导读:本文包含了纤突蛋白基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:血清8型禽腺病毒,纤突蛋白,克隆表达,多克隆抗体
纤突蛋白基因论文文献综述
路浩,张伟,王伟康,梁广成,王萍[1]（2018）在《血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因的克隆表达及多克隆抗体的制备》一文中研究指出研究首先对血清8型禽腺病毒(FAd V-8)的纤突蛋白基因F进行了克隆并分别构建了原核表达载体和真核表达载体,经测序验证后分别命名为p GEX-6P-1-F和pc DNA3.1-F。将原核表达质粒pGEX-6P-1-F转化BL21,经IPTG诱导,获得了FAd V-8 F蛋白的GST-F可溶性融合表达产物。将纯化的GST-F蛋白免疫BALB/c小鼠制备了抗FAd V-8 F蛋白的多克隆抗体。Western blot结果证明,制备的抗FAd V-8 F蛋白的多克隆抗体能特异性地识别转染pc DNA3.1-F或感染FAd V-8病毒细胞中57 ku大小的蛋白条带。间接免疫荧光试验同样证明,抗FAd V-8的F蛋白的多克隆抗体具有良好的反应性及特异性。研究结果为进一步建立FAd V-8快速血清学诊断方法、亚单位疫苗研制及探究纤突蛋白F在病毒感染致病中作用奠定了基础。(本文来源于《中国家禽》期刊2018年04期）
曾作财,许承扬,张晓东,王金洛,杨兵[2]（2012）在《猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白在转基因玉米中的表达》一文中研究指出本研究拟构建携带猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白基因(TGEV-S)的转基因玉米植株并检测其表达情况。首先利用PCR方法自携带TGEV-S基因的重组质粒中扩增2.2kb的S基因片段,然后插入植物表达载体pBAC176中,该表达载体以编码除草剂草甘膦抗性的EPSP基因作为选择标记,目的基因以双增强子的CaMV35S(E35S)及其玉米Hsp70第一内含子为驱动。以授粉后10～12d约0.5～1mm大小的玉米幼胚为受体,用基因枪进行转化,经过愈伤组织诱导、草甘膦抗性筛选和分化再生培养,先后获得74株转化再生植株。利用PCR和Southern blot检测表明,T0代转基因苗有9株检测结果为阳性。T1代转基因玉米株系经PCR检测有14个转基因株系为阳性,初步确定了目的基因在这些转基因玉米中的稳定整合。进而通过间接ELISA分析初步确定目的基因在7个T1代转基因玉米株系获得了表达。研究结果为进一步研究表达TGEV-S转基因玉米的生物学活性奠定了基础。(本文来源于《分子植物育种》期刊2012年05期）
郑逢梅,赵军,常洪涛,陈陆,王新卫[3]（2012）在《猪流行性腹泻病毒纤突蛋白基因克隆与序列分析》一文中研究指出S蛋白被认为对PEDV的生物学特性有重要影响。在本研究中,对5株PEDV河南株的S全基因序列进行分析。由于S基因S1区域的N'端有15个核苷酸的插入和6个核苷酸的缺失,因此,5株PEDV河南株的S全基因均比参考株(CV777)多出9个核苷酸。另外,在S1区的N'端存在大量的氨基酸突变,这些突变导致了当前的流行毒株具有超强的变异能力。5株PEDV河南株的氨基酸同源性为97.9-98.9%;与参考株的同源性为92.3-99.4%。遗传进化分析显示,PEDV可以分为3个群,5株河南株均属于第3群,尤其与近年来韩国分离株亲缘关系密切,而与2007年以前中国毒株、日本株(83P-5、MK)以及欧洲株(CV777、Br1/87)亲缘关系较远。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会论文集》期刊2012-08-01）
许承扬,满坤,张晓东,杨兵,王金洛[4]（2012）在《转基因玉米表达的猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白免疫原性鉴定》一文中研究指出为鉴定猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白(TGEV-S)在转基因玉米中的表达及对试验小鼠的免疫原性,本试验在前期TGEV-S转基因玉米植株构建成功的基础上,自玉米叶片中抽提可溶性蛋白作为包被抗原,建立筛选表达TGEV-S转基因玉米的间接ELISA检测方法。结果显示在92份被检测植株中8株为阳性,取阳性值较高的2株152-3和156-6,提取叶片可溶性蛋白,与弗氏佐剂乳化后皮下注射免疫小鼠,只有植株156-6中可溶性蛋白免疫小鼠可产生针对TGEV的抗体,而152-3免疫组检测结果为阴性。利用156-6植株叶片对小鼠进行灌胃免疫,也可产生针对TGEV的特异性抗体。以上结果表明,获得的TGEV-S转基因玉米植株不但可表达TGEV-S蛋白,而且该蛋白通过注射或口服途径免疫小鼠后均可产生针对TGEV-S的特异性抗体,提示TGEV-S转基因玉米具有发展成为TGEV口服疫苗的潜力。(本文来源于《北京农学院学报》期刊2012年02期）
