兔骨髓间充质干细胞体外诱导血管内皮细胞

论文摘要

目的:探讨兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）体外诱导为血管内皮细胞（VECs）的方法,为心血管疾病的血管重建提供治疗策略。方法:抽取兔骨髓,采用全骨髓贴壁法加内皮细胞培养液诱导培养细胞,记录并观察诱导后细胞的形态及生长过程,并进行荧光标记;采用免疫细胞化学显色法鉴定诱导后细胞表面标志物CD31、CD34,利用支架材料Matrigel基质胶观察VECs三维血管化形态。结果:兔BMSCs经诱导后48 h,呈小圆形,可见贴壁生长;3～4d可见少量细胞贴壁,多为短梭形;6～8d完全贴壁,多为长梭形、锥形、不规则形;10～12d后细胞呈集落样生长;第15天成片生长的细胞集落相互连接,呈现典型的"鹅卵石样"或"铺路石样"外观;CM-DiI细胞荧光标记显示VECs的胞质、胞膜呈现红色荧光,DAPI细胞荧光标记显示VECs胞核呈蓝色荧光,细胞形态为长梭形,且细胞生长状况良好;免疫细胞化学显色显示CD31、CD34均呈阳性;在Matrigel基质胶上VECs呈现典型的环状或管状。结论:以全骨髓贴壁法和经内皮细胞培养液诱导法可获得VECs。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 实验动物与试剂
•   1.2 VECs的分离培养、诱导及扩增
•   1.3 VECs生长曲线的绘制和存活率的测定 （台盼蓝染色法）
•   1.4 VECs荧光标记
•   1.5 免疫细胞组织化学检测VECs表面标志
•   1.6 VECs三维血管化
•   1.7 细胞-支架材料复合体冰冻切片
• 2 结果
•   2.1 VECs形态学
•   2.2 VECs的生长曲线
•   2.3 VECs表面标志物CD31、CD34检测
•   2.4 VECs三维血管结构
•   2.5 细胞-支架材料复合体冰冻切片
• 2讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 常青,程燕,高静媛,梁芳倩,于晓龙

关键词: 骨髓间充质干细胞,血管内皮细胞,诱导

来源: 解剖学杂志 2019年02期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,心血管系统疾病,生物医学工程

单位: 华北理工大学附属医院老年病科

基金: 河北省优秀人才基金[冀财社(2017)46]

分类号: R318;R54

页码: 138-141+204

总页数: 5

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