沉默Fis1基因对METH诱导体外培养SH-SY5Y细胞增殖能力、线粒体膜电位和超微结构的影响

论文摘要

目的评估线粒体分裂蛋白1（Fis1）在甲基苯丙胺（METH）诱导人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y细胞）损伤中的作用。方法采用成组设计方法,将体外培养SH-SY5Y细胞分为不同组别:未沉默组、沉默阴性组和沉默组,不同浓度的METH诱导各组SH-SY5Y细胞24 h。利用Western blot检测Fis1蛋白表达水平,使用CCK-8细胞毒性增殖实验分析METH对SH-SY5Y细胞增殖能力的影响,利用线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）检测METH对SH-SY5Y细胞MMP水平的影响,使用透射电镜观察METH对SH-SY5Y细胞线粒体超微结构的影响。结果未沉默组、沉默阴性组和沉默组中,与对照组比较,各组组内随METH诱导SH-SY5Y细胞的浓度升高,Fis1蛋白表达水平升高（P<0.05）、增殖能力减弱（P<0.05）、MMP水平降低（P<0.05）;与未沉默组和沉默阴性组相同浓度比较,沉默组SH-SY5Y细胞Fis1蛋白表达水平降低（P <0. 05）,增殖能力增强（P <0. 05）,MMP水平升高（P <0. 05）。组内与对照组比较,2. 0mmol·L-1METH诱导未沉默组、沉默阴性组和沉默组,透射电镜观察见线粒体小球状结构增多（P <0. 01）。结论 Fis1可能在METH诱导体外培养SH-SY5Y细胞损伤中起关键作用。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 细胞
•   1.2 试剂与仪器
•   1.3 细胞培养、转染及METH处理
•   1.4 CCK-8法检测细胞增殖
•   1.5 Western blot法检测Fis1蛋白表达水平
•   1.6 MMP检测
•   1.7 透射电镜观察体外培养SH-SY5Y细胞线粒体超微结构
•   1.8 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 CCK-8法检测结果
•   2.2 沉默Fis1基因对Fis1蛋白表达的影响
•   2.3 SH-SY5Y细胞MMP水平
•   2.4 METH对SH-SY5Y细胞线粒体超微结构的影响
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 黄仕美,牟登峰,王琪,郑丹,齐晓岚,官志忠,于燕妮,楼迪栋

关键词: 甲基苯丙胺,人神经母细胞瘤细胞,线粒体分裂蛋白,线粒体膜电位,线粒体超微结构

来源: 中国药理学通报 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 药学

单位: 贵州医科大学法医学院法医病理学教研室,贵阳妇幼保健院围产期保健科,贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室贵州省医学分子生物重点实验室,贵州中医药大学基础医学院

基金: 国家自然科学基金资助项目(No 81760336),贵阳市科技计划项目(No[2017]30-3)

分类号: R99

页码: 1725-1730

总页数: 6

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