抗病转基因论文_包婉莹,仲晓芳,杜茜,赵倩倩,杨向东

导读:本文包含了抗病转基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:转基因,棉花,基因,品系,侧翼,聚糖,特异性。

抗病转基因论文文献综述

包婉莹,仲晓芳,杜茜,赵倩倩,杨向东[1](2018)在《抗病转基因大豆事件B4J8049外源T-DNA整合位点分析及特异性检测》一文中研究指出大豆疫霉根腐病是由卵菌纲病原菌—疫霉菌(Phytophthora sojae)引起的大豆毁灭性病害之一。本研究前期利用农杆菌介导转化技术,将广谱抗病基因hrpZm导入栽培大豆Williams 82,获得高抗疫霉根腐病转基因大豆新品系B4J8049,并已进入环境释放试验阶段。为进一步推进该转化事件的生物安全评价及应用,本研究采用热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)方法分析外源T-DNA整合位点右边界序列,并依据其序列特征,建立该转化事件特异性检测方法。Southern杂交检测结果表明,转基因大豆事件B4J8049外源T-DNA插入拷贝数为1个。根据外源T-DNA插入片段序列设计3条嵌套特异性检测引物,与简并引物组合进行TAIL-PCR扩增反应,获得外源TDNA插入位点右边界序列。BLAST分析(https://soybase.org/)表明,外源T-DNA片段以单拷贝形式反向插入的方式整合到大豆基因组中第8号染色体的187 824位点。在此基础上,依据插入位点右边界序列设计检测引物,建立转基因大豆事件B4J8049特异性检测方法。本研究为该抗病转基因事件B4J8049及其衍生产品特异性检测提供依据。(本文来源于《东北农业科学》期刊2018年05期)

宗华[2](2018)在《转基因细菌变身抗病“斗士”》一文中研究指出人们通常服用药物清除难对付的细菌。如今,一种违反直觉的方法——将转基因细菌转变成药物——正越来越受到认可。若干公司正在测试工程菌能否治疗影响大脑、肝脏和其他器官的疾病,甚至杀死有害细菌。不过,尽管美国监管机构已经批准将若干种工程菌作为基因疗法进行(本文来源于《中国科学报》期刊2018-07-02)

黄广平[3](2018)在《CD28和4-1BB转基因猪的构建及其抗病功能研究》一文中研究指出T细胞免疫应答在宿主抵抗胞内病原感染过程中扮演重要角色,同时对B细胞的效应功能发挥重要的调节作用。T细胞完全活化不仅依赖于MHC-抗原肽-TCR介导的抗原特异性信号,还需要CD28和4-1BB等分子介导的共刺激信号。增强第二信号可以降低T细胞活化时对第一信号的需求,即降低T细胞活化的阈值。一旦缺失第二信号,T细胞将出现反应无能从而导致病原逃避宿主的免疫防御。目前,靶向共刺激信号分子如CTLA-4和PD-1的免疫治疗已取得重大突破。鉴于我国养猪业频繁遭受各种传染性疾病的侵袭,提高猪群的抗病能力无疑是一种快速而有效的解决手段。在本研究中,我们拟通过转基因技术高表达猪共刺激分子CD28和4-1BB来增强疫苗的免疫效果,从而提升猪群的抗病能力。基于CRISPR/Cas9介导的基因编辑分别将目的基因CD28或4-1BB定点整合到猪胎儿成纤维细胞的Rosa26位点,获得2株CD28转基因细胞系和4株4-1BB转基因细胞系,利用体细胞核移植技术制备转基因猪,成功获得5头F0代CD28转基因猪和3头F0代4-1BB转基因猪。鉴定结果显示,CD28和4-1BB均定点整合到预期位点,且能稳定表达,二者的mRNA水平分别高于同窝阴性仔猪。此外,血常规及生化指标显示CD28或4-1BB转基因对仔猪的生理健康无副作用。为验证高表达CD28和4-1BB能否增强疫苗的免疫保护效果,本研究以猪繁殖与呼吸综合征病毒为模型,分别在疫苗免疫和攻毒后,检测T细胞介导的免疫应答水平。结果发现,CD28转基因猪T细胞活化水平明显升高,而4-1BB为诱导性表达,对维持T细胞的增殖发挥重要作用。免疫后28天,CD28转基因猪CD4 T细胞的比例(26.03 ± 1.28%)显着高于野生型猪(21.57 ± 0.91%,P=0.046),其病毒中和抗体水平为野生型猪的2倍。50倍剂量的疫苗毒株攻毒后10天,转基因猪的临床症状较轻。转基因猪中和抗体滴度仍维持较高水平,CD8T细胞分泌IFN-y能力显着增强,血清中的病毒载量显着降低(P=0.02)。而4-1BB转基因对PRRSV抗体水平无显着影响,但可以促进Th1型细胞因子如IL-2、IFN-γ、TNF-α的分泌。进一步CTL体外杀伤试验结果显示,4-1BB转基因显着增强CTL对PRRSV感染靶细胞的杀伤效应。为探究CD28转基因对宿主抗感染能力的影响,我们以弓形虫Toxoplasma gondii为病原模型,检测感染后T细胞介导的适应性免疫应答特征。结果发现,与野生型猪相比,CD28转基因猪抗弓形虫感染的适应性免疫应答无显着差异,但其肝脏、肌肉等组织中的载虫量明显降低。该结果表明,CD28转基因猪具有一定的抗弓形虫感染的能力,但其具体机制仍需进一步研究。综上,本研究获得了定点整合且能稳定表达一额外拷贝的CD28或4-1BB转基因猪,揭示了两种共刺激分子均可以促进T细胞的效应功能,提升疫苗免疫效果和宿主的抗感染能力,为我国抗病育种事业提供了广谱抗病基因和新的研究策略。(本文来源于《中国农业大学》期刊2018-05-01)

