料和真菌诱导子协同作用,可以提高培养后期的细胞活力,减缓培养液pH值的下降,维持胞外蛋白含量的稳定,增加胞外总酚含量并提高多酚氧化酶(PPO)活性,提高紫杉醇含量。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2018年24期）
王淑杰,李晓卉,白贺,李瞳,李纯[3]（2018）在《东北红豆杉悬浮细胞诱导紫杉醇培养基优化研究》一文中研究指出东北红豆杉是长白山特有资源,是国家的一级保护植物,其枝叶中含有一种萜类化合物紫杉醇,可以治疗多种肿瘤疾病。用东北红豆杉生产紫杉醇的方法有4种:直接提取法、化学合成法、发酵法、细胞悬浮培养法。其中细胞培养法最为经济、合理、高效。在细胞悬浮诱导培养过程中发现植物细胞最优培养条件的获得是提高细胞生物量和促进次级代谢产物合成的关键,而培养基优化是非常重要的途径之一。以东北红豆杉嫩茎芽为试验材料,用B5培养基对东北红豆杉愈伤组织进行诱导。(1)通过单因素试验,得到B5培养基中使东北红豆杉的紫杉醇单位产量较高的维生素浓度为维生素B1浓度为20 mg·L~(-1),维生素B6浓度为3 mg·L~(-1),肌醇浓度为200 mg·L~(-1),烟酸浓度为2mg·L~(-1)。(2)以维生素B1浓度(X1)、维生素B6浓度(X2)、肌醇浓度(X3)和烟酸浓度(X4)为自变量,单位体积培养液紫杉醇产量(Y)为因变量进行响应曲面分析,得到二次多项式回归方程:Y=2.76+0.061X1+0.011X2+0.002667X3–0.0005833X4–0.042X1X3–0.015X1X4+0.019X2X3–0.026X2X4–0.019X3X4–0.11 X12–0.063X22–0.027X32–0.012X42。最优维生素浓度组合为:维生素B1浓度21.58 mg·L~(-1),维生素B6浓度3.09 mg·L~(-1),肌醇浓度201.29mg·L~(-1)和烟酸浓度1.77mg·L~(-1),此时单位体积培养液紫杉醇产量达到最大值(2.767mg·L~(-1)),是对照组的1.22倍,效果显着。(本文来源于《中国园艺学会2018年学术年会论文摘要集》期刊2018-10-17）
徐志荣[4]（2018）在《南方红豆杉细胞悬浮培养体系建立及培养条件优化》一文中研究指出本试验以南方红豆杉一年生枝条诱导愈伤组织,建立细胞悬浮培养体系;分析悬浮细胞生长、紫杉醇积累动力学关系及主要营养成分的变化;同时探讨了理化因子对悬浮细胞生长及紫杉醇含量的影响。主要研究结果如下:1.从消毒组合、植物生长调节剂浓度与配比等因素,设计了外植体消毒方案及愈伤组织诱导方法;通过单因素和正交试验,筛选和优化南方红豆杉细胞悬浮培养的培养基种类、细胞接种量、培养基初始pH、植物生长调节剂种类及配比等,建立南方红豆杉细胞悬浮培养体系。结果表明,最适的消毒方式为75%酒精浸泡0.5 min后,再用0.1%氯化汞浸泡8 min;愈伤组织诱导固体培养基以MS+1.3 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L NAA+1.3 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖为最佳。适合南方红豆杉细胞悬浮培养的最佳培养基配方为:B5+0.4 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L NAA+1.2 mg/L 6-KT+30 g/L蔗糖,细胞最佳接种量为0.09 g/mL,初始pH为5.8;在27 d的培养周期内,悬浮培养的南方红豆杉细胞的生长曲线呈“S”型,第15 d时细胞鲜重达到最大值,为7.66 g/(30 mL)。2.