导读:本文包含了生物学特性衰老论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:衰老,干细胞,细胞,脐带,生物学,肿瘤,基因。
生物学特性衰老论文文献综述
李宇轩[1]（2019）在《人参皂苷维持衰老神经干细胞生物学特性的作用》一文中研究指出目的建立D-半乳糖致神经干细胞体外老化模型,人参皂苷干预老化神经干细胞以后,量化神经干细胞内维持生物学特性的两个内源转录因子SOX2和BMI-1的表达变化,探讨人参皂苷维持和增强老化神经干细胞生物学特性的作用。方法1选取孕15-17天大鼠,采用机械分离胚鼠海马NSCs的方法获得原代NSCs,之后传代培养。对NSCs进行特异性标志物Nestin鉴定,使用免疫荧光染色的方法。2CCK-8法筛选D-半乳糖致神经干细胞体外老化模型的最佳浓度和最佳时间。设置6个不同时间点(6h、12h、24h、48h、60h、72h),种6板,在每个板内设Dmem组、对照组以及不同剂量组(5、10、15、20、25、30、35、40mg/ml),之后加CCK-8,1-4h后用酶标仪测定在450nm处的吸光度,整理数据,绘制标准曲线。3使用课题组前期用MTS法检测NSCs细胞增殖能力筛选出的人参皂苷最佳剂量(lug/ml)及最佳作用时间(24h),采用CCk-8法检测人参皂苷对D-半乳糖致神经干细胞体外老化模型中老化神经干细胞的影响。4使用Western Blot法检测人参皂苷作用老化神经干细胞后神经干细胞内SOX2和BMI-1蛋白的表达情况,实验分为正常组、老化组和老化加人参皂苷组。首先对叁组NSCs细胞提取蛋白,按照蛋白提取试剂盒操作指示进行操作,制备蛋白样品,SDS-PAGE电泳,敷一抗二抗,最后使用凝胶成像仪检测目标蛋白,使用Image Pro Plus7.0软件对条带结果进行分析统计。5免疫荧光及细胞核染色检测正常神经干细胞,老化神经干细胞及人参皂苷作用老化神经干细胞后神经干细胞内特异性标志物Nestin,以及SOX2和BMI-1的表达情况。实验分为正常组、老化组、老化加人参皂苷组,在细胞培养、造模、加人参皂苷并进行前期的免疫荧光常规实验操作以后,加入相应的Nestin、BMI-1、SOX2一抗二抗,加DAPI染色,封片后,在激光共聚焦显微镜下观察荧光标记的细胞并拍照并通过Image Pro Plus7.0图像分析软件分析其阳性细胞数、面密度和光密度。结果1成功分离培养胚鼠海马NSCs,并经免疫荧光证明其表达NSCs特异性标记物Nestin,可进行原代培养和传代培养,纯度为95%以上NSCs。2 D-半乳糖致神经干细胞体外老化模型的最佳浓度剂量是35mg/ml,D-半乳糖致神经干细胞体外老化模型的最佳时间是24h。3采用CCk-8法检测人参皂苷对D-半乳糖致神经干细胞体外老化模型中老化神经干细胞的影响与正常组相比,老化组吸光值明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。同老化组相比,人参皂苷组吸光值明显上升,差异具有统计学意义(P<0.01)。4Western Blot法检测人参皂苷作用老化神经干细胞后神经干细胞内SOX2和BMI-1蛋白的表达情况神经干细胞正常组、老化组和人参皂苷组内的SOX2和BMI-1蛋白均阳性表达。神经干细胞老化组与正常组相比,SOX2表达明显降低,差异具有统计学意义(p<0.01),神经干细胞人参皂苷组与老化组相比,SOX2表达升高,差异具有统计学意义(p<0.05)。神经干细胞老化组与正常组相比,BMI-1表达明显降低,差异具有统计学意义(p<0.01),神经干细胞老化加人参皂苷组与老化组相比,BMI-1表达明显升高,差异具有统计学意义(p<0.01)。5免疫荧光及细胞核染色检测正常神经干细胞,老化神经干细胞及人参皂苷作用老化神经干细胞后神经干细胞内特异性标志物Nestin,以及SOX2基因和BMI-1基因的表达情况NSCs正常组、NSCs老化组和NSCs人参皂苷组均有Nestin、SOX2、BMI-1阳性表达。