李鹏,张琳,叶吉妮,贺诗瑶,贾军伟[4](2018)在《抗病转基因水稻M12及其产品成分的定性、定量PCR检测方法》一文中研究指出通过定性PCR扩增了转基因水稻M12转化体特异性片段和水稻内标基因(sps)片段,将PCR产物酶切连接后构建到T载体,得到适于转基因水稻M12品系特异性PCR检测的质粒分子p M12,建立了事件特异性定性、定量PCR检测方法。定性PCR结果表明,本方法可特异性检测出M12,检测限可达100拷贝单倍体水稻基因组;定量PCR结果表明,M12和sps定量PCR标准曲线R2为0.998和0.997,扩增效率为95.3%和108.4%,重复性分析标准偏差范围为0.043~0.276,定量极限和检测极限可达100和10拷贝。对转基因含量为1.0%的混合样品定量结果的相对偏差在8.0%以内。本研究建立的方法可用于转基因水稻M12及其加工产品成分的检测。(本文来源于《作物学报》期刊2018年07期)

柠檬水[5](2017)在《澳大利亚:通过转基因香蕉寻找抗病品种》一文中研究指出为了找到抗巴拿马TR4病菌的新品种,澳大利亚将在达尔文市的南部进行转基因香蕉试验。利奇菲尔德地区超过6 hm~2的土地将种植200个卡文迪什香蕉的转基因品系,希望能培育出抗巴拿马TR4病菌的新品种。(本文来源于《中国果业信息》期刊2017年03期)

范术丽,王龙,庞朝友,魏恒玲,王寒涛[6](2017)在《高产、抗病转基因抗虫棉品种——中棉所94A915》一文中研究指出概述了中棉所94A915的选育经过、特征特性,并总结了其关键栽培技术。(本文来源于《中国棉花》期刊2017年01期)

陆英,蒲金基,喻群芳,谢艺贤,张贺[7](2016)在《转基因抗病棉花基因类型及原理研究进展》一文中研究指出评述了几丁质酶基因、β-1,3-葡聚糖酶基因、葡萄糖氧化酶基因和天麻抗真菌蛋白基因等抗病基因的抗病机理及其在转基因抗病棉花中的应用,并分析了抗病转基因棉花研究目前存在的问题,为进一步研究转基因抗病棉花提供方向。(本文来源于《农产品加工》期刊2016年22期)

刘明,李宝健,仇玉兰,裴秋玲,王景雪[8](2016)在《转基因抗病玉米饲喂Wistar大鼠食用安全性评价》一文中研究指出目的:利用不同剂量的转几丁质酶和β-1,3葡聚糖酶基因的转基因抗病玉米粉饲喂Wistar大鼠28d,之后继续用相同剂量未转基因的对照玉米饲喂1w。检测实验期和恢复期Wistar大鼠食用转基因玉米的食用安全性。方法:将Wistar大鼠按体重随机分为1个对照组和饲喂转基因玉米低、中、高剂量组等4个组,每组雌雄各半,经口28d摄入转基因玉米。饲喂期间对大鼠的一般生活状况、体重增长进行观察;大鼠饲喂期和停止饲喂后1w,统计其食物利用率;连续喂饲4w末和停止喂养后1w,对大鼠血清生化学指标进行检查,同时进行解剖学检查。结果:大鼠饲喂转基因玉米后,与对照组比较,一般生活状况无明显差异,无任何中毒症状出现,全部动物健康存活;与对照组同期同性别的大鼠相比,体重增长未见统计学差异(P>0.05);大鼠喂饲4w末和停止喂饲后1w食物利用率未见统计学差异(P>0.05);饲喂转基因玉米期间,大鼠血清谷草转氨酶(AST)/谷丙转氨酶(ALT)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)等指标与同期对照组比较未见显着差异(P>0.05);大体解剖肉眼观察,各脏器颜色形态未见异常,脏器系数未见异常。结论:实验周期内转几丁质酶和β-1,3葡聚糖酶的转基因抗病玉米对Wistar大鼠生长发育无明显不良影响,转几丁质酶和β-1,3葡聚糖酶的转基因抗病玉米及其亲本玉米对大鼠具有同等的食用安全性。(本文来源于《中国食物与营养》期刊2016年10期)

