新城疫病毒HN特异性多肽抗体间接ELISA方法的建立

论文摘要

为建立快速检测新城疫病毒抗体的血清学方法,通过合成NDV主要保护性抗原HN蛋白和F蛋白上的特异性表位多肽,将其与BSA载体蛋白偶联,作为包被抗原,建立检测NDV抗体的间接ELISA方法。并对其进行敏感性、特异性、与HI方法阴阳性符合率检测。结果显示:基于"PDEQDYQIRMAKSSYKPGRFGGKRIQQAILS"多肽的该ELISA方法与其他鸡主要传染病阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性。通过对112份临床鸡血清样品进行检测,该方法的敏感性为94.0%、特异性为100%,与HI方法检测的阴阳性符合率为96.4%。研究表明,建立的ELISA方法对血清中NDV的抗体水平检测具有较高的灵敏度和很好的特异性,可为ND疫苗免疫后抗体水平的检测和监测提供可靠工具。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 血清
•   1.2 主要材料与试剂
•   1.3 试验方法
•     1.3.1 检测NDV抗体的多肽的设计与制备
•     1.3.2 多肽的偶联
•     1.3.3 检测NDV抗体的最优多肽的筛选
•     1.3.4 ELISA方法、HA试验及HI试验操作步骤
•     1.3.5 抗原最佳包被浓度和血清抗体稀释比例的确定
•     1.3.6 封闭液的选择
•     1.3.7 样品稀释液的选择
•     1.3.8 阴阳性判定标准的确定及敏感性试验
•     1.3.9 特异性试验
•     1.3.1 0 临床血清样品的检测和与HI的阴阳性符合率试验
• 2 结果与分析
•   2.1 检测NDV抗体的多肽的设计与制备
•   2.2 检测NDV抗体的最优多肽的筛选
•   2.3 抗原最佳包被浓度、血清抗体稀释比例的确定
•   2.4 封闭液的选择
•   2.5 样品稀释液的选择
•   2.6 阴阳性判定标准的确定及敏感性试验
•   2.7 特异性试验
•   2.8 临床血清样品的检测和与HI阴阳性符合率试验
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 任海洋,成泽,万颖,张安定

关键词: 新城疫病毒,多肽,抗体,间接

来源: 中国家禽 2019年08期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 华中农业大学动物医学院,农业农村部兽用诊断制剂创新重点实验室

基金: 国家重点研发计划(2016YFD0500801)

分类号: S852.65

DOI: 10.16372/j.issn.1004-6364.2019.08.003

页码: 10-14

总页数: 5

文件大小: 2495K

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