与NSCs正常组相比,NSCs老化组的Nestin、SOX2、BMI-1面密度、光密度和阳性细胞数均显着减少,差异具有统计学意义(P<0.01);与NSCs老化组相比,NSCs人参皂苷组的Nestin、SOX2、BMI-1面密度、光密度和阳性细胞数均增加,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)结论D-半乳糖致神经干细胞体外老化模型的最佳浓度剂量是35mg/ml,最佳时间是24h。人参皂苷可以促进老化NSCs中SOX2和BMI-1表达增加,证明人参皂苷能维持和增强衰老神经干细胞生物学特性,与人参延缓脑老化的临床作用密切相关。(本文来源于《北京中医药大学》期刊2019-05-01）
胡龙元[2]（2017）在《小鼠衰老皮肤miRNA表达谱的筛选及miR-302b-3p的细胞生物学特性研究》一文中研究指出目的:本文通过构建D-半乳糖诱导的雌性Balb/c小鼠衰老模型,利用mi RNA芯片分析皮肤衰老过程中差异表达的mi RNAs,检索mi RNA相关的各大数据库预测mi RNAs的靶基因以及相关的细胞信号通路,并在原代分离的小鼠皮肤成纤维细胞上进行mi RNAs和靶基因验证从而为延缓皮肤衰老提供药物作用靶点。方法:1给予3月龄Balb/c雌性小鼠皮下注射D-半乳糖,按100mg/kg剂量连续注射3个月,对照组注射等量生理盐水;剃毛,颈部脱臼处死小鼠后,取背部右下方皮肤2×2cm,PBS漂洗2遍后锡箔纸包裹放入液氮中浸泡,几分钟后一部分放入-80度冰箱保存,一部分送检进行mi RNAs芯片分析。2 Targetscan,mi RWALK 2.0,DIANA-Tarbase以及DIANA-mir Path数据库检索差异表达mi RNAs的靶基因以及相关的信号通路;采用cytoscape软件整合mi RNAs和其预测的靶基因,通过筛选,得出多个靶基因受多个mi RNAs调控的网络图。3取5-7天Balb/c乳鼠右下方背部皮肤,采用I型胶原酶消化法原代分离获得小鼠皮肤成纤维细胞并用细胞免疫组化法鉴定原代小鼠皮肤成纤维细胞,接着以含有D-半乳糖(20g/L)的高糖DMEM培养基培养原代成纤维细胞来建立D-半乳糖诱导的细胞衰老模型,以原代细胞传代法建立细胞复制性衰老模型;β-半乳糖苷酶分析试剂盒检测细胞的衰老情况;RT-q PCR验证皮肤组织和原代成纤维细胞mi RNAs的差异表达。4采用脂质体瞬时转染的方法在原代细胞上转染mi RNA mimics、inhibitor和si RNA;利用Western blot方法检测转染mmu-mi R-302b-3p mimics和ininhibitor后靶基因JNK2,AKT及其相关信号通路的蛋白p-c-jun,Stat3,Bim,Bcl-2和Gsk-3β表达;利用Western blot方法检测干扰JNK2后p-c-jun,Stat3,Bim,Bcl-2,Gsk-3β和AKT的表达。5双荧光素酶报告基因实验检测mi R-302b-3p与靶基因JNK2的靶向关系。结果:1.Mi RNA芯片结果表明有29个差异表达的mi RNA,其中22个mi RNA表达上调,7个mi RNA表达下调。mi RNA-基因-网络调控图结果显示micro RNAs(mi R-139-3p,184-3p,186-3p,208a-5p,291a-5p,291b-5p,302b-3p,326-3p,467c-3p,742-5p,92b-3p)和靶基因(JNK2,AKT1/2/3,Pak7,Trps1,Bcl2l11,Ikzf2)在皮肤衰老中起着重要作用。DIANA-mir Path通路分析发现根据相关mi RNAs数量的多少排名前10的通路分别为Focal adhesion,Insulin,Regulation of actin cytoskeleton,PI3K-Akt,MAPK,pathway in cancer,Hepatitis B,Axon guidance,Calcium和Wnt signaling pathway信号通路。