江戈龙[9](2016)在《F2代抗PCV2转基因猪的抗病力分析》一文中研究指出猪圆环病毒(Porcine Circovirus,PCV)在分类学上为圆环病毒科圆环病毒属,是迄今为止发现的最小动物病毒之一。它含有共价闭合的单股环状负链DNA,基因组大小约为1.76Kb。已知的PCV共有两个血清型,即PCV1和PCV2,PCV1为非致病性病毒;PCV2为多种猪常见疾病的病原,感染后导致机体免疫抑制,与其它病原体一起引起混合感染或继发感染,另外该病毒的感染具有持续性长的特点,使疾病长期存在难以根除,给养猪业造成极大的损失。目前对于该病毒的控制主要以注射PCV2疫苗和加强生产管理为主。随着分子生物学技术的发展,借助新的分子育种技术获得抗PCV2猪已成为可能。本实验室利用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)结合转基因技术成功培育出F0代抗PCV2转基因猪,并且在分子水平和细胞水平验证了其抗病性。本研究以F1代转基因公猪与野生型母猪杂交获得的F2代抗PCV2转基因猪为对象,分别从DNA水平、RNA水平及活体水平对其遗传表达稳定性、抗PCV2感染效果进行检测与分析,以获得安全、有效的抗PCV2转基因猪新品种。主要结果如下:(1)经生物荧光灯、PCR检测,出生的37头F2代猪中有26头转基因猪,阳性率达70.2%,外源基因能够稳定遗传。(2)si RNA在转基因猪体内能够表达,不同个体同一组织的si RNA表达量存在显着差异(P<0.01)。(3)利用PCV2加免疫刺激物的方式对仔猪攻毒可引起PMWS症状,血清病毒数较低时,转基因猪具有一定的抗病毒效果。(4)攻毒后,四组抗体水平都先下降后回升。A组(转基因直接感染组)和C组(转基因接触组)的回升速度分别快于B组(野生型直接感染组)和D组(野生型接触组),且在第56天C组抗体水平显着高于D组。(5)血常规结果显示,A组和B组、C组和D组各个时期各项血液指标都没有显着性差异(p>0.05)。该结果说明,转基因猪和野生型猪机体的新陈代谢和功能调节基本保持一致。(6)攻毒期间猪只各个时期的体重结果显示,转基因猪和野生型体重没有差异(p>0.05)。(7)攻毒后采集仔猪组织器官进行免疫组化实验的结果显示,转基因和野生型猪中PCV2蛋白的沉积没有差异。综上所述,所获得的转基因猪都能表达抑制PCV2的siRNA;活体攻毒后猪只血清抗体先下降后上升,血清病毒数较低时,转基因猪具有一定的抗病毒效果;血常规结果表明,外源基因的转入不影响猪只的新陈代谢和机体机能。(本文来源于《华南农业大学》期刊2016-06-01)