采用超声波提取法从南方红豆杉愈伤组织中提取紫杉醇,通过单因素和正交实验考察了溶剂、级数、温度、时间、料液比对南方红豆杉细胞愈伤组织中紫杉醇提取的影响。结果表明,南方红豆杉愈伤组织中紫杉醇的最佳提取条件是:溶剂为甲醇,提取3次,温度55℃、每次提取30 min、料液比1:40。3.研究了南方红豆杉悬浮培养过程中细胞生长和紫杉醇积累的动力学关系及主要营养成分的变化,建立动力学模型。结果表明,在27 d的培养周期内,培养液中的总糖、磷元素、铵态氮、硝态氮在细胞培养的第18 d基本被消耗完;动力学拟合表明,南方红豆杉悬浮培养细胞生长符合Logistic生长模型,最大比生长速率为0.14365 d~(-1),底物消耗和紫杉醇合成可用Luedeking-Piret模型描述,悬浮细胞生长与紫杉醇积累属于部分生长偶联型。4.研究了碳源、氮源、磷源、Ca~(2+)和Mg~(2+)浓度对南方红豆杉悬浮培养细胞生长及紫杉醇合成的影响。结果表明,蔗糖浓度为30 g/L时,细胞生长较好,其浓度为40 g/L时,有利于紫杉醇的合成;铵态氮与硝态氮比例为3:24时,有利于细胞生长和紫杉醇合成;总氮浓度较高时有利于细胞生长,而低溶度氮有利于紫杉醇合成;磷源浓度为1 mmol/L时有利于细胞生长,磷源浓度为0.25 mmol/L时有利于紫杉醇的合成;CaCl_2浓度为2 mmol/L有利于细胞生长和紫杉醇合成;MgSO_4浓度为3 mmol/L时最有利于细胞生长,MgSO_4浓度为2 mmol/L时有利于紫杉醇合成。(本文来源于《江西农业大学》期刊2018-06-01）
王胡军[5]（2017）在《东北红豆杉悬浮细胞放大培养研究》一文中研究指出紫杉醇(Paclitaxel,商品名Taxol)是一种有效的抗癌新药。目前,从红豆杉树皮等组织中直接提取以及化学合成是获取紫杉醇的主要方法,但这些方法存在资源短缺、紫杉醇产量低等缺点。大规模培养红豆杉组织和细胞生产紫杉醇被认为是最有希望解决这一问题的途径。本文主要对东北红豆杉悬浮细胞放大培养进行相关研究,将为实现东北红豆杉悬浮细胞规模化生产紫杉醇奠定基础。本研究以东北红豆杉幼茎为材料,诱导愈伤组织,经继代后建立细胞悬浮培养体系,并探究B5培养基中维生素含量对悬浮细胞生产紫杉醇的影响;为了解决东北红豆杉悬浮细胞在放大培养过程中的变异问题,研究玻璃化超低温保存东北红豆杉悬浮细胞的方法;对东北红豆杉悬浮细胞逐步放大培养过程中的特征参数以及气升式生物反应器中东北红豆杉悬浮细胞培养液的流变特性进行研究;对2L气升式生物反应器内部两相流动进行CFD数值模拟,并探究通气量对气含率和循环液速的影响。本文研究结论如下:1.以东北红豆杉幼茎为原料,进行愈伤组织诱导和继代,最终建立了稳定的悬浮细胞系。通过对B5培养基中维生素含量的优化,得出适用于东北红豆杉悬浮细胞生产紫杉醇的最优维生素浓度组合为:维生素B1浓度21.58mg/L,维生素B6浓度3.09mg/L,肌醇浓度201.29mg/L和烟酸浓度1.77mg/L,此时单位体积培养液紫杉醇产量为2.767mg/L。2.玻璃化超低温保存东北红豆杉悬浮细胞的研究表明,最优的保存方案为:悬浮培养12d的东北红豆杉悬浮细胞在含有0.7mol/L蔗糖和5%DMSO(w/v)的B5培养基中预培养1.69d后,室温下60%PVS4预处理32.25min,0℃条件下100%PVS4脱水处理41.55min,替换预冷到0℃的新鲜PVS4后立即投入液氮保存,解冻时37℃水浴60s内迅速化冻,再用含1.2mol/L蔗糖的B5培养基洗涤30min,若液氮冷冻时间为48h,细胞存活率为76.62%。3.东北红豆杉悬浮细胞在250m L、500m L摇瓶和2L气升式生物反应器中细胞生长和紫杉醇合成情况相似,但摇瓶中的生物量和紫杉醇产量分别高于反应器15%-25%和20%。