2.与对照组相比,D-半乳糖诱导的衰老小鼠皮肤中12个mi RNA的变化趋势与芯片结果一致,且mi R-302b-3p的上调趋势最显着(P<0.01);细胞复制衰老模型中,mi R-302b-3p在第15代细胞中的表达比第2代细胞显着升高(P<0.01)3.Western blot结果表明原代成纤维细胞上调或者抑制mi R-302b-3p的表达时,靶基因JNK2和AKT变化趋势与预测结果一致。PI3K-Akt信号通路中AKT下游的Gsk-3β、Bcl-2和Bim变化趋势与AKT的变化相对应;MAPK信号通路中JNK2下游的p-c-jun和Stat3的变化趋势与JNK2的变化相对应;细胞复制衰老模型中发现JNK2,p-c-jun,Stat3,Akt,Bim,Bcl-2的变化趋势与D-半乳糖诱导的衰老模型中的相应蛋白的变化一致。4.抑制JNK2的表达后,JNK2下游的p-c-jun和Stat3发现了相应的改变,并且AKT通路中的Gsk-3β表达下降,Bcl-2表达升高5.双荧光素酶报告实验证明了JNK2是mi R-302b-3p的靶基因结论:1.衰老皮肤的mi RNAs表达谱表明有29个差异表达的mi RNAs,其中22个上调表达,7个下调表达,并且mi R-302b-3p在衰老成纤维细胞中差异最显着。2.MiR-302b-3p对皮肤衰老的调控机制可能是:1,通过抑制靶基因JNK2以及JNK2信号通路;2,通过抑制靶基因AKT以及Akt信号通路。(本文来源于《广西医科大学》期刊2017-05-01）
易桥,卢燕勤,周玥颖,刘丝灵[3]（2016）在《人牙髓干细胞衰老相关生物学特性研究及基因表达图分析》一文中研究指出目的通过对比不同年龄来源DPSCs的生物学特点,并对其基因表达谱进行分析,初步探讨供者年龄对DPSCs生物学特性的影响及其可能机制。方法将两年龄组来源DPSCs在诱导分化培养基中培养,然后分别检测其分化能力。利用长链非编码RNA(lnc RNA)微阵列芯片和生物信息学分析检测来自年老和年轻个体DPSCs的lnc RNA和m RNA表达谱差异。结果年轻个体来源的DPSCs比年老个体来源的DPSCs具有更强的增殖能力、成骨分化能力和成脂分化能力。在年轻个体来源的DPSCs中,共有389个lnc RNA较年老个体来源的DPSCs表达上调,有172个lnc RNA表达下调。此外,相较于年老个体来源的DPSCs,年轻个体来源的DPSCs中共有304个差异表达的m RNA,其中247个m RNA表达上调,57个m RNA表达下调。生物信息学分析表明,调控细胞周期、RNA转运等功能的信号通路可能与DPSCs衰老相关,并且发现NFYB、GTF2B和NR3C1是影响DPSCs衰老的核心转录因子,FR249114、FR299091和ENST00000450004是影响DPSCs衰老的核心lnc RNA。结论本实验研究结果表明细胞衰老损伤了DPSCs的增殖和分化能力,不同年龄组来源的牙髓干细胞在RNA水平发生了众多lnc RNA和m RNA的改变。(本文来源于《2016中国国际正畸大会暨第十五次全国口腔正畸学术会议论文汇编》期刊2016-10-10）
文孝婷[4]（2016）在《衰老间质成纤维细胞对人结肠癌LoVo细胞生物学特性的影响》一文中研究指出研究目的:通过前期建立的间质衰老模型,模拟肿瘤微环境中的肿瘤相关成纤维细胞(Tumor associated fibroblast,TAFs),观察衰老间质对人结肠癌LoVo细胞上皮-间质转化、皮下成瘤与转移等生物学作用的影响。研究方法:应用Transwell共培养模型将LoVo细胞分别与衰老间质成纤维细胞和正常间质成纤维细胞共培养(A组:LoVo+LV-GALC,B组:LoVo+LV-NC),通过Western Blot检测LoVo细胞中上皮-间质样表型转换(Epithelial mesenchymal transition,EMT)相关分子标志物表达的改变情况,并分别将LoVo细胞与LV-GALC和LV-NC细胞制成混合细胞悬液,接种于裸鼠皮下,观察其成瘤情况。