导读:本文包含了细胞侵袭模型论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,鼻咽,干细胞,模型,组织,神经元,工程。
细胞侵袭模型论文文献综述
王春玲,张荣芳,陈峰杰,周露,姬颖华[1]（2019）在《miR-509靶向Rac1调节人肝癌LM3细胞侵袭和迁移及裸鼠模型的存活》一文中研究指出目的:探究微小RNA-509(miR-509)对人肝癌细胞生长、侵袭、迁移及荷瘤裸鼠存活的作用及其作用机制。方法:将miR-509模拟物(miR-509 mimic)和pcDNA Ras相关的C3肉毒毒素底物1(pcDNA Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1, pcRac1)转染人肝癌LM3细胞,Western blot检测Rac1的表达;萤光素酶报告基因实验证明miR-509和Rac1的靶向关系;Transwell实验检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;采用皮下注射LM3细胞的方法建立肝癌裸鼠移植瘤模型,检测裸鼠存活率,Western blot检测肿瘤组织Rac1的表达。结果:miR-509 mimic能明显抑制LM3细胞Rac1的表达(P<0.05),pcRac1能明显减弱miR-509 mimic对Rac1表达的抑制作用(P<0.05);miR-509 mimic还能显着减弱Rac1野生质粒的萤光素酶活性(P<0.05);同时,miR-509 mimic可减少侵袭细胞数,抑制肝癌细胞迁移(P<0.05)。此外,miR-509过表达还能升高肝癌移植瘤模型小鼠存活率(P<0.05),降低肿瘤组织Rac1的蛋白表达水平(P<0.01)。结论:miR-509能通过靶向抑制Rac1的表达而抑制肝癌细胞侵袭和迁移,并促进肝癌模型小鼠存活。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2019年05期）
李海琳[2]（2019）在《1.巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭和转移的实验研究 2.临床病理特征与免疫基因特征相结合的预测模型评价叁阴性乳腺癌预后的回顾性研究》一文中研究指出背景:乳腺癌已经成为危害中国女性健康的第一大癌症,也是目前医疗卫生研究的重点。虽然目前乳腺癌临床上治疗方法较多(如手术治疗、放疗和化疗等),但是依然没有完全攻克这类癌症。因此,寻找新的更有效的治疗途径也是目前最为迫切的任务之一。随着我国近年对中医药学研究的不断深入,中药治疗肿瘤的潜力被逐渐发掘。胡椒碱便是其中一种比较有潜力的抗肿瘤药物。胡椒碱是存在于黑胡椒中最主要的生物碱,具有抑制肿瘤细胞生长和转移的作用。但已有的药代动力学研究表明,胡椒碱的生物利用度较低,而且直接服用副作用较多。因此,如何合理利用和提高胡椒碱的抗肿瘤效应是目前亟待解决的问题。纳米载药系统是目前应用很广的一种药物递送系统,它的应用与发展可提高抗肿瘤药物的有效性。近年来,纳米技术在传统中医药领域应用逐渐深入,进一步推进中药的发展及在临床上的应用。其中纳米靶向给药系统是目前纳米技术领域研究热点。目的:探讨巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体对乳腺癌细胞增殖、转移及侵袭的影响。方法:1.巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体的制备及表征鉴定首先以卵磷脂、胆固醇为膜材料,采用薄膜分散法制作胡椒碱脂质体(PL),然后从RAW 264.7巨噬细胞中分离并纯化细胞膜,最后通过过滤增压使细胞膜和胡椒碱脂质体混合而形成巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体(MPL)。利用透射电镜、扫描电镜、傅里叶红外分光光度计,紫外分光光度计等方法对MPL的结构特征、粒径分布、Zeta电位载药量、包封率等表征指标进行测定。