持续性激活的p38高度磷酸化介导底物出核的机制

论文摘要

p38信号通路是一条在进化上十分保守的应激反应通路,在众多生理和病理进程中起着重要的作用。p38在受到不同的刺激时,可以被短暂地或持续性地激活,取决于其受到的刺激的种类及环境。我们发现,p38在特定的情况下可以被持续性激活(本文中p38特指p38α)。然而,这种持续性激活的生理功能及意义是未知的。通过对一个近300个共转录因子组成的共转录因子库的筛选,我们首先确定了CRTC2是p38下游的一个底物,并通过磷酸化质谱鉴定到其多个磷酸化位点。持续性激活的p38可以高度磷酸化CRTC2,高度磷酸化导致CRTC2从细胞核内转移到细胞质中,因其核质定位的改变从而抑制了CRE介导的转录。有意思的是,CRTC2的出核依赖于多个磷酸化位点的累积磷酸化(大于或等于11个位点),而这11个位点是随机的,并不是固定的点。这种核质之间的转运与CRTC2的NES序列无关,并不通过CRM1而出核。与此同时我们的研究发现,这种高度的累积磷酸化改变核质定位同样适合于p38的另一个底物,转录因子Fos.Fos的出核依赖于CRM1蛋白。总而言之,我们的研究发现了持续激活的p38能够通过累积磷酸化底物从而改变其核质定位,并且负调控相关基因的转录这样一种新的机制。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
•   1.1 MAPK信号通路
•     1.1.1 丝裂原活化蛋白激酶家族
•     1.1.2 p38-MAPK信号通路
•   1.2 共转录因子
•     1.2.1 共转录因子
•     1.2.2 共转录因子的细胞定位对细胞内蛋白表达的影响
•   1.3 cAMP-CREB信号通路
•     1.3.1 CRTC2信号通路
•   1.4 核质运输
• 第二章 材料和方法
•   2.1 实验仪器
•   2.2 实验试剂
•     2.2.1 分子生物学试剂
•     2.2.2 细胞培养相关试剂
•     2.2.3 磷酸化质谱相关材料
•     2.2.4 蛋白抗体
•   2.3 分子生物学实验技术
•     2.3.1 核酸相关
•     2.3.2 细胞相关
•     2.3.3 蛋白质相关实验
•     2.3.4 磷酸化质谱相关实验
• 第三章 实验结果
•   3.1 p38存在不同的激活形式
•   3.2 持续性激活的p38调节特定的共转录因子的核质定位
•     3.2.1 持续性激活的p38能够影响部分转录因子的转录活性
•     3.2.2 持续性激活的p38能够影响共转录因子的定位
•     3.2.3 持续性激活的p38能够使CRTC2出核
•   3.3 CRTC2的出核抑制了CRE信号通路的转录
•   3.4 p38磷酸化了CRTC2的多个位点
•   3.5 CRTC2的出核不依赖于CRM1
•   3.6 持续性激活的p38可以高度磷酸化转录因子Fos并介导其出核
•     3.6.1 持续性激活的p38可以让Fos出核
•     3.6.2 Fos出核依赖于CRM1
•     3.6.3 Fos出核依赖于累积磷酸化
• 第四章 讨论
• 缩略语及中英文对照
• 参考文献
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 刘泽园

导师: 韩家淮

关键词: 持续性激活,信号通路,高度磷酸化

来源: 厦门大学

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 厦门大学

分类号: Q25

总页数: 65

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