季世达[10](2016)在《棘孢木霉Hsp24基因转化山新杨培育抗病转基因株系》一文中研究指出杨树具有无性繁殖容易、生长速度快和生长周期短的特性,是重要的纤维用材,在全世界被广泛种植。然而许多生物及非生物因子对杨树的生长造成了严重的影响,减少了木材产量。而木霉作为优良的生防真菌,具有大量的防卫响应及抗病基因,如热激蛋白基因,其在木霉的生物防治机制中起到了十分重要的作用。本实验以棘孢木霉ACCC30536转录组测序数据为基础,克隆到了热激蛋白基因Hsp24的DNA序列,由于此基因无内含子,cDNA与DNA序列一致,GenBank接受号为KP337939,全长为657bp,编码218个氨基酸。生物信息学分析表明,热激蛋白Hsp24的分子量为24.3kDa,等电点是5.50,属于Hsp20家族。通过实时荧光定量方法,研究了棘孢木霉ACCC30536热激蛋白基因Hsp24在10种条件下的表达特性,结果显示,在碱、盐、干旱、高温和杨树叶枯病及烂皮病发酵液胁迫下,热激蛋白基因的表达量均上调,尤其在高温和杨树烂皮病胁迫下上调最高,分别为51.6和31.1倍。为了构建具备良好抗病性的山新杨转化子,通过农杆菌介导的方法将Hsp24基因整合到山新杨基因组上,并成功得到重组株系Pdpap-Hsp24s。RT-qPCR检测发现对照山新杨Pdpap-Con中无Hsp24基因表达,而山新杨转化子Pdpap-Hsp24s中Hsp24基因大量表达,证实Hsp24已经在转化子中成功的转录。转基因杨树病程相关蛋白基因PR表达检测发现转化子pROK2-Hsp24s中的大部分PR基因上调表达,尤其是转化子Pdpap-Hsp24-3中的PR-8被上调了215.93倍。在杨树烂皮病的胁迫下,杨树抗病信号传递相关基因的RT-qPCR发现Pdpap-Hsp24-3中的NPR1基因被上调了4.76倍,Pdpap-Hsp24-1中的JAR1和MYC2分别被上调了2.35和4.08倍。进而,NBT及EtBr叶片染色发现转化子Pdpap-Hsp24s与对照Pdpap-Con相比叶片的颜色更浅,表明转化子Pdpap-Hsp24s具有更强的抗杨树烂皮病的能力。POD及SOD酶活性检测发现Pdpap-Hsp24s与Pdpap-Con相比,POD及SOD酶活性更高,最高时分别达到37.7U和51.17U;用叶枯病侵染叶片后,发现Pdpap-Hsp24s和Pdpap-Con的叶片发病率分别为53%和81%,表明山新杨转化子Pdpap-Hsp24s具有更强的抗杨树叶枯病的能力。综上所述,棘孢木霉ACCC30536热激蛋白Hsp24基因在山新杨中的表达提高了转化子Pdpap-Hsp24s的抗病能力。本研究使人们更加深刻的了解了真菌热激蛋白能够在木本植物中成功表达,同时也提供了一种提高山新杨抗真菌病原菌能力的有效方法。(本文来源于《东北林业大学》期刊2016-04-01)

抗病转基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

人们通常服用药物清除难对付的细菌。如今,一种违反直觉的方法——将转基因细菌转变成药物——正越来越受到认可。若干公司正在测试工程菌能否治疗影响大脑、肝脏和其他器官的疾病,甚至杀死有害细菌。不过,尽管美国监管机构已经批准将若干种工程菌作为基因疗法进行

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

抗病转基因论文参考文献

[1].包婉莹,仲晓芳,杜茜,赵倩倩,杨向东.抗病转基因大豆事件B4J8049外源T-DNA整合位点分析及特异性检测[J].东北农业科学.2018

[2].宗华.转基因细菌变身抗病“斗士”[N].中国科学报.2018

[3].黄广平.CD28和4-1BB转基因猪的构建及其抗病功能研究[D].中国农业大学.2018

[4].李鹏,张琳,叶吉妮,贺诗瑶,贾军伟.抗病转基因水稻M12及其产品成分的定性、定量PCR检测方法[J].作物学报.2018

[5].柠檬水.澳大利亚:通过转基因香蕉寻找抗病品种[J].中国果业信息.2017

[6].范术丽,王龙,庞朝友,魏恒玲,王寒涛.高产、抗病转基因抗虫棉品种——中棉所94A915[J].中国棉花.2017

[7].陆英,蒲金基,喻群芳,谢艺贤,张贺.转基因抗病棉花基因类型及原理研究进展[J].农产品加工.2016

[8].刘明,李宝健,仇玉兰,裴秋玲,王景雪.转基因抗病玉米饲喂Wistar大鼠食用安全性评价[J].中国食物与营养.2016

[9].江戈龙.F2代抗PCV2转基因猪的抗病力分析[D].华南农业大学.2016

[10].季世达.棘孢木霉Hsp24基因转化山新杨培育抗病转基因株系[D].东北林业大学.2016

论文知识图

白粉菌发育的显微镜观察Fig.7Microscop...抗病转基因烟草植株中siRNA的检测...农业生物技术植物生物技术(3)农业生物技术植物生物技术(9)转基因烟草的抗病表型A,C感病对照B,...农业生物技术植物生物技术(5)

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