小鼠、大鼠、食蟹猴与人的脂肪干细胞分离培养方法和生物学特性的比较分析

论文摘要

目的比较分析实验动物脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs）与人脂肪间充质干细胞的分离培养方法和生物学特性的差异,为自体脂肪干细胞移植治疗人类疾病的临床前研究提供临床前的实验数据和方法。方法将临床患者、食蟹猴、C57小鼠和SD大鼠的皮下脂肪组织进行分离培养后得到人脂肪间充质干细胞（h ADSCs）、食蟹猴脂肪间充质干细胞（cynomolgus monkey adipose-derived mesenchymal stem cells,c ADSCs）、小鼠脂肪间充质干细胞（mouse adipose-derived mesenchymal stem cells,m ADSCs）和大鼠脂肪间充质干细胞（rat adipose-derived mesenchymal stem cells,r ADSCs）;采用流式细胞术鉴定ADSCs表面标记物;细胞成脂、成骨诱导分化,于诱导后21 d和28 d固定染色,鉴定ADSCs的成脂成骨分化能力。结果 h ADSCs、c ADSCs、m ADSCs和r ADSCs的分离培养方法类似,贴壁培养后均呈成纤维细胞样生长;流式检测显示,不同物种ADSCs间充质干细胞表面标记物CD90、CD29为阳性,少量表达造血干细胞标记物CD34,血管内皮细胞标记物CD31为阴性。成脂和成骨分化能力检测显示,h ADSCs、c ADSCs、m ADSCs和r ADSCs和均具有成脂成骨分化能力,但其成脂成骨分化的时间略有差异。结论实验动物ADSCs与h ADSCs采用相同的分离培养方法,有类似的表面标记物表达及成脂成骨分化潜能,生物学特性具有一致性,是自体脂肪干细胞移植临床前研究的良好模型。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 实验对象
•   1.2 主要试剂和仪器
•   1.3 实验方法
•     1.3.1 人ADSCs体外分离培养
•     1.3.2 小鼠、大鼠、食蟹猴ADSCs体外分离培养
•     1.3.3 不同物种ADSCs分子表型的鉴定
•     1.3.4 不同物种ADSCs分化能力比较
•       （一） 不同物种ADSCs成脂分化
•       （二） 不同物种ADSCs成骨分化
• 2 结果
•   2.1 常用实验动物ADSCs和h ADSCs的形态学观察比较
•   2.2 常用实验动物ADSCs与hADSCs的细胞表面标记物检测
•   2.3 常用实验动物ADSCs与h ADSCs成脂分化能力比较
•   2.4 常用实验动物ADSCs与h ADSCs成骨分化能力比较
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李珂雅,石桂英,高舒平,白琳,秦川

关键词: 脂肪干细胞,食蟹猴,小鼠,大鼠

来源: 中国比较医学杂志 2019年06期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

基金: 国家重点研发计划(2017YFA0105202),北京市自然科学基金重点项目(5171001)

分类号: R329.2

页码: 14-21

总页数: 8

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