导读:本文包含了原生质体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:质体,山丹,细胞系,平菇,正交,组合,酸枣。
原生质体论文文献综述
孔维丽,崔筱,刘芹,袁瑞奇,段亚魁[1]（2019）在《响应面法优化平菇单核原生质体的制备及再生技术》一文中研究指出为了提高平菇原生质体融合育种效率,本研究通过构建基于原生质体产量及单核原生质体再生率的响应面模型,优化平菇原生质体制备体系。以平菇菌株黑平16-1为试材,分别通过单因素试验考察菌丝菌龄(3～6 d)、酶液浓度(0.5%～2.0%)、酶解温度(28～34℃)和酶解时间(3～6 h)对原生质体制备及再生率的影响,并在单因素试验基础上,设计4因素3水平的响应面试验,建立各因素与响应值(原生质体产量和单核原生质体再生率)之间的数学模型,确定原生质体制备及单核原生质体再生的最佳提取工艺。结果表明,最佳提取工艺为菌龄4 d、酶液浓度1.51%、酶解温度28.3℃、酶解时间3.7 h,在此条件下平菇原生质体产量和单核原生质体再生率分别为(2.25±0.21)×107个·mL~(-1)和(6.80±0.42)%,与模型预测值接近(2.27×107个·mL~(-1)和6.83%),方程拟合度良好,该方法适用于对平菇原生质体的制备及单核原生质体再生条件的参数优化。(本文来源于《天津农业科学》期刊2019年12期）
王珺华,王凯琪,王凯,孙志宏,曹园[2]（2019）在《山丹原生质体的分离条件探究》一文中研究指出本研究旨在建立山丹高效原生质体分离体系,为山丹种质资源的有效利用提供科学依据。以山丹鳞茎胚性愈伤组织为材料,通过酶解法获得山丹原生质体,进一步采用3因素4水平L16(34)正交试验,对原生质体分离条件进行优化研究。结果表明:(1)在预处理条件下(0.015 g/mL纤维素酶+0.005 g/mL果胶酶+0.65 mol/L甘露醇)得出最佳酶解时间为6 h,产量为3.47×106个/g。(2)对正交试验结果进行极差分析,确定原生质体产量主次因素为纤维素酶浓度>果胶酶浓度>甘露醇浓度,同时得到最佳酶组合为0.02 g/mL纤维素酶、0.008 g/mL果胶酶,最佳渗透压浓度为0.6 mol/L甘露醇,原生质体产量最高为3.47×106个/g,活性为60.32%。(3)在最佳酶组合处理下,采用暗处理可将原生质体活性提高到76.15%;在15 min、1000 r/min时,原生质体产量最高,为3.51×106个/g;在10 min、800 r/min时,原生质体活性最高,为61.2%。试验获得了山丹原生质体最佳分离条件,建立原生质体分离体系,可为山丹种质资源的有效利用提供参考。(本文来源于《中国农学通报》期刊2019年34期）
陈越,王玲仙,付坚,陈玲,肖素勤[3]（2019）在《云南疣粒野生稻原生质体高效分离培养体系的建立》一文中研究指出【目的】为云南疣粒野生稻原生质体的培养、细胞融合、细胞再分化成植株奠定基础。【方法】测定不同酶解组合及浓度、酶解时间、渗透压稳定剂浓度下云南疣粒野生稻原生质体的产量和活力,同时筛选云南疣粒野生稻原生质体分离和培养的较优条件。【结果】优化后建立云南疣粒野生稻胚性悬浮细胞系的周期可缩短至45～60 d;在纤维素酶1.5%+果胶酶0.3%+甘露醇0.6 M+MES 5 mM+CaCl_(2 ) 5 mM条件下酶解2 h,云南疣粒野生稻原生质的产量为1.45×10~(6 )个/g·FW,活力达到90.17%,制备出的原生质体在固液培养下得到云南疣粒野生稻原生质体再生植株。【结论】建立了一套快速高效分离培养云南疣粒野生稻原生质体的体系,对研究重要植物资源、种质创新和发掘其优良基因具有重要意义。(本文来源于《西南农业学报》期刊2019年10期）
牛瑜菲,彭建营[4]（2019）在《酸枣花粉原生质体的分离条件研究》一文中研究指出旨在为酸枣倍性育种、细胞融合提供材料,为枣品种杂交培育、品种更新开辟新径。以酸枣四分体时期的花粉为材料,采用酶解法分离原生质体,血球计数器计算原生质体产量以及FDA测定原生质体的活力。试验结果表明,甘露醇作为渗透压调节剂,在1%蜗牛酶+0.5%纤维素酶的混合酶液中,静止酶解4 h,四分体时期的花粉原生质体分离率最高,达到4.8×105个/mL,且通过0.01%的FDA活力检测,四分体花粉原生质体的活力为21.1%;不同浓度的甘露醇影响花粉原生质体的分离,试验得出,在0.3 mol/L的甘露醇中,四分体时期的花粉原生质体分离率达到3.8×105个/mL,且活力为27.3%。四分体时期花粉原生质体的成功分离为后续叁倍体育种提供了材料,为酸枣花粉其他时期的原生质体分离提供了实践基础。(本文来源于《中国农学通报》期刊2019年32期）