2.巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体在体外抑制乳腺癌细胞用香豆素-6标记PL和MPL,检测两者的细胞摄取能力。细胞实验分成5组:对照组(Control组)、胡椒碱组(Pipe组)、胡椒碱脂质体组(PL组)、巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体组(MPL组)、巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体加游离巨噬细胞膜组(MPL+Mem组)。分别采用结晶紫实验、划痕实验、Transwell实验来检测MPL对乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移的抑制作用。3.巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体在体内抑制乳腺癌细胞建立4T1荷瘤BALB/c小鼠模型,随机将小鼠分为4组:空白对照组(Control组)、阳性对照组(Docetaxel组)、胡椒碱脂质体组(PL组)和巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体组(MPL组)。造模2周后,阳性对照组按照100 mg/kg的剂量配制多西他赛生理盐水溶液(50 mg/mL),MPL组给予相应剂量的MPL生理盐水溶液(50 mg/mL),PL组给予相应剂量的PL生理盐水溶液(50 mg/mL),空白对照组则是给予等量的生理盐水,每3天给药1次。观察小鼠一般情况,测定小鼠体重及肿瘤体积。造模四周后将小鼠处死,测量原位瘤的最终直径并称重;肺组织HE染色观察病理学变化。结果:1.制备的MPL为球形纳米颗粒,其分布均匀,平均粒径为148.2 nm,电位为19.7±6.39 mV,包封率为97.4%,载药量为16.54%。2.在体外实验中,MPL的细胞摄取能力高于PL的细胞摄取能力,且MPL有效提高了胡椒碱单体药及胡椒碱脂质体(PL)抑制肿瘤细胞增殖、侵袭和转移的能力。3.在体内实验中,MPL在小鼠体内是无毒安全的,且有很好的抑制乳腺癌生长及降低肺转移率的作用。结论:本研究制备的巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体在体外及体内均抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移。目的:越来越多的证据表明,叁阴性乳腺癌(Triple negative breast cancer,TNBC)比其他亚型乳腺癌能激发更强的免疫反应。我们假设,将免疫相关的基因组特征与临床病理因素相结合,可能会有比现存系统更高的预测准确性。方法:利用生物信息学方法鉴定并重新分析了反映TNBC特异性免疫原性或免疫微环境特性的10个特征。然后,将临床TNBC(n=711)与预测患者无病生存率(DFS)和总生存期(OS)的相应表达谱结合,评价其预后价值,并建立临床病理-基因组预测列线图。分别从10个免疫特征中筛选出3个和2个免疫特征,通过多变量后逐步Cox回归分析,构建DFS和OS预测的预测性列线图。结果:通过上述免疫表达特点与预后的临床病理特征相结合,构建临床病理基因组列线图,显示了合理的预测准确性(DFS:HR,1.79;95%CI,1.46-2.18,P<0.001;AUC,0.71;OS:HR,1.96;95%CI,1.54-2.49;P<0.001;AUC,0.73)。列线图显示,低危亚组的免疫检查点分子(PD-L1,PD-1,CTLA-4,LAG-3)表达水平较高,放疗(HR,0.2,95%CI,0.05-0.89;P=0.034)优于化疗(HR,1.26,95%CI,0.66-2.43;P=0.485)。结论:这些研究结果证明免疫相关基因组数据为TNBC提供了独立和互补的预后信息,且该列线图可能是一种实用的预测工具,可以用于确定从化疗、放疗和即将推广的免疫治疗中受益的TNBC患者。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