通过流式细胞仪检测与间质细胞共培养后的LoVo细胞肿瘤干细胞(Cancer stem cell,CSC)相关指标的表达情况。并进行转录组学分析筛选两组中差异表达的蛋白并在荷瘤小鼠肿瘤组织中进行该蛋白的表达验证。结果:与B组相比,A组Lo Vo细胞上皮相关标记物E-cadherin表达下降,但无统计学差异,间质相关标记物Vimentin在48h及72h均明显升高(p<0.05)。并且A组小鼠肿瘤体积与肿瘤重量明显大于B组小鼠(p<0.05)。A组与B组LoVo细胞CD44均表达阳性且未见明显差异,而CD24、CD133均未见明显表达。转录组学分析发现:A组LoVo细胞中转录激活因子3(Activating transcription factor 3,ATF3)表达明显上调。并且A组小鼠肿瘤组织内ATF3表达量明显高于B组小鼠(p<0.05)。结论:衰老间质成纤维细胞可能通过分泌相关调节因子,引起人结肠癌LoVo细胞ATF3的激活表达从而促进其发生EMT并提高其成瘤能力。(本文来源于《苏州大学》期刊2016-06-01）
刘文佳[5]（2014）在《衰老所致骨质疏松中自噬与BMMSCs生物学特性的关系研究》一文中研究指出目的:研究衰老性骨质疏松中骨髓间充质干细胞(BMMSCs)生物学特性和自噬能力的变化,探索二者在衰老性骨质疏松中的关系。方法:骨组织切片染色方法和Mic ro-CT检测3个月和24个月小鼠股骨的骨密度;克隆形成实验检测3个月和24个月小鼠BMMSCs的增殖能力;免疫荧光方法检测3个月和24个月小鼠细胞中LC3的分布情况;透射电镜检测3个月和24个月小鼠BMMSCs细胞的自噬体数量及质量;WB和RT-PCR检测3个月和24个月小鼠BMMSCs细胞中自噬相关蛋白Beclin 1,LC3,ATG7和ATG12,衰老相关蛋白p16,p21和p53的表达情况。结果:骨组织切片的VEG、甲苯胺蓝和丽春红染色表(本文来源于《2014全国口腔生物医学学术年会暨“西湖国际”口腔医学高峰论坛论文汇编》期刊2014-10-24）
严菊芳,张嵩午[6]（2012）在《叶片逆向衰老小麦及其生物学特性》一文中研究指出探讨叶片逆向衰老小麦的生物学特性,为高产小麦育种研究提供参考。2006-2011年连续5年进行了小麦叶片逆向衰老顺序和正常衰老顺序的比较试验,对冠层温度和一些重要生物学参数进行了测定。具有逆向衰老现象的小麦即叶片逆向衰老小麦的冠温、叶温、千粒质量的变化和正常衰老小麦明显不同,其冠层较冷且结实后期倒二叶的叶温低于旗叶,千粒质量大于正常衰老小麦,且增幅明显。其正置茎顶叁叶叶色、叶绿素含量的变化规律与正常衰老小麦相似,倒置茎则明显不同。在接近乳熟后期时倒置茎旗叶叶色等级高于倒二叶;叶绿素含量表现为倒二叶>旗叶>倒叁叶,并持续到小麦成熟。自然界存在小麦的逆向衰老现象,这类小麦倒置茎上旗叶的衰老先于倒二叶,且与此现象关联的生物学参数均发生了异常的变化。(本文来源于《华北农学报》期刊2012年S1期）
宁雪[7]（2012）在《衰老的脐带间充质干细胞生物学特性及基因表达谱的研究》一文中研究指出目的：1.观察并检测人脐带间充质干细胞体外培养衰老过程中细胞形态学、表型、生长动力学及诱导分化能力等生物学特性的改变；2.检测人脐带间充质干细胞体外培养衰老过程中基因表达谱的改变并探讨其可能的机制。方法1.细胞培养：用组织块贴壁法培养人脐带间充质干细胞,取第3代细胞作为对照组,连续培养到第15代的细胞为衰老组,倒置显微镜下观察细胞形态,并分别制成细胞爬片扫描电镜观察并拍照。2.生长增殖：分别取对照组和衰老组细胞,接种于96孔培养板中,各设8复孔,培养6天。每日检测在450nm波长处测吸光值(OD值),绘制细胞生长曲线。3.表型检测：对照组和衰老组细胞消化后充分吹打成单细胞悬液,使用流式细胞仪检测并分析两组细胞CD34、CD45、CD44和CD105等表型变化。4.诱导分化能力鉴定：将对照组和衰老组细胞置于不同的诱导培养液中向成骨细胞及成脂细胞诱导分化,诱导分化14天后,进行固定,并分别进行相应的染色观察诱导分化差异。