叁种培养规模中,p H值变化规律以及电导率的变化规律相似,可以通过p H值和电导率对细胞的生长进行在线监测。气升式生物反应器比较适合东北红豆杉悬浮细胞的培养,所需最适通气量为0.2vvm。另外,研究发现东北红豆杉悬浮细胞培养液呈假塑性流体性质,建立了各生长时期流变本构方程,为反应器的控制提供了理论基础。4.利用FLUENT软件对不同通气量下2L气升式生物反应器进行了仿真,对气含率和循环液速分布状态进行了可视化输出,随着通气量增加,气含率和循环液速也增加。通过仿真分析很直观地了解到通气量对于各时期细胞培养液气含率和循环流动的影响,据此对反应器进行操作控制,从而调控细胞的生长。(本文来源于《吉林大学》期刊2017-06-01）
王沐兰,杨生超,郁步竹,李唯奇[6]（2016）在《红豆杉高产悬浮细胞系建立及其紫杉醇诱导的研究进展》一文中研究指出紫杉醇是一种四环二萜酰胺类化合物,是从红豆杉科红豆杉属植物中提取分离出来的次生代谢物,是世界公认广谱、活性强的天然抗癌新药。但直接从植物中提取紫杉醇的传统生产方式,不仅产量低,且会对野生红豆杉资源造成严重破坏,同时紫杉醇的化学全合成也由于其结构复杂而不具备商业价值。与之相反,细胞培养技术具有受外界影响少、生产成本低、次生代谢产物多、细胞生长周期短的优势,是目前最具前景的紫杉醇生产方式。近年来随着科研水平的不断提升,紫杉醇无论在生理代谢调控、关键基因挖掘,还是新药物制剂与剂型及其类似物的开发和运用等方面,都取得了进展,但要建立紫杉醇商业化高产体系,还必须和前人的研究经验相结合。该文对红豆杉高产悬浮细胞系建立及其紫杉醇诱导的研究进展进行了综述,主要包括前人对红豆杉属植物组织与细胞培养相关的外植体、培养基、激素、培养条件、褐化等问题的研究,以及从代谢调节、培养方式、基因工程等多方面提高紫杉醇含量的最新进展,最后总结了当前研究的不足,并对今后通过多种组合方式来提高紫杉醇含量的生产途径进行了展望。以期促进红豆杉组织培养技术的进步,为药用资源保护和利用提供一定的理论基础与生产指导。(本文来源于《广西植物》期刊2016年09期）
白向阳[7]（2015）在《南方红豆杉悬浮细胞培养生产紫杉醇及其细胞培养物的化学成分研究》一文中研究指出南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)又称美丽红豆杉,是特产于我国的一个变种红豆杉,广泛分布在我国大部分地区。南方红豆杉的树皮、叶、根、枝等部位均含有紫杉醇。为了保护、合理利用已有的南方红豆杉资源,自上个世纪90年代开始,我国就对南方红豆杉开展了人工栽培、植物组织培养等研究。植物细胞培养因其繁殖速度快,培养条件易于优化,可以人工控制培养过程,实验过程不受时间、气候等因素的影响,同时提取纯化过程相对简单等优点,受到了人们越来越多的关注。本论文对南方红豆杉的嫩茎进行愈伤组织的诱导,成功获得一株高产紫杉醇细胞株,并对其进行扩大培养。为了提高紫杉醇的含量,我们在愈伤组织诱导试验中对外植体进行了选择,对诱导过程中的条件进行了优化,最终选定的条件为:B5基本培养基,添加1mg/L 2,4-D、0.1 mg/L 6-BA、100 mg/L Vc、0.2928 g/L谷氨酰胺与15 g/L蔗糖,p H调至5.8,黑暗下培养。在此条件下,紫杉醇的含量最高达到了100 mg/L(鲜重);除主要目标产物紫杉醇,我们还对细胞培养物进行了系统的化学成分研究,并运用各种色谱手段从中分离得到了15个化合物,利用MS,UV,IR,NMR,单晶X-衍射等方法鉴定了其中13个化合物的结构,包括1个新化合物,4个首次从南方红豆杉细胞培养物中得到的化合物。在此基础上,我们对该细胞培养物进行LC-MS色谱峰的指认,同时还对获得的部分化合物进行了体外抗肿瘤活性的初步研究。(本文来源于《暨南大学》期刊2015-05-01）