黎运呈,曾芳,丁贤君,李世波[3]（2018）在《高、低侵袭性肝癌干细胞模型的建立及生物学特性鉴定》一文中研究指出目的:采用人肝癌细胞HCCLM3建立高、低侵袭性肝癌干细胞(H/L-ILCSCs)模型,并与HCCLM3和正常肝细胞HL-7702相比较鉴定其生物学特性。方法:(1)利用Transwell小室迁移实验分离获得高、低迁移性HCCLM3细胞,再采用Transwell小室侵袭实验进一步分离获得高、低侵袭性HCCLM3细胞。(2)采用免疫磁珠分选法以CD133~+为分子标志分离高、低侵袭性HCCLM3细胞,获得H/L-ILCSCs。(3)检测H/L-ILCSCs、HCCLM3细胞和正常肝细胞HL-7702干细胞表面标志分子CD133~+、CD90~+、CD44~+的表达。(4)采用CCK-8法、Transwell侵袭、平板克隆形成及免疫缺陷动物成瘤实验,检测H-ILCSCs、L-ILCSCs、HCCLM3及HL-7702的生长增殖、体外侵袭、干细胞球形成及体内裸鼠成瘤能力。结果:表面标志分子CD133~+、CD90~+、CD44~+在H-ILCSCs中高表达,而L-ILCSCs中CD133~+高表达,CD90~+和CD44~+低表达。L-ILCSCs、HCCLM3和HL-7702细胞的生长增殖、体外侵袭、平板克隆形成及体内成瘤能力均低于H-ILCSCs。L-ILCSCs细胞的生长增殖和体外侵袭能力均低于HCCLM3细胞。此外,L-ILCSCs不能形成克隆球和移植瘤。结论:从正常人肝癌细胞HCCLM3中可以分离和富集H/L-ILCSCs,且二者生物学特性存在差别。(本文来源于《温州医科大学学报》期刊2018年08期）
颜宇,李爽乐[4]（2017）在《丝裂霉素联合Nd-YAG激光对阻塞性泪道模型中细胞增殖、侵袭及MEK/ERK信号通路的影响》一文中研究指出目的:研究丝裂霉素(MMC)联合Nd-YAG激光对阻塞性泪道模型中细胞增殖、侵袭及MEK/ERK信号通路的影响。方法:选择新西兰家兔作为实验动物并分为模型组、激光组、MMC+激光组;建立阻塞性泪道模型后激光组给予Nd-YAG激光干预、MMC+激光组给予Nd-YAG激光联合丝裂霉素干预。干预后2个月,测定泪道组织中增殖分子、侵袭分子、MEK-ERK信号分子的表达量。结果:激光组动物泪道组织中TGF-β、CTGF、PCNA、Ki-67、Col-I、Col-III、MEK、ERK1/2、MMP2、MMP9的蛋白含量均显着高于模型组,TSG-6、Cthrc1、TIMP1的蛋白含量均显着低于模型组;MMC+激光组动物泪道组织中TGF-β、CTGF、PCNA、Ki-67、Col-I、Col-III、MEK、ERK1/2、MMP2、MMP9的蛋白含量均显着低于激光组,TSG-6、Cthrc1、TIMP1的蛋白含量均显着高于激光组。结论:丝裂霉素能够抑制阻塞性泪道模型Nd-YAG激光治疗后的细胞增殖、侵袭及MEK/ERK信号通路激活。(本文来源于《海南医学院学报》期刊2017年21期）
李超[5]（2016）在《人脂肪间充质干细胞外泌体对毒邪侵袭PC12细胞模型的修复作用及机制的研究》一文中研究指出目的:观察人脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,AMSC)来源的外泌体(exosomes)是否对毒邪侵袭(谷氨酸兴奋毒损伤)的PC12细胞模型具有保护作用和修复作用,并讨论其可能的机制,为AMSCs来源外泌体的进一步探索提供理论依据和实验基础。方法:本实验主要分两部分进行:第一部分首先大量培养人脂肪间充干细胞,传代至第叁代后收集其不含血清的条件培养基,通过超速离心法去除细胞碎片和杂质,得到人脂肪间充质干细胞来源的外泌体,采用透射电镜技术观察所得外泌体的形态特征进行鉴定,采用BCA试剂盒初测外泌体浓度备用;建立毒邪侵袭PC12细胞模型,参考本实验室既往研究结果,采用不同浓度外泌体作用于该细胞模型,共孵育不同时间,通过台盼蓝染色和LDH检测对比不同浓度外泌体在不同共孵育时间下对损伤细胞的作用,确定最适宜的外泌体浓度和作用时间。