塞内卡谷病毒和口蹄疫病毒双重荧光RT-PCR检测方法的建立

论文摘要

为建立塞内卡谷病毒（SVV）和口蹄疫病毒（FMDV）的快速鉴别检测方法,本试验根据SVV 3D基因序列和FMDV 3D基因序列,分别设计探针和引物,建立了可同时检测SVV和FMDV的双重荧光RT-PCR法。结果表明,该方法特异性强,能准确检测出SVV核酸和FMDV核酸,与水泡性口炎病毒（VSV-IND和VSV-NJ）、猪水泡病病毒（SVDV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）以及猪瘟病毒（CSFV）等病原核酸无交叉反应;灵敏度高,本试验中最低可检测到SVV和FMDV核酸质量浓度分别为1.35×10-5,1.68×10-5mg/L。重复性好,Ct值变异系数小于4%。利用所建立方法对116份已知的临床样品进行检测,结果与参比方法一致。本试验建立的方法可用于SVV和FMDV的鉴别检测,为塞内卡病毒病和口蹄疫的诊断提供依据。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 病毒、核酸样品和细胞
•   1.2 主要试剂
•   1.3 探针和引物的设计
•   1.4 病毒核酸的提取
•   1.5 双重荧光RT-PCR反应体系的优化
•   1.6 特异性试验
•   1.7 灵敏度试验
•   1.8 重复性试验
•   1.9 临床样品的检测
• 2 结果
•   2.1 引物和探针的筛选
•   2.2 双重荧光RT-PCR反应体系的确定
•   2.3 特异性试验结果
•   2.4 灵敏度试验结果
•   2.5 重复性试验结果
•   2.6 临床样品的检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 林彦星,花群俊,曹琛福,杨俊兴,阮周曦,曾少灵,张彩虹,朱琳,花群义

关键词: 塞内卡谷病毒,口蹄疫病毒,双重荧光,基因

来源: 中国兽医学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 深圳海关动植物检验检疫技术中心,云南省武定县动物疫病预防控制中心

基金: 国家重点研发计划资助项目(2016YFD0500708,2017YFD0501805)

分类号: S852.65

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.06.05

页码: 1070-1074

总页数: 5

文件大小: 1119K

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