张渭[8]（2015）在《红豆杉细胞悬浮培养及发酵过程工艺设备的开发利用》一文中研究指出利用红豆杉细胞生产紫杉醇是一个非常有前景的技术,由于培养过程中细胞生长缓慢,对环境因子的敏感性以及生产不稳定性等原因导致此项技术的大规模推广遇到较大的困难。本研究针对红豆杉细胞生长的缓慢性与生产的不稳定性进行优化控制研究。从红豆杉细胞的愈伤组织培养到在不同的反应器中建立悬浮培养体系,分别考察了 pH值,装液量,剪切力,氨基酸,接种量和糖浓度等条件对细胞生长的影响。发现控制接种量在4～5g/L,提高流场混合性能是重要的促进细胞生长的因素,而其他因素对生长没有促进甚至有抑制作用。以实际生物量为标准优化添加诱导子的浓度,包括银离子,茉莉酮酸甲酯和环糊精,发现将诱导子浓度分别控制在8μmol/g的Ag+,6μmol/g的MeJA以及10μmol/g的环糊精能有效控制并提高细胞生产效率。通过反馈控制策略考察电导率水平对细胞培养过程的作用,发现将电导率控制在2.6mS/cm时既有助于细胞的快速生长,也会有效的提高紫杉醇的产量。红豆杉细胞冷冻保藏方法考察结果表明:将愈伤组织在4℃,无磷培养基中保藏能够很好地保证细胞的生长状态,保持高产细胞系的长期稳定性。通过本文的研究,优化了植物细胞悬浮培养体系的培养条件,建立了反应器中反馈控制的优化工艺,为红豆杉细胞生产紫杉醇的放大生产提供了理论基础,为红豆杉高产细胞系的保藏也进行了有益的尝试。(本文来源于《华东理工大学》期刊2015-04-15）
王飞艳[9]（2014）在《曼地亚红豆杉细胞悬浮体系建立及真菌诱导子对细胞产紫杉醇的影响》一文中研究指出利用曼地亚红豆杉(Taxus media)细胞大规模培养是生产紫杉醇的有效途径之一,添加诱导子能有效促进次生代谢产物合成。目前利用曼地亚红豆杉细胞培养生产紫杉醇仍未实现工业化,其主要原因之一是此法生产紫杉醇的成本较高,成为工业化生产的瓶颈。本研究以陕西关中地区10年生曼地亚红豆杉的茎、叶为材料诱导愈伤组织,筛选适宜外植体和培养基,并研究了 Vc等不同因子对褐化的影响,建立稳定的细胞悬浮培养系。同时研究了内生真菌诱导子对曼地亚红豆杉悬浮细胞产紫杉醇的影响,为紫杉生产醇提供了理论依据。本研究取得的主要结果如下:1、B5和MS培养基均可诱导出曼地亚红豆杉愈伤组织。其中,离体当年生新茎(Φ≈2 mm)和隔年茎(Φ≈2 mm)以B5为基本培养基诱导率较高;离体叶片以MS为基本培养基诱导率较高。两种培养基诱导外植体出愈时间差异不显着。不同外植体对愈伤组织诱导率差异显着,以B5为基本培养基,隔年茎(Φ≈2 mm)、当年生新茎(Φ≈2 mm)、当年生新茎(Φ≈1 mm)、隔年叶、当年生新叶愈伤组织诱导率分别为61.5%、86.7%、23.0%、15.0%及10.0%。消毒方式对不同外植体愈伤组织诱导中染菌率有明显影响。其中对于春夏季当年生新茎(Φ≈2 mm)以75%酒精消毒30 s,0.1%升汞14 min消毒效果较好;秋冬季新茎(Φ≈2 mm)为75%酒精消毒1 min,0.1%升汞消毒20 min效果较好。2、Vc、LH、PVP叁种防褐化剂对红豆杉愈伤组织生长具有促进作用,其最适添加量依次为5 mg·L-1、1.0g·L-1、1.00mg·L-1。3、曼地亚红豆杉细胞悬浮培养体系接种量约为7.5 g·-1,整个悬浮培养过程,细胞的生长周期为30d,其中0～9d为调整期,9～18d为对数期,18～30d为稳定期,30d后为衰退期。在细胞培养的0～12 d,紫杉醇的产量基本为0,12 d以后,细胞逐渐开始生产紫杉醇,细胞培养的24 d,紫杉醇生产速率达到最大值,其积累量为17.04 mg·L-1。