在本实验第二部分中,通过酶消化法分离培养新生SD大鼠大脑皮质神经元并通过MAP2免疫荧光染色法对神经元进行鉴定;大量收集PC12细胞和神经元的条件培养基,通过超速离心法提取PC12细胞来源和神经元来源的外泌体;建立毒邪侵袭PC12细胞模型和神经元模型,按照第一部分结果加入AMSCs外泌体作用于损伤细胞,通过LDH和MTT观察其作用效果,同时通过NAD+/NADH检测和Lc3II/I抗体检测来探索AMSCs外泌体作用于PC12细胞的可能作用机制。结果:经过原代提取和传代培养,可以获得人脂肪间充质干细胞,从其条件培养基中通过超速离心法得到了30-100nm的微囊泡结构,透射电镜检测证明所得微囊泡即外泌体。采用谷氨酸和甘氨酸混合损伤PC12细胞,镜下可见细胞皱缩变圆,贴壁能力变差,LDH检测和台盼蓝染色提示细胞受损,在谷氨酸浓度为40μmol/l时细胞损伤率接近50%,向损伤PC12细胞模型中加入不同浓度的外泌体,结果显示最佳治疗浓度为40ng/μl,最佳孵育时间为12h。原代培养SD大鼠皮质神经元,细胞生长状态良好,能够正常生长至12天左右,培养第9天通过MAP2免疫荧光检测并拍照,可见细胞生长良好,神经纤维丰富。不同浓度谷氨酸加入神经元中,LDH检测确定最适谷氨酸浓度,建立毒邪侵袭神经元模型,并采用第一部分所得条件,将人脂肪间充质干细胞来源的外泌体作用于损伤的神经元细胞,检测MTT和LDH释放率均无显着变化。通过NAD+/NADH检测PC12细胞模型的能量代谢变化,结果提示人脂肪间充质干细胞外泌体对PC12细胞的能量代谢并无显着影响。通过免疫印记实验(Western Blot)检测各组PC12细胞Lc3II/I的表达,证明外泌体可以通过增强PC12细胞自噬来保护受损细胞。结论:人脂肪间充质干细胞来源的外泌体可以有效降低毒邪侵袭(谷氨酸兴奋毒损伤)PC12细胞模型的LDH释放率,对PC12细胞具有保护作用;人脂肪间充质干细胞来源的外泌体对谷氨酸损伤的神经元模型无显着效果;人脂肪间充质干细胞外泌体对PC12细胞的保护作用与能量代谢无显着关联,与自噬作用有关。(本文来源于《大连医科大学》期刊2016-05-01）
方石峰[6]（2016）在《microRNA-126通过IRS-1调控糖尿病模型鼠视网膜毛细血管内皮细胞周细胞PI3K/AKT/VEGF通路并抑制细胞增殖及侵袭作用的研究》一文中研究指出背景:糖尿病视网膜病变是糖尿病最常见且最严重的并发症之一,也是成年人失明的重要原因之一,随着人们生活水平的提高,及胰岛素替代治疗的广泛应用,其发病率逐年增高。糖尿病视网膜病变分为非增殖型病变和增殖型病变两种,后者以新生血管形成为主要病理特点,易导致玻璃体出血、增殖性视网膜脱离等严重并发症,是造成严重视功能损害的主要原因。新生血管的生长受血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的调节,新生血管生成过程中的关键环节是内皮细胞的增殖和迁移。VEGF是一种血管内皮细胞特异性的分裂原,能诱导血管内皮细胞增殖、促进新生血管形成。在糖尿病视网膜病变患者眼内VEGF含量明显上调,且其上调程度与视网膜血管出血、渗出等病理过程相关。VEGF的过度表达为糖尿病视网膜病变发生的重要机制之一。因此,抑制VEGF的表达成为临床上糖尿病视网膜病变治疗的重要思路。微小核糖核酸(MicroRNA,miRNAs)是近年来在真核生物中发现的一类内源性的并具有调控功能的非编码RNA,miRNAs可通过序列特异性的方式与特定靶基因的3’UTR相互作用从而调节靶基因的蛋白表达。miRNAs的功能十分广泛,具有高度的保守性、时序性和组织特异性,对细胞的增殖、凋亡、分化、生长发育、胰岛素分泌、肿瘤发生、器官形成、造血过程、病毒等微生物感染防御等均具有非常重要的调节作用。