脂肪干细胞来源外泌体促进大鼠皮瓣移植后血管新生的研究

脂肪干细胞来源外泌体促进大鼠皮瓣移植后血管新生的研究

论文摘要

目的探讨脂肪干细胞来源外泌体(adipose-derived stem cell derived exosomes,ADSC-Exos)对大鼠皮瓣移植后血管新生的影响。方法取抽脂术患者自愿捐赠脂肪组织,采用酶消化法分离培养ADSCs;取第3代细胞光镜观察形态,流式细胞术鉴定细胞表面标志物,成脂诱导培养14 d后油红O染色观察。细胞鉴定为ADSCs后,采用密度梯度离心法提取ADSC-Exos;透射电镜观察形态,Western blot检测膜表面标志蛋白(CD63、TSG101),纳米颗粒跟踪分析仪测量其粒径分布。取20只雄性SD大鼠,体质量250~300 g,随机分为ADSCExos组和PBS组,每组10只。两组大鼠背部沿长轴方向制作面积为9 cm×3 cm随意皮瓣后,分别于近端、中间和远端区域注射ADSC-Exos(ADSC-Exos组)或PBS(PBS组)。术后大体观察皮瓣成活情况,第7天测算皮瓣成活率后切取皮瓣组织,HE染色观察组织形态,CD31免疫组织化学染色测定皮瓣微血管密度(mean blood vessel density,MVD)。结果光镜、流式细胞术及成脂诱导培养鉴定培养细胞为ADSCs。ADSC-Exos为边缘清晰、大小形态均匀的圆形或椭圆形膜性囊泡,高表达标志蛋白CD63和TSG101,粒径分布在30~200 nm,符合外泌体粒径范围。术后两组皮瓣远端均出现不同程度坏死表现,但ADSC-Exos组程度较PBS组轻;第7天ADSC-Exos组皮瓣成活率为64.2%±11.5%,显著大于PBS组的31.0%±6.6%(t=7.945,P=0.000);中间区域皮肤附属器官更完整,近端区域组织水肿程度轻、血管扩张更多。ADSC-Exos组MVD为(103.3±27.0)个/视野,显著多于PBS组(45.3±16.2)个/视野(t=3.190,P=0.011)。结论 ADSC-Exos可通过促进皮瓣移植后新生血管的形成,改善皮瓣血供,进而提高大鼠皮瓣成活率。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 胡玄,易阳艳,朱元正,王朝慧,吴舒,张静,王江文,聂佳莹

关键词: 脂肪干细胞,外泌体,皮瓣移植,血管新生,大鼠

来源: 中国修复重建外科杂志 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 外科学

单位: 南昌大学第二附属医院整形美容科

基金: 国家自然科学基金资助项目(81660326),江西省自然科学基金资助项目(20171ACB20037),南昌大学研究生创新基金资助项目(CX2018206)~~

分类号: R622

页码: 1560-1565

总页数: 6

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