5.基因表达谱分析：细胞洗涤后加入’Trizol试剂,提取总RNA,进行基因表达谱芯片杂交、检测和数据分析,并用DNA芯片扫描仪行微阵列扫描。将扫描结果进行标准化分析,与对照组相比log2Ratio|>2(4-fold change)为差异表达,并进行GO及KEGG pathway分析。6.PCR验证：根据基因表达谱的结果,选取了多个典型的差异基因进行实时定量PCR验证。检测对照组和衰老组细胞BAX, FADD, JAK2, IGF3BP5, PDK1, Col-Ⅲ, Col-Ⅳ, SMAD2, SAMD4, BMPR2, CCND2等基因的差异表达。结果1.细胞形态：对照组细胞呈典型的成纤维状,每平方毫米可达500个细胞；衰老组细胞个体差异较大,细胞变得宽大,每平方毫米仅有约150个细胞,衰老细胞核质比减小。扫描电镜下可见年轻组细胞形态饱满,表面微绒毛分布均匀,而衰老组细胞伪足增多,整体扁平。2.增殖情况：对照组和衰老组生长曲线在接种后都有一个停滞期(12-24小时),然后进入增殖期,对照组细胞能更快的进入增殖期,并在第5天达到更高的细胞数量后进入平台期。而衰老组停滞期长,进入增殖期后第3天进入平台期,最终的细胞数量也少。3.表型检测：根据流式细胞仪检测结果,对照组和衰老组细胞CD34和CD45均为阴性表达,CD44和CD105均为高表达,组间阳性率表达并无显着差异。4.分化能力：在适当的分化条件诱导下,对照组和衰老组细胞均能向成骨和脂肪细胞分化：向成骨细胞诱导14天后大部分细胞出现钙化胞外基质,茜素红S染色阳性碱性磷酸酶染色阳性；向脂肪细胞诱导分化14天后约50%的细胞内出现油红O阳性脂肪颗粒。这些结果证明所获得的贴壁细胞符合间充质干细胞的特征,与对照组细胞相比,衰老组细胞诱导分化能力显着降低。5.差异基因信号通路及基因聚类分析：将衰老组细胞与对照组差异表达的基因进行KEGG pathway分析(p<0.05),可见衰老组显着上调通路有20条,其中包括自身免疫病、退行性疾病相关通路,下调通路49条,涉及通路包括合成代谢、细胞外基质、物质代谢和细胞增殖等。对41000+条基因进行检测,差异基因多达8000个,对显着差异的2000个基因进行聚类分析,显示差异基因涉及转录、翻译、生物合成、物质代谢、信号转导、细胞增殖、细胞迁移、细胞间连接等多方面。6.PCR验证：荧光定量PCR示衰老组细胞与对照组细胞相比,BAX, FADD, JAK2, IGF3BP5, PDK1和MGMT等基因在衰老细胞中表达上调,而Col-Ⅲ, Col-Ⅳ, SMAD2, SAMD4, BMPR2, CCND2和PAK2等基因表达下调。结论1.第3代对照组细胞及第15代衰老组细胞具有增殖潜能、相同的细胞表型,并能向成骨、脂肪细胞诱导分化,但衰老组细胞在形态学、增殖速度和诱导分化的能力均较对照组降低。2.体外培养人脐带间充质干细胞的过程中,细胞随传代次数的增加形态发生改变、增殖减慢、分化及合成代谢能力均减退,细胞趋于老化。3.衰老组细胞与对照组细胞比较,下调表达的基因和信号通路涉及细胞增殖、细胞迁移、代谢、生物合成、细胞外基质、细胞连接等方面,而免疫紊乱及退行性相关基因表达明显上调。(本文来源于《山东大学》期刊2012-05-06）
宁雪,李栋,汪大琨,付金秋,鞠秀丽[8]（2012）在《脐带间充质干细胞体外衰老过程中生物学特性及基因表达谱的变化》一文中研究指出本研究探讨人脐带间充质干细胞(UC-MSC)在体外培养的衰老过程中细胞生物学特征及衰老相关基因的变化特点。体外分离培养UC-MSC,取第3代(对照组)和第15代(衰老组)细胞进行形态学观察、增殖检测、流式表型测定和人类全基因组表达谱芯片分析,并选取重要基因进行定量逆转录多聚酶链反应验证。结果显示,与对照组相比,衰老组细胞形态变大,增殖速度减慢,但CD44和CD105等细胞表型阳性率无变化;衰老细胞组的核糖体小亚基组成相关基因显着上调,上调的信号通路主要涉及类固醇合成、半乳糖代谢、自身免疫病和退行性疾病;下调明显的是细胞骨架,DNA、mRNA结构的结合以及蛋白质功能等相关基因,与细胞黏附功能和细胞增殖周期等相关。结论:第15代的UC-MSC出现细胞代谢与增殖功能下降,从而导致细胞衰老。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2012年02期）
