转染试剂Vigofect对HeLa细胞转染的方案优化

论文摘要

"转染试剂Vigofect对HeLa细胞转染的方案优化"是研究生细胞及组织培养实验课程设置的开放性研究项目,学生利用课堂学到的技术,在HeLa细胞转染过程中,通过调整DNA与转染试剂比例、细胞密度、转染时间这3个条件,考察了影响转染效率的因素,获得了适合其实验室要求的细胞瞬时转染优化条件。其实验结果表明:用Vigofect转染HeLa细胞时,提前11 h接种细胞,细胞汇合度达到40%,每孔的质粒转染量为2.5μg时为最优条件。

论文目录

• 0前言
• 1 实验材料与方法
•   1.1 实验材料与试剂
•   1.2 实验仪器（表1）
•   1.3 实验步骤
•     1.3.1 细胞培养
•     1.3.2 细胞转染及转染效率分析
•       1.3.2. 1 DNA与转染试剂比例对转染效率的影响
•       1.3.2. 2 细胞密度对转染效率的影响
•       1.3.2. 3 接种后培养时间对转染效率的影响
•     1.3.3 Western Blot检测
•       1.3.3. 1 收集细胞样品
•       1.3.3. 2 SDS-PAGE凝胶电泳
•       1.3.3. 3 转膜及丽春红染色
•       1.3.3. 4 裁膜及封闭
•       1.3.3. 5 孵育一抗、二抗
•       1.3.3. 6 曝光（化学发光仪）
• 2 结果与讨论
•   2.1 DNA与转染试剂比例对转染效率的影响
•   2.2 细胞密度对转染效率的影响
•   2.3 转染前细胞培养时间对转染效率的影响
• 3 总结与评述

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李思琦,李春雅,翁梦露,杨悦,张健翔,刘进,商瑜,张晓嫣

关键词: 转染

来源: 生物学通报 2019年12期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 北京师范大学生命科学学院

分类号: Q2-33

页码: 45-49

总页数: 5

文件大小: 3450K

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