H5、H7、H9亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立

论文摘要

根据GenBank中H5、H7、H9亚型禽流感病毒血凝素蛋白（HA）编码基因,使用DNAStar软件比较分析筛选出特异的保守片段,设计3对引物H5-P1/H5-P2、H7-P3/P4和H9-P5/P6。在此基础上,建立了H5、H7、H9亚型禽流感的三重RT-PCR检测方法,本方法可同时检测出样品中的H5、H7、H9亚型禽流感病毒。敏感性试验结果表明,该方法检测H5、H7、H9亚型禽流感RNA的敏感性分别达2.80、10.50、5.73 pg/μL,该方法检测其他相关病毒时均为阴性,具有很高的特异性,此外,该方法具有良好的重复性。利用所建立方法对240份禽流感临床样品进行检测,结果与血凝试验和血凝抑制试验结果的符合率为100%。此诊断方法检出时间早,且特异、敏感、经济、快速,可普遍推广,在禽流感诊断和防制中具有重要意义和应用价值。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•   1.2 试剂
•   1.3 引物设计与合成
•   1.4 样品的准备
•   1.5 单引物单模板验证
•   1.6 H5、H7、H9亚型禽流感病毒三重 RT-PCR检测方法的建立
•   1.7 敏感性试验
•   1.8 重复性试验
•   1.9 特异性试验
•   1.10 三重RT-PCR方法对临床样品的检测
• 2 结果与分析
•   2.1 单引物单模板验证
•   2.2 H5、H7、H9亚型禽流感病毒三重RT-PCR方法的建立
•   2.3 敏感性试验
•   2.4 重复性试验
•   2.5 特异性试验
•   2.6 三重RT-PCR方法对临床样品的检测
• 3 结论与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵冬敏,吴青,赵翰飞,刘青涛,杨婧,黄欣梅,刘宇卓,韩凯凯,毕可然,李银

关键词: 禽流感病毒,亚型,三重

来源: 江苏农业科学 2019年09期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心

基金: 国家重点研发计划(编号:2017YFD0500800),江苏省农业科技自主创新资金[编号:CX(15)1058]

分类号: S852.65

DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.09.047

页码: 204-207

总页数: 4

文件大小: 1079K

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