研究表明,某些miRNA具有调节新生血管形成的作用,其中miR-126是目前报道的与血管内皮细胞及血管功能密切相关的一种miRNA,也是体内对维持血管内皮细胞和血管完整性至关重要的一种血管生成信号调节因子。据报道,mir-126可负性调控vegf等血管生长因子,并抑制新生血管的生成。在多种肿瘤细胞中,mir-126的表达均较正常细胞降低,因此mir-126曾被视为一种抑制细胞生长的因素,且作用于胰岛素受体底物-1(insulinreceptorsubstrate-1,irs-1)。irs-1在胰岛素的信号转导及糖尿病的发生发展中起着至关重要的作用。有报道视网膜表达大量的irs-1和pi3k,且胰岛素通过irs-1/pi3k/akt通路和ras/mapk通路可诱导小鼠主动脉平滑肌细胞内vegfmrna的转录和vegf的表达。胰岛素对血管内皮细胞vegf表达的上调可能是通过激活pi3k/akt通路实现的,且据kegg通路数据库的预测,vegf位于irs-1/pi3k/akt通路的下游。因此,在糖尿病视网膜病变中,mir-126很可能作用于irs-1且通过irs-1/pi3k/akt通路参与视网膜新生血管形成过程的调节。目的:检测mir-126及irs-1在糖尿病模型大鼠的视网膜血管内皮细胞(endothelialcells,ec)和周细胞(retinalpericytes,rp)中的表达水平,寻找并证实irs-1为mir-126的靶基因。探讨过表达或抑制mir-126对糖尿病模型鼠的ec细胞和rp细胞中irs-1及vegf、pi3k、akt等通路蛋白表达水平的影响;探讨过表达或抑制mir-126对糖尿病模型鼠的ec细胞和rp细胞增殖及侵袭能力的影响。验证mir-126对糖尿病模型鼠ec细胞和rp细胞中irs-1及vegf、pi3k、akt等蛋白表达水平的抑制作用以及对ec细胞和rp细胞增殖及侵袭能力的抑制作用是否是通过调控irs-1的表达而实现的。为mir-126成为一种潜在的以irs-1为靶点治疗糖尿病视网膜病变的新药提供理论依据。方法:通过real-timepcr检测mir-126及irs-1在糖尿病模型鼠ec细胞和rp细胞中的mrna表达水平。通过westernblot检测irs-1的蛋白表达水平。通过向糖尿病模型鼠ec细胞和rp细胞中转染人工合成的mir-126类似物或mir-126抑制剂来过表达mir-126或抑制内源性mir-126的表达,并通过real-timepcr检测转染后细胞中mir-126的mrna水平,以验证mir-126类似物及mir-126抑制剂调节细胞中mir-126表达水平的有效性和效率。用生物信息学检索软件targetscan分析预测mir-126的靶基因。采用双荧光素酶报告基因检测系统检测mir-126对irs-1的调控作用。先将含有预测的mir-126结合位点的irs-1基因3’utrdna片段克隆入pgl-3-promotor质粒中,构建报告基因质粒。然后将含有野生型或突变型irs-13’utr的荧光素酶报告载体质粒(pmir-report-irs-1wt和pmir-report-irs-1mut)与mir-126类似物或其对照共转染ec细胞。转染48小时后,检测各组细胞的荧光素酶活性。同时用westernblot的方法检测转染了mir-126类似物或mir-126抑制剂后,糖尿病模型鼠ec细胞及rp细胞中irs-1的蛋白表达水平。用mtt法检测转染了mir-126类似物或mir-126抑制剂后,糖尿病模型鼠ec细胞及rp细胞的增殖率。用transwell小室检测转染了mir-126类似物或mir-126抑制剂后,糖尿病模型鼠ec细胞及rp细胞的侵袭能力。通过westernblot的方法检测过表达或抑制mir-126表达时,糖尿病模型鼠ec细胞中pi3k/akt通路相关分子pi3k、akt以及vegf的蛋白表达水平。最后通过sirna干扰糖尿病模型鼠ec细胞的irs-1基因表达,并用westernblot的方法检测irs-1基因沉默状态下,抑制mir-126内源性表达后,视网膜ec细胞中pi3k、akt以及vegf等蛋白的表达水平,并分别用mtt法和transwell侵袭实验检测上述条件下糖尿病模型鼠ec细胞和rp细胞的增殖和侵袭能力。