王龙涛[5]（2010）在《猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白基因体外克隆表达及鉴定》一文中研究指出猪传染性胃肠炎(Porcine transmissible gastroenteritis,TGE),是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的一种急性、高度接触性肠道传染病。临床特征主要表现为呕吐、脱水和腹泻。不同品种和不同年龄的猪对该病均易感,2周龄以内的仔猪具有高度感染性,致死率可达到100%。目前该病广泛存在于世界各养猪国家,我国作为世界养猪大国也不断有该病发生和流行的报道,该病常常由于混合感染和细菌继发感染,难以确诊,缺乏有效疫苗,给养猪业带来严重危害。本研究首先对长春市郊养猪户饲养猪群中一起疑似猪传染性胃肠炎病例进行分析,利用PK-15细胞从临床上表现为腹泻症状的病死仔猪肠系膜淋巴结材料中分离获得1株病毒,对该病毒进行病毒形态学、PCR检测与动物回归试验等系统鉴定后,证实该分离株为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),被命名为TGEV JL。对TGEV JL分离株的分离鉴定为进行针对猪传染性胃肠炎病毒的体外克隆表达及转植物疫苗研制提供基本条件。已有报道,TGEV具有4种结构蛋白,分别为:纤突糖蛋白(S蛋白)、膜内在蛋白(M蛋白)、小膜蛋白(sM蛋白)和核衣壳蛋白(N蛋白)。而其中编码S蛋白的S基因全长约为4300bp,决定宿主的亲嗜性、血凝性和致病性,同时也是诱导机体产生中和抗体的最主要结构蛋白。本研究在获得TGEV JL株的基础上,应用RT-PCR技术扩增获得该病毒株的主要免疫原性基因TGEV S基因全序列,将其连接到pMD18-T载体,进行测序及序列分析,将该基因序列和推导的氨基酸序列与8个不同来源的TGEV毒株进行同源性比较分析,表明该分离株的TGEV S基因高度保守,可作为转植物疫苗研制的目的基因。然后将该基因插入植物表达载体pBI121的CaMV35S启动子下游,成功构建了高效植物表达载体pBI121-S。玉米是我国主要的粮食及饲料作物之一。饲料消费是玉米最重要的消费渠道,约占消费总量的70%左右。玉米作为饲料消费在我国有两种情况。一是加工生产成配合饲料。二是传统的把玉米直接用于饲料的消费。本研究在获得pBI121-S的基础上,以玉米自交系“丹598”、“H99”和“丹988”的胚性愈伤组织为材料,通过愈伤组织对卡那霉素的敏感性试验,确定了卡那霉素40-56mg/L为愈伤组织适宜选择压。利用基因枪法将猪传染性胃肠炎病毒TGEV JL株S基因的植物表达载体pBI121-S导入玉米自交系中,并对基因枪法转化的条件进行了研究,对转化的愈伤组织进行分化诱导出苗后进行PCR和RT-PCR检测。PCR结果表明,外源目的基因已转入到玉米基因组中;通过RT-PCR试验证明,目的基因能在转基因玉米植株中获得转录。同时将pBI121-S转入根癌农杆菌EHA101中,成功获得含有重组植物表达载体pBI121-S的农杆菌工程菌。利用农杆菌介导法将TGEV S基因导入玉米自交系中,并对农杆菌转化系统的条件进行了研究。结果表明,根癌农杆菌EHA101的菌液OD600nm值为0.5-0.6时,侵染20min为农杆菌转化的最适条件。对转化的愈伤组织进行分化诱导出苗后进行PCR、Southern blot和Northern杂交检测,证明外源目的基因S已转入到玉米基因组中。以上研究结果为进一步研究猪传染性胃肠炎病毒的转基因植物疫苗及其在兽医临床的应用提供了依据。(本文来源于《吉林大学》期刊2010-12-01）
王龙涛,高雯雯,付永平,龙飞,王丕武[6]（2010）在《基因枪法转移猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白基因玉米植株》一文中研究指出以玉米自交系"丹598"、"H99"和"丹988"的胚性愈伤组织为材料,利用基因枪法将猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因的植物表达载体pBI121-S导入玉米自交系中,并对基因枪法转化的条件进行了研究,对转化的愈伤组织进行分化诱导出苗后进行PCR和RT-PCR检测。PCR结果表明,外源目的基因已转入到玉米基因组中;RT-PCR试验证明,目的基因能在转基因玉米植株中获得转录。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2010年09期）
胡桂学,王龙涛,高雯雯,付永平,王丕武[7]（2010）在《猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白基因基因枪法转基因玉米》一文中研究指出以玉米自交系"丹598"、"H99"和"丹988"的胚性愈伤组织为材料,利用基因枪法将猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因的植物表达载体pBI121-S导入玉米自交系中,并对基因枪法转化的条件进行了研究,对转化的愈伤组织进行分化诱导出苗后进行PCR和RT-PCR检测.PCR结果表明,外源目的基因已转入到玉米基因组中;通过RT-PCR试验证明,目的基因能在转基因玉米植株中获得转录.(本文来源于《中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(上册)》期刊2010-08-15）
胡桂学,王龙涛,葛晨霞,高雯雯,付永平[8]（2010）在《农杆菌介导法转猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白基因玉米的研究》一文中研究指出为获得猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)纤突蛋白(S)基因转玉米植株,本研究以玉米自交系"丹598"和"H99"的胚性愈伤组织为材料,通过愈伤组织对卡那霉素的敏感性试验,确定了卡那霉素40 mg/L～(本文来源于《中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集》期刊2010-08-01）