王奇[9]（2010）在《蛹虫草的生物学特性及抗衰老功效研究》一文中研究指出蛹虫草是我国传统的食药用真菌,具有极高的开发利用价值。本实验于抚顺地区采集野生蛹虫草菌株4株,用于研究蛹虫草子实体和菌丝体生长条件,以建立较为完整的筛选优良蛹虫草菌株的方法,并利用筛选出的优良菌株作为母种来进行蛹虫草的抗衰老功效研究。首先将从不同品种野生蛹虫草分离得到的菌株分别置于不同的营养条件(碳源、氮源、料液比等)、环境因素(温度、湿度、光照、通气状况等)中,并且分别采用不同的培养方法(固体米饭培养基培养、液体深层发酵培养)进行培养,然后对不同条件下生长的蛹虫草样品进行功效成分分析(虫草多糖、氨基酸、虫草菌素、虫草酸、SOD),从而得到了人工培养蛹虫草的最适培养条件,建立了较为完整的筛选优良蛹虫草菌株的方法。结果表明,1号蛹虫草是本研究筛选到的子实体和菌丝体产量高、有效成分含量也相对较高的优良菌株。培养蛹虫草子实体的最适条件为：最适碳源为淀粉；最适氮源为蛋白胨；大米与营养液的最适比例为1：1；菌丝体生长最适温度为22℃-25℃,最适相对湿度为65%-70%；菌丝体生长期间需要完全避光培养；待菌丝体吃透培养基后应进行光照刺激以诱导子实体产生,此时最适培养温度为13℃-25℃,最适相对湿度为70%-75%；另外还需采取通气、光照、温差刺激等措施促进子实体生长。液体深层发酵培养蛹虫草菌丝体的最适条件为：最适碳源为葡萄糖；最适氮源为蛋白胨；液体种接种量为5%；液体种菌龄为48h；发酵瓶装液量为100m1、250ml；起始PH值为7.0-7.5；摇床转速为150r、min;培养温度为22℃-24℃；发酵时间为76h。选择由1号野生蛹虫草菌株作为母种培养的子实体和发酵菌丝体进行抗衰老功效研究。以小白鼠为实验材料进行耐力试验、反应灵敏性试验以及生殖细胞活力试验；以老年大鼠为实验材料进行生物体内氧自由基清除试验；并且进行野生蛹虫草与人工培植蛹虫草清除·OH的对比研究。结果表明,人工培植蛹虫草具有明显的抗衰老功效,具有良好的发展前景。(本文来源于《华中农业大学》期刊2010-09-01）
马超[10]（2009）在《不同种源何首乌生物学特性及抗衰老作用比较研究》一文中研究指出何首乌(Polygonum multfolrum Thunb.)为蓼科多年生草本植物,其块根及藤茎均为名贵的大宗中药材,是我国传统的延年益寿的中草药。主要分布于黄河以南各省区,野生资源丰富,部分省区有栽培,全国范围内使用。在保健和化工等方面也有广阔的开发前景。本文对全国10个省份何首乌野生种源的生物学特性及质量差异、抗氧化作用、解剖学特征进行比较,取得的主要研究结果如下:1.何首乌各种源在生长、生理及质量等方面均存在显着差异,其中:1.1花期、种子成熟期的变异花期和种子成熟期在种源间存在差异,北端种源的花期和种子成熟期明显早于南端种源,表明长期的环境因素导致分布在不同地理区域的何首乌种源在开花生理和结实物候方面产生了遗传分化。1.2种子性状的变异研究结果表明种源间种子性状的变异达到显着水平,北端种源的种子细小而南端种源的种子长度、宽度和千粒重均比北端种源大,但种形指数则是北端种源大于南端种源;同时通过各性状相关分析表明种子千粒重与种子长度和种子宽度呈显着正相关。1.3总藤长、总地径生长动态的变异本研究从各种源间的总藤长、总地径生长动态差异分析来看,各月生长差异均达到显着水平,在总藤长生长总增量方面,德庆种源、井冈山种源和田阳种源生长迅速,排列在前3位,而在总地径生长总增量方面则是恩施种源、登封种源和峨眉山种源排在前3位。1.4单株叶面积增长动态的变异在种源间各月份生长过程中单株叶面积及各月平均值均有显着差异,从各月平均单株叶面积来看,南端种源比北端种源大,这与南端种源藤茎生长迅速且单叶面积大有关。