康林芝,熊荣园,金磊,唐惠妍[5]（2019）在《金针菇与平菇远缘亲本原生质体融合研究》一文中研究指出以菌龄5 d的菌丝体为原料,采用1.5%溶壁酶和1.5%蜗牛酶酶液,酶解3 h,酶解温度为30℃,0.6 mol/L KCl为渗透压稳定剂,制备得到金针菇和平菇原生质体。两种原生质体融合后,25℃静置培养2 d随后涂布于再生培养基。以34℃菌丝培养温度作为标记筛选出融合子,融合的细胞在马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar,PDA)培养基中实现再生,通过菌丝形态、细胞学观察、拮抗性试验、出菇试验验证再生出的为融合子,最终从18个再生菌株中选择出1株耐34℃高温菌株可进行出菇试验,且融合菌株子实体粗壮、原基形成较多、菇形好的金针菇新品种,命名为F1P8。(本文来源于《食品研究与开发》期刊2019年19期）
潘旭耀,魏韬,谭柱豪,林龙镇,郭丽琼[6]（2019）在《芽孢杆菌种间原生质体融合选育高产Surfactin新菌株》一文中研究指出旨在获得纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌种间融合高产Surfactin的新菌株。以纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌为亲本菌株,通过制备纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌的原生质体,采用PEG介导的双亲灭活标记法融合原生质体,拟融合子通过PCR鉴定、CPC-BTB法高通量筛选、HPLC复筛以及融合菌株的稳定性验证获得高产Surfactin的新菌株。研究结果表明纳豆芽孢杆菌和暹罗芽孢杆菌的原生质体制备最佳酶解浓度分别为0.25 mg/mL和0.2 mg/mL,最佳酶解时间分别为25 min和20 min,其原生质体得率分别为83.1%和84.3%。两者的原生质体融合条件为:纳豆芽孢杆菌紫外灭活80 min,暹罗芽孢杆菌85℃热灭活40 min,融合体系为50%的PEG6000在38℃下融合时间15 min。获得了遗传稳定的融合菌株F8,该菌株Surfactin产量相对于纳豆芽杆菌提高了33.3%,暹罗芽孢杆菌提高了60%。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年08期）
谢鑫,蒋君梅,王勇,任明见[7]（2019）在《高粱原生质体的制备及转化方法研究》一文中研究指出以高粱幼苗为材料,利用1%的纤维素酶Cellulose R 10和0.75%的果胶酶Macerozyme R 10处理高粱幼茎,对比不同的酶解时间,发现酶解7 h原生质体浓度最高、质量最佳。以经过氯化铯密度梯度离心法获得的高纯度质粒对获得的原生质体进行转化,用激光共聚焦进行荧光观察,结果显示,GFP和YFP在全细胞表达。本研究首次建立了高粱以高粱幼茎为材料的原生质体制备及转化体系,其方法简单、高效,可以用于高粱基因功能研究。(本文来源于《种子》期刊2019年08期）
李素丽,刘芳君,李志刚,赖沛衡,龙安四[8]（2019）在《甘蔗原生质体RNA提取条件和方法的优化》一文中研究指出为了获得高产量和高纯度的甘蔗原生质体RNA,本研究以新台糖22号(ROC22)和桂糖28号(GT28)甘蔗原生质体为材料,探究了渗透压和原生质体活力对甘蔗原生质体RNA提取效果的影响,并比较了Trizol法、改良Trizol法、改良CTAB法、试剂盒法4种RNA提取方法。结果表明:原生质体渗透压与RNase活性呈显着正相关,原生质体活力与RNase活性呈极显着负相关;RNase活性越高,RNA提取效果越差;使用0.5mol/L的甘露醇作为渗透压调节剂可获取活力最高的甘蔗原生质体;原生质体活力为70%和90%时所提的RNA完整性好且纯度高,符合后续分子实验的需求,原生质体活力为90%时,RNA产量最高。因此,需要提取甘蔗原生质RNA时,至少需要保证原生质体的活力在70%以上,且原生质体活力越高,RNA的产量越高;采用改良Trizol法,可以大量制备能满足后续分子实验的完整性好且纯度高的RNA,利用该条件和方法,可以确保获得大量高质量的甘蔗原生质体RNA。本研究结果为甘蔗体细胞融合育种过程中的分子生物学研究提供了方法和技术支撑。(本文来源于《热带作物学报》期刊2019年08期）