范泉水,夏咸柱,邱薇,黄耕,何洪彬[9]（2009）在《不同型犬腺病毒纤突蛋白基因序列的比较分析》一文中研究指出根据已发表的CAV纤突基因序列,用PCR方法,对4个CAV-2毒株和4个CAV-1毒株的纤突基因进行了扩增和测序,测定的核甘酸序列经推导得到分别编码543和542个氨基酸CAV纤突蛋白垒序列。测定的CAV-2比较表明:我国流行的CAV-2SY强毒株与国外标准强毒株TorontoA26/61株相同。其驯化致弱的毒株与驯化前相比在1134位发生碱基颇换。测定的CAV-1比较表明:我国流行的CAV-1株与标准强毒RI261株差异相对较大,而国内CAV-1毒株互相之间相对差别较小CAV-2与CAV-1纤突基因的同源性为80.48%。(本文来源于《畜牧市场》期刊2009年11期）
朱志刚,赵子文,柯妙拉,周玲[10]（2008）在《刺突蛋白亚单位基因疫苗在大鼠体内诱导的体液免疫反应》一文中研究指出目的利用重组腺病毒表达SARS病毒蛋白N端,研究其在动物体内诱导的体液免疫反应,探讨将其进一步开发为SARS病毒基因疫苗的可行性。方法用截短的刺突蛋白S1亚单位(SN)腺病毒载体疫苗(Ad-SN)皮下免疫大鼠[1×107pfu/(鼠·次),每周1次,连续3周],用ELISA法测定血清中抗SARS-CoV IgG水平。结果Ad-SN在大鼠体内能诱导产生高滴度的抗SARS冠状病毒IgGs,IgGs在免疫开始2周出现,在最后一次免疫1~2周达到最高(最高滴度为1∶28.5)。用Vero-E6细胞体外攻击保护试验检测免疫动物血清中SARS病毒中和抗体发现,Ad-SN免疫鼠血清能在体外保护Vero-E6细胞免受SARS病毒攻击,中和滴度达到1∶26.9。结论Ad-SN能在大鼠体内诱导SARS病毒特异的保护性体液免疫,有望发展成为一种SARS基因疫苗。(本文来源于《广东医学》期刊2008年07期）
纤突蛋白基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究拟构建携带猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白基因(TGEV-S)的转基因玉米植株并检测其表达情况。首先利用PCR方法自携带TGEV-S基因的重组质粒中扩增2.2kb的S基因片段,然后插入植物表达载体pBAC176中,该表达载体以编码除草剂草甘膦抗性的EPSP基因作为选择标记,目的基因以双增强子的CaMV35S(E35S)及其玉米Hsp70第一内含子为驱动。以授粉后10～12d约0.5～1mm大小的玉米幼胚为受体,用基因枪进行转化,经过愈伤组织诱导、草甘膦抗性筛选和分化再生培养,先后获得74株转化再生植株。利用PCR和Southern blot检测表明,T0代转基因苗有9株检测结果为阳性。T1代转基因玉米株系经PCR检测有14个转基因株系为阳性,初步确定了目的基因在这些转基因玉米中的稳定整合。进而通过间接ELISA分析初步确定目的基因在7个T1代转基因玉米株系获得了表达。研究结果为进一步研究表达TGEV-S转基因玉米的生物学活性奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
纤突蛋白基因论文参考文献
[1].路浩,张伟,王伟康,梁广成,王萍.血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因的克隆表达及多克隆抗体的制备[J].中国家禽.2018
[2].曾作财,许承扬,张晓东,王金洛,杨兵.猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白在转基因玉米中的表达[J].分子植物育种.2012
[3].郑逢梅,赵军,常洪涛,陈陆,王新卫.猪流行性腹泻病毒纤突蛋白基因克隆与序列分析[C].中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会论文集.2012
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[5].王龙涛.猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白基因体外克隆表达及鉴定[D].吉林大学.2010
[6].王龙涛,高雯雯,付永平,龙飞,王丕武.基因枪法转移猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白基因玉米植株[J].中国兽医学报.2010
[7].胡桂学,王龙涛,高雯雯,付永平,王丕武.猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白基因基因枪法转基因玉米[C].中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(上册).2010
[8].胡桂学,王龙涛,葛晨霞,高雯雯,付永平.农杆菌介导法转猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白基因玉米的研究[C].中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集.2010
[9].范泉水,夏咸柱,邱薇,黄耕,何洪彬.不同型犬腺病毒纤突蛋白基因序列的比较分析[J].畜牧市场.2009
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