结果:real-timepcr的检测结果显示糖尿病模型鼠的ec细胞和rp细胞中mir-126表达水平较正常对照降低。转染mir-126类似物或mir-126抑制剂可有效地在糖尿病模型鼠ec细胞和rp细胞中过表达mir-126或抑制其内源性mir-126的表达水平。生物信息学预测irs-1基因为糖尿病模型ec细胞和rp细胞中mir-126的靶基因。在糖尿病模型鼠的ec细胞和rp细胞中,irs-1的mrna及蛋白表达水平均较正常对照升高。通过共转染mir-126类似物或抑制剂与含有irs-13’utr的荧光素酶报告载体并采用双荧光素酶报告基因检测,以及通过转染mir-126类似物或抑制物来过表达或抑制mir-126表达,westernblot的方法检测irs-1的蛋白表达水平,发现过表达mir-126可显着下调irs-1的表达水平,而抑制mir-126的表达可上调irs-1的表达水平。ec细胞和rp细胞分别转染了mir-126类似物或mir-126抑制剂及其对照后,用mtt的方法检测了细胞的增殖率,结果显示,过表达mir-126使ec细胞和rp细胞的增殖率较对照组降低,而抑制mir-126则使ec细胞和rp细胞的增殖率较对照组增加,提示mir-126可抑制糖尿病模型鼠ec细胞和rp细胞的增殖能力。同时,transwell侵袭实验检测转染后ec细胞和rp细胞的侵袭能力,结果显示,通过mir-126类似物转染过表达mir-126,使侵袭细胞的数量较对照组显着减少,而经miR-126抑制剂转染抑制miR-126内源性表达后,侵袭细胞的数量较对照组显着增多,提示miR-126可抑制糖尿病模型鼠EC细胞和RP细胞的侵袭能力。进而,通过Western blot的方法检测了通过转染miR-126类似物或miR-126抑制剂过表达或抑制miR-126表达后,PI3K/AKT通路相关分子PI3K、AKT以及VEGF的蛋白表达水平。结果显示,过表达miR-126可显着下调PI3K,AKT以及VEGF蛋白的表达,而抑制miR-126则可显着上调PI3K,AKT以及VEGF蛋白的表达。为了证实miR-126对PI3K、AKT及VEGF等PI3K/AKT通路蛋白表达水平的调节及对视网膜EC细胞和RP细胞增殖及侵袭能力的抑制作用是通过调控IRS-1基因而实现的,用siRNA干扰IRS-1的表达,将IRS-1-siRNA与miR-126抑制剂或其对照共转染糖尿病模型鼠EC细胞,并用Western blot的方法检测共转染后细胞的PI3K、AKT及VEGF等蛋白表达水平,用MTT法及Transwell侵袭实验分别检测共转染后细胞的增殖能力和侵袭能力。结果表明,IRS-1被干扰后,miR-126抑制剂对糖尿病模型鼠EC细胞的PI3K、AKT及VEGF等蛋白表达水平以及对视网膜EC细胞增殖能力和侵袭能力的作用均被削弱。结论:本课题发现了miR-126在糖尿病模型鼠视网膜毛细血管EC细胞和RP细胞中表达下降。miR-126在糖尿病模型鼠EC细胞和RP细胞中的靶基因为IRS-1。过表达miR-126可通过下调其靶基因IRS-1的表达水平而下调VEGF、PI3K、AKT等通路蛋白的表达水平,且抑制视网膜EC细胞和RP细胞的增殖能力及侵袭能力。通过siRNA干扰IRS-1的表达,可抵消miR-126抑制剂对上述通路蛋白表达的EC细胞增殖及侵袭能力的作用。我们的结果表明,IRS-1是miR-126的靶基因,miR-126通过调控IRS-1参与糖尿病视网膜病变的病理生理过程。本研究的结果有助于我们进一步理解糖尿病视网膜病变的发病机制,为miR-126成为治疗糖尿病视网膜病变的一种潜在的新药提供了理论依据。(本文来源于《大连医科大学》期刊2016-02-01）