从各月生长变化表明,各种源的单株叶面积均在9月份达到最大值,随后逐月下降,北端种源生长降幅较大,其新叶增长少,叶片凋落较多。1.5生物量的变异本研究表明何首乌种源各生物量指标在种源内差异不显着,而在种源间均有显着差异。其中总生物量反映了各种源总体上的生长水平,研究表明德庆、田阳和靖西等南方种源的总生物量比北端种源大;何首乌的主要产品是其块根,块根重是最重要的经济性状指标,研究表明德庆、峨眉和靖西种源在块根生长方面表现最快;总藤重也是较重要的经济性状指标,在这方面,田阳、德庆和靖西种源表现较高;块重比(TWR)和块根比(TRR)分别反映了何首乌块根生长在总生物量生长和地下部分生长中所占的比例,德庆和缙云山种源有较大的块重比和块根比,从中看出,峨眉种源虽然在总生物量和地上部分的生长表现不佳,但其块根生长较快,因此在种源选择时尚需结合质量性状等其他方面加以考虑。1.6叶绿素、硝酸还原酶的变异叶绿素含量在种源间各月份叶绿素含量的差异显着,各种源5个月的平均叶绿素总含量较高的是德庆、井冈山和登封等种源,从各月份变化情况可看出,叶绿素总含量在5月达到最高,在3～7月期间呈低-高-低的变化趋势;而叶绿素a/b含量则是北方种源高于南方种源。本研究对何首乌各种源硝酸还原酶活力的分析表明,2个季节的平均含量较高的是恩施、德庆等南端种源,比北部种源的含量高,从季节变化可见,在生长最旺盛的夏季(7月份)含量比生长缓慢的春季(3月份)高。1.7蒽醌类成分含量的测定本研究表明不同种源蒽醌类各成分的含量有较大的不同,水解前游离型蒽醌含量、水解后总蒽醌、结合型蒽醌含量、大黄素和大黄素甲醚含量的分析表明在各种源间有差异,田阳种源在蒽醌类成分各项主要指标均最低,登封和德庆种源的水解前游离型蒽醌含量较高,登封和德庆种源的水解后总蒽醌含量和结合型总蒽醌含量较高。1.8 2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量测定结果说明采集地的地理环境对药材质量有影响。不同生长环境是影响2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷积累的重要因素。2.通过花粉粒形态扫描电镜观察花粉粒形态特征分析九个种源地何首乌花粉表面均有网状纹饰,具有较高的一致性。通过显微鉴定不同种源何首乌观察显示田阳种源异型维管束与其他种源具有非常大的差异,其排列呈2层,且木质化程度较高,其他种源地差异不明显。3.抗氧化作用实验结果表明,五个种源地何首乌水煎液具有抗氧化作用。田阳种源何首乌抗氧化作用有别于其余种源地,其水煎液的抗氧化作用强弱与其2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷含量高低无必然相关性。结论本研究结果显示何首乌各种源质量性状不仅与种源自身的遗传有关而且与生长地的环境因素有关。从化学成分含量、花粉形态、异型维管束等角度支持将田阳种源另列为何首乌的变种。(本文来源于《广东药学院》期刊2009-05-01）
生物学特性衰老论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:本文通过构建D-半乳糖诱导的雌性Balb/c小鼠衰老模型,利用mi RNA芯片分析皮肤衰老过程中差异表达的mi RNAs,检索mi RNA相关的各大数据库预测mi RNAs的靶基因以及相关的细胞信号通路,并在原代分离的小鼠皮肤成纤维细胞上进行mi RNAs和靶基因验证从而为延缓皮肤衰老提供药物作用靶点。方法:1给予3月龄Balb/c雌性小鼠皮下注射D-半乳糖,按100mg/kg剂量连续注射3个月,对照组注射等量生理盐水;剃毛,颈部脱臼处死小鼠后,取背部右下方皮肤2×2cm,PBS漂洗2遍后锡箔纸包裹放入液氮中浸泡,几分钟后一部分放入-80度冰箱保存,一部分送检进行mi RNAs芯片分析。