王波[9]（2019）在《金针菇种内原生质体融合育种研究》一文中研究指出金针菇是我国主要栽培食用菌之一,年生产量247.92万吨,金针菇新品种的选育对促进我国金针菇产业发展具有重要意义。以白色金针菇菌株3W4和白色金针菇菌株FMY1203为亲本,利用双核体制备原生质体,将双亲原生质体分别进行热灭活(60℃,3min)和化学灭活(2%EMS)处理后,双亲原生质体等量混合离心后,加入融合剂(40%PEG,0.05mol/L CaCl2)进行融合处理,然后将融合子涂布在再生培养基上,在25℃下培养,取单菌落转接在PDA培养基上培养,获得再生菌株84个,经菌丝形态观察,融合子菌丝无锁状联合,为单核体;拮抗试验表明融合子与亲本具有拮抗;ISSR分子标记分析表明融合子与亲本双核体和单核原生质体间存在明显差异;经栽培出菇试验,融合子均能出菇,形成的子实体分为黄色和白色两类,对其进行组织分离培养,组织分离培养的菌株菌丝具有锁状联合,为双核体;通过系统筛选试验,筛选出1个高产优质黄色金针菇品种—川金54,该品种适宜工厂化袋栽,已大面积应用于生产。(本文来源于《多彩菌物 美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会论文摘要》期刊2019-08-03）
闫思远,顾沛雯[10]（2019）在《PEG介导枸杞内生真菌NQG8Ⅱ4菌株原生质体转化》一文中研究指出为建立PEG介导的枸杞内生真菌NQG8Ⅱ4 (Fusarium nematophilum)的遗传转化体系。以NQG8Ⅱ4的幼嫩菌丝为材料,通过PEG介导的原生质体转化法,将含有潮霉素标记的质粒PDL2转入NQG8Ⅱ4的原生质体中;对获得的转化子进行PCR检测。试验获得NQG8Ⅱ4的最优原生质体制备条件为:菌龄16 h的菌丝0.05 g于含有3%崩溃酶+1%溶壁酶的混合酶液中反应2.5 h;整个试验的渗透压稳定剂为0.7 mol/L NaCl,原生质体获得量达到最大为6.70×10~7个/mL。试验共获得57个转化子,转化效率为2.85个/μg。对转化子进行PCR检测,表明外源的hph基因已经整合到NQG8Ⅱ4的基因组中。本试验成功建立了稳定的PEG介导的NQG8Ⅱ4菌株遗传转化体系,可用于研究菌株NQG8Ⅱ4在枸杞中的侵染定殖以及对枸杞促生抗病机理。(本文来源于《中国植物病理学会2019年学术年会论文集》期刊2019-07-20）
原生质体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究旨在建立山丹高效原生质体分离体系,为山丹种质资源的有效利用提供科学依据。以山丹鳞茎胚性愈伤组织为材料,通过酶解法获得山丹原生质体,进一步采用3因素4水平L16(34)正交试验,对原生质体分离条件进行优化研究。结果表明:(1)在预处理条件下(0.015 g/mL纤维素酶+0.005 g/mL果胶酶+0.65 mol/L甘露醇)得出最佳酶解时间为6 h,产量为3.47×106个/g。(2)对正交试验结果进行极差分析,确定原生质体产量主次因素为纤维素酶浓度>果胶酶浓度>甘露醇浓度,同时得到最佳酶组合为0.02 g/mL纤维素酶、0.008 g/mL果胶酶,最佳渗透压浓度为0.6 mol/L甘露醇,原生质体产量最高为3.47×106个/g,活性为60.32%。(3)在最佳酶组合处理下,采用暗处理可将原生质体活性提高到76.15%;在15 min、1000 r/min时,原生质体产量最高,为3.51×106个/g;在10 min、800 r/min时,原生质体活性最高,为61.2%。试验获得了山丹原生质体最佳分离条件,建立原生质体分离体系,可为山丹种质资源的有效利用提供参考。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
原生质体论文参考文献
[1].孔维丽,崔筱,刘芹,袁瑞奇,段亚魁.响应面法优化平菇单核原生质体的制备及再生技术[J].天津农业科学.2019
[2].王珺华,王凯琪,王凯,孙志宏,曹园.山丹原生质体的分离条件探究[J].中国农学通报.2019
[3].陈越,王玲仙,付坚,陈玲,肖素勤.云南疣粒野生稻原生质体高效分离培养体系的建立[J].西南农业学报.2019
[4].牛瑜菲,彭建营.酸枣花粉原生质体的分离条件研究[J].中国农学通报.2019
[5].康林芝,熊荣园,金磊,唐惠妍.金针菇与平菇远缘亲本原生质体融合研究[J].食品研究与开发.2019
[6].潘旭耀,魏韬,谭柱豪,林龙镇,郭丽琼.芽孢杆菌种间原生质体融合选育高产Surfactin新菌株[J].生物技术通报.2019
[7].谢鑫,蒋君梅,王勇,任明见.高粱原生质体的制备及转化方法研究[J].种子.2019
[8].李素丽,刘芳君,李志刚,赖沛衡,龙安四.甘蔗原生质体RNA提取条件和方法的优化[J].热带作物学报.2019
[9].王波.金针菇种内原生质体融合育种研究[C].多彩菌物美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会论文摘要.2019
[10].闫思远,顾沛雯.PEG介导枸杞内生真菌NQG8Ⅱ4菌株原生质体转化[C].中国植物病理学会2019年学术年会论文集.2019
论文知识图