王一凡,许永涛[7]（2015）在《构建瘤细胞模型:NS-398对低氧状态下MG-63细胞侵袭能力的影响》一文中研究指出背景:研究表明缺氧环境中,肿瘤细胞的侵袭能力显着增加,这种侵袭能力的加强可能与包括尿激酶或基质金属蛋白酶的变化有关。低氧与肿瘤治疗尤其是对化疗影响的研究有了很大的进展,发现低氧诱导因子1是介导细胞低氧反应最关键的核转录因子,也是低氧时调控细胞凋亡的重要因素。目的:观察低氧骨肉瘤细胞模型中环氧化酶2抑制剂NS-398对低氧状态下MG-63细胞侵袭能力的影响。方法:实验应用化学性缺氧诱导剂氯化钴建立浓度梯度为0,100,200,400μmol/L化学性缺氧环境,再在200μmol/L氯化钴的浓度下建立NS-398 30,60,90μmol/L的浓度梯度,将骨肉瘤细胞培养48 h时开始测定,使用定量PCR法检测基质金属蛋白酶9 mRNA的表达和低氧诱导因子1αmRNA的水平,Western blot测定低氧诱导因子1α的表达,流式细胞术检测各组细胞凋亡。结果与结论:PCR和Western blot检测结果显示,随着氯化钴浓度的增加,基质金属蛋白酶9 mR NA,低氧诱导因子1αmRNA及蛋白表达升高(P<0.05),呈浓度依赖性;而在氯化钴浓度为200μmol/L缺氧状态下,随着NS-398浓度的增加,基质金属蛋白酶9 mRNA,低氧诱导因子1αmRNA及蛋白表达均逐渐减小,呈浓度依赖性(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,在400μmol/L氯化钴浓度下,细胞凋亡水平明显减少;在氯化钴浓度为200μmol/L缺氧状态下,随着NS-398的浓度上升细胞凋亡率增加(P<0.05)。结果证实,缺氧环境是骨肉瘤侵袭能力增加的一个重要因素,在缺氧环境下NS-398可有效抑制骨肉瘤的侵袭能力并促进细胞凋亡。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2015年40期）
鄢勤文[8]（2015）在《鼻咽部共生菌与鼻咽上皮细胞共培养模型的建立及细菌侵袭上皮细胞的初步研究》一文中研究指出目的:鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)是在我国南方地区高发的恶性肿瘤。在两广地区,NPC的发病率和死亡率均居世界首位。NPC的病因复杂,其发病机制仍未完全阐明。目前研究认为,遗传易感性、EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)和环境致癌因素及其交互作用是其主要病因。近来研究发现,人体正常菌群结构改变可导致肿瘤发生。且细菌感染导致的慢性炎症可引起局部组织细胞发生表观遗传学改变,进而发展成肿瘤。鼻咽部共生细菌可能参与EBV在鼻咽上皮的潜伏感染及其致癌过程。本课题为研究人类鼻咽上皮与细菌的相互作用,建立起一个鼻咽部共生菌与上皮细胞体外共培养的模型,观察鼻咽部细菌侵袭鼻咽上皮细胞的特点以及侵袭后细胞超微结构的改变。我们建立的共培养模型,将可应用于从分子水平探讨细菌感染与鼻咽上皮细胞表观遗传学改变;探讨细菌侵袭鼻咽上皮细胞的行为特点也为进一步研究细菌感染与NPC发生发展关系的研究提供基础数据。方法:我们首先通过平板计数法获得一定数量的菌液,以一组梯度感染复数(multiplicity of infection,MOI)使细菌分别与鼻咽癌细胞系(HONE1,CNE2)和鼻咽部正常上皮细胞系NP69共培养12小时,光学显微镜下观察细胞的生长情况,确定一细胞生长能耐受的MOI范围。再通过庆大霉素保护实验,证明细菌可以侵袭进入鼻咽上皮细胞。在HONE1上同样通过庆大霉素保护实验探索细菌的侵袭特点:1.细胞胞内菌落形成单位(Colony-Forming Units,CFU)与共培养时间的关系;2.侵袭进入细胞胞内细菌CFU与MOI的关系;3.侵袭进入细胞胞内细菌数目随时间变化的趋势。使用基于细菌16S核糖体RNA(ribosomal RNA,rRNA)基因的荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)技术验证鼻咽上皮细胞内吞细菌。