2 Targetscan,mi RWALK 2.0,DIANA-Tarbase以及DIANA-mir Path数据库检索差异表达mi RNAs的靶基因以及相关的信号通路;采用cytoscape软件整合mi RNAs和其预测的靶基因,通过筛选,得出多个靶基因受多个mi RNAs调控的网络图。3取5-7天Balb/c乳鼠右下方背部皮肤,采用I型胶原酶消化法原代分离获得小鼠皮肤成纤维细胞并用细胞免疫组化法鉴定原代小鼠皮肤成纤维细胞,接着以含有D-半乳糖(20g/L)的高糖DMEM培养基培养原代成纤维细胞来建立D-半乳糖诱导的细胞衰老模型,以原代细胞传代法建立细胞复制性衰老模型;β-半乳糖苷酶分析试剂盒检测细胞的衰老情况;RT-q PCR验证皮肤组织和原代成纤维细胞mi RNAs的差异表达。4采用脂质体瞬时转染的方法在原代细胞上转染mi RNA mimics、inhibitor和si RNA;利用Western blot方法检测转染mmu-mi R-302b-3p mimics和ininhibitor后靶基因JNK2,AKT及其相关信号通路的蛋白p-c-jun,Stat3,Bim,Bcl-2和Gsk-3β表达;利用Western blot方法检测干扰JNK2后p-c-jun,Stat3,Bim,Bcl-2,Gsk-3β和AKT的表达。5双荧光素酶报告基因实验检测mi R-302b-3p与靶基因JNK2的靶向关系。结果:1.Mi RNA芯片结果表明有29个差异表达的mi RNA,其中22个mi RNA表达上调,7个mi RNA表达下调。mi RNA-基因-网络调控图结果显示micro RNAs(mi R-139-3p,184-3p,186-3p,208a-5p,291a-5p,291b-5p,302b-3p,326-3p,467c-3p,742-5p,92b-3p)和靶基因(JNK2,AKT1/2/3,Pak7,Trps1,Bcl2l11,Ikzf2)在皮肤衰老中起着重要作用。DIANA-mir Path通路分析发现根据相关mi RNAs数量的多少排名前10的通路分别为Focal adhesion,Insulin,Regulation of actin cytoskeleton,PI3K-Akt,MAPK,pathway in cancer,Hepatitis B,Axon guidance,Calcium和Wnt signaling pathway信号通路。2.与对照组相比,D-半乳糖诱导的衰老小鼠皮肤中12个mi RNA的变化趋势与芯片结果一致,且mi R-302b-3p的上调趋势最显着(P<0.01);细胞复制衰老模型中,mi R-302b-3p在第15代细胞中的表达比第2代细胞显着升高(P<0.01)3.Western blot结果表明原代成纤维细胞上调或者抑制mi R-302b-3p的表达时,靶基因JNK2和AKT变化趋势与预测结果一致。PI3K-Akt信号通路中AKT下游的Gsk-3β、Bcl-2和Bim变化趋势与AKT的变化相对应;MAPK信号通路中JNK2下游的p-c-jun和Stat3的变化趋势与JNK2的变化相对应;细胞复制衰老模型中发现JNK2,p-c-jun,Stat3,Akt,Bim,Bcl-2的变化趋势与D-半乳糖诱导的衰老模型中的相应蛋白的变化一致。4.抑制JNK2的表达后,JNK2下游的p-c-jun和Stat3发现了相应的改变,并且AKT通路中的Gsk-3β表达下降,Bcl-2表达升高5.双荧光素酶报告实验证明了JNK2是mi R-302b-3p的靶基因结论:1.衰老皮肤的mi RNAs表达谱表明有29个差异表达的mi RNAs,其中22个上调表达,7个下调表达,并且mi R-302b-3p在衰老成纤维细胞中差异最显着。2.MiR-302b-3p对皮肤衰老的调控机制可能是:1,通过抑制靶基因JNK2以及JNK2信号通路;2,通过抑制靶基因AKT以及Akt信号通路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
生物学特性衰老论文参考文献
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