到细胞培养的30 d,紫杉醇积累量达到最大,为18.84 mg·L-1。显微观察到曼地亚红豆杉细胞多数呈圆形或椭圆形。4、以真菌培养液为诱导子,试验最佳处理条件为在细胞悬浮培养的14 d,加入发酵7d的真菌培养液,添加量为9%,此时悬浮细胞紫杉醇产量最高,达到45.32mg.L-1,是对照的的2.31倍。以真菌菌丝提取物为诱导子,结果表明在细胞悬浮培养的16 d,加入发酵6 d的真菌菌丝提取物,添加量为9%(v/v)时,悬浮细胞紫杉醇产量最高,为47.64 mg·L-1,是对照的2.74倍。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2014-05-01）
赵继鹏,杨淑慎[10]（2014）在《曼地亚红豆杉细胞悬浮培养体系的建立》一文中研究指出【目的】建立曼地亚红豆杉的愈伤组织细胞悬浮培养体系,为紫杉醇生产提供参考。【方法】以曼地亚红豆杉幼茎诱导的愈伤组织为材料,以B5培养基为基本培养基,利用单因素试验或正交试验,研究愈伤组织接种量、蔗糖质量浓度、激素类型及配比和防褐化试剂对曼地亚红豆杉细胞生长的影响。【结果】曼地亚红豆杉细胞悬浮培养的最佳培养基和培养条件为:B5+2,4-D 0.6mg/L+NAA 0.8mg/L+KT 1.0mg/L+柠檬酸220mg/L+PVP350mg/L+水解乳蛋白450mg/L+蔗糖30g/L(pH=5.8),接种量0.1g/mL,在培养箱中110r/min、25℃暗培养。【结论】曼地亚红豆杉愈伤组织细胞在所建立的培养体系中经过多次继代后,生长状况良好,表明该细胞悬浮体系比较稳定,可以用于大规模培养红豆杉细胞。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2014年01期）
红豆杉悬浮细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
采用5 L反应器悬浮培养南方红豆杉细胞,研究果糖补料和真菌诱导子协同作用对南方红豆杉细胞悬浮培养体系中生理状态变化的影响。结果表明:果糖补料和真菌诱导子协同作用,可以提高培养后期的细胞活力,减缓培养液pH值的下降,维持胞外蛋白含量的稳定,增加胞外总酚含量并提高多酚氧化酶(PPO)活性,提高紫杉醇含量。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
红豆杉悬浮细胞论文参考文献
[1].徐志荣,王婷,娄佳兰,魏赛金.南方红豆杉细胞悬浮培养体系优化及动力学研究[J].林业科学研究.2019
[2].徐志荣,魏赛金.果糖补料与真菌诱导对南方红豆杉细胞悬浮培养的协同效应[J].江苏农业科学.2018
[3].王淑杰,李晓卉,白贺,李瞳,李纯.东北红豆杉悬浮细胞诱导紫杉醇培养基优化研究[C].中国园艺学会2018年学术年会论文摘要集.2018
[4].徐志荣.南方红豆杉细胞悬浮培养体系建立及培养条件优化[D].江西农业大学.2018
[5].王胡军.东北红豆杉悬浮细胞放大培养研究[D].吉林大学.2017
[6].王沐兰,杨生超,郁步竹,李唯奇.红豆杉高产悬浮细胞系建立及其紫杉醇诱导的研究进展[J].广西植物.2016
[7].白向阳.南方红豆杉悬浮细胞培养生产紫杉醇及其细胞培养物的化学成分研究[D].暨南大学.2015
[8].张渭.红豆杉细胞悬浮培养及发酵过程工艺设备的开发利用[D].华东理工大学.2015
[9].王飞艳.曼地亚红豆杉细胞悬浮体系建立及真菌诱导子对细胞产紫杉醇的影响[D].西北农林科技大学.2014
[10].赵继鹏,杨淑慎.曼地亚红豆杉细胞悬浮培养体系的建立[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2014