红花檵木LcCHI基因的克隆、表达分析及转化研究

论文摘要

从红花檵木（Loropetalum chinense var.rubrum）叶片中克隆获得查尔酮异构酶（Chalcone isomerase,CHI）同源基因,命名为LcCHI。LcCHI基因的开放阅读框长度为657 bp,编码218个氨基酸。氨基酸序列同源性比对结果表明,红花檵木LcCHI与包括玫瑰（Rosa rugosa）、月季（Rosa chinensis）在内的多种植物CHI的氨基酸序列同源性很高,氨基酸一致性均在75%以上。CHI负责酶催化活性的5个氨基酸残基位点也在不同植物的CHI氨基酸序列中高度保守。LcCHI蛋白的三级结构主要由8个α-螺旋和11个β-折叠片层形成的球状蛋白,其催化核心区域具有两个硝酸根配基结合位点。实时荧光定量PCR结果表明,LcCHI在不同组织中均有表达,其中在根中表达量最高,而成熟叶中表达量最低。成功构建了pLcCHI-SUPER1300过表达载体,在拟南芥中异源表达并获得了LcCHI基因过表达的转基因株系,为进一步分析LcCHI基因功能创造条件。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•     1.1.1 植物材料
•     1.1.2 主要试剂
•   1.2 试验方法
•     1.2.1 总RNA提取及cDNA第1链的合成
•     1.2.2 红花檵木LcCHI基因的克隆
•     1.2.3 红花檵木LcCHI氨基酸同源性分析及功能预测
•     1.2.4 红花檵木LcCHI基因的表达特性分析
•     1.2.5 红花檵木LcCHI过表达载体构建及转化拟南芥
• 2 结果和分析
•   2.1 红花檵木LcCHI基因cDNA序列的克隆
•   2.2 红花檵木LcCHI基因编码的氨基酸序列分析
•     2.2.1 LcCHI多重比对及保守结构域
•     2.2.2 LcCHI系统进化树分析
•     2.2.3 LcCHI三级结构预测
•   2.3 LcCHI基因在不同组织中的表达分析
•   2.4 LcCHI过表达载体构建及转化拟南芥
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 荣朵艳,张翔,虢雅洁,王菊凤,潘婷,杨港,张邦跃

关键词: 红花檵木,查尔酮异构酶,表达分析,遗传转化

来源: 西北农业学报 2019年11期

年度: 2019

分类: 农业科技

专业: 园艺

单位: 湖南工业大学生命科学与化学学院,生物医用纳米材料与器件湖南省重点实验室

基金: 湖南省科技厅基金(2016NK2097),湖南省教育厅基金(16C0489),株洲市科技局科学计划(株科发[2017]68号)~~

分类号: S685.99

页码: 1879-1887

总页数: 9

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