此外,使用透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)直观观察NPC细胞内化细菌的过程,以及被细菌侵袭后NPC上皮细胞的超微结构改变。结果:1.模型建立的探索:倒置相差显微镜下观察,细菌处理HONE112h,MOI=500时,细胞明显死亡,MOI=250及以下,细胞没有明显损失。处理NP69 12hMOI=500时,细胞明显死亡,MOI=250及以下,细胞损失不大。MOI≤200时细胞均损失不大。2.细菌侵袭鼻咽上皮细胞的特点:2.1表皮葡萄球菌处理2h后,MOI<200时,随着MOI的增加,HONE1细胞胞内的CFU也随之增加;而当MOI≥200时,细胞胞内的CFU数量不再增加(P<0.05)。2.2表皮葡萄球菌处理后,随着共培养时间的推移,在0～1h之间,HONE1胞内CFU明显增加(P<0.05)；在1h～4h之间,胞内CFU增加不明显(P>0.05);6h与4h相比,胞内CFU明显增加(P<0.05)。2.3NPC细胞系HONE1,CNE1,CNE2与HK1比鼻咽部正常上皮细胞系NP69更易被细菌侵袭,其差异具有统计学意义(P<0.05)。表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌能明显侵袭进入鼻咽上皮细胞(HONE1)。3.细胞内细菌的FISH检测及超微结构的观察:3.1通过FISH技术,验证了细菌与鼻咽上皮细胞系共培养(MOI=100)后,NPC细胞系内存在细菌,而通过TEM技术我们观察到HONE1细胞内吞金黄色葡萄球菌的过程(细胞膜凹陷→形成内陷小泡→细菌裂解)。3.2金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌分别作用于HONE1细胞2h后(MOI=100),TEM观察可见细胞内超微结构发生改变:胞内细菌周围有糖原沉积,脂质分布,还可观察到细菌进入细胞后可导致细胞中的线粒体肿胀、嵴断裂等。结论:1.与细菌共培养时在一定MOI范围内(约小于250)鼻咽上皮细胞生长能耐受,MOI在0～200的范围内比较适合用于共培养;2.鼻咽癌上皮细胞与细菌共培养时能内吞细菌,对于细菌侵袭鼻咽上皮细胞实验,MOI=100可以观察到比较理想的结果;与正常鼻咽部上皮细胞相比,鼻咽癌细胞系更易被细菌所侵袭;奈瑟菌相对有很高的侵袭率。3.NPC上皮细胞与细菌共培养后可导致细胞超微结构的改变。4.结合鼻咽上皮细胞生长能耐受的MOI,内化特点我们确定了一个鼻咽部共生菌与鼻咽上皮细胞体外共培养的流程,为下一步分子生物学实验提供简易细胞模型。(本文来源于《广西医科大学》期刊2015-05-01）
苗智峰,徐惠绵[9]（2014）在《不同缺氧模型对SGC-7901胃癌肿瘤细胞侵袭能力的影响》一文中研究指出目的:缺氧是实体肿瘤微环境中一个重要的特征,越来越多的证据显示,慢性/反复性缺氧和缺氧再灌注有利于肿瘤增长。然而,间歇性低氧调节胃癌侵袭潜能的机制仍有待研究。方法:我们建立连续和间歇胃癌缺氧模型。我们比较不同模型对胃癌细胞侵袭能力等影响。在不同模型中,我们通过Western印迹,免疫荧光和实时定量PCR研究缺氧诱导因子(HIF 1α-1α)和缺氧靶基因/靶蛋白的表达。通过划痕试验和Boyden小室法研究胃癌细胞的转移和侵袭能力。通过克隆形成实验和肿瘤球形成实验分析肿瘤细胞的自我更新能力。共聚焦显微镜下观察,干细胞相关蛋白0CT4和HIF-1α的表达情况。结果:我们证明,与在正常培养基下的SGC-7901相比,间歇性低氧模型以时间依赖性的方式上调HIF-1α和缺氧靶蛋白/靶基因的表达。值得注意的是,在间歇性缺氧的模型下HIF-1α更倾向于定位于SGC-7901的细胞核中。胃癌细胞的转移和侵袭能力在缺氧培养下显着提高,并且间歇性缺氧的SGC-7901肿瘤细胞比持续性缺氧的表现更强的侵袭能力。实验中胃癌干/祖细胞亚群比例的增加,也间接证明了缺氧提高了SGC-7901的自我更新能力。结论:我们的研究证明不同缺氧模型对调控胃癌细胞侵袭能力的影响。与持续性缺氧相比,间隙性缺氧是更有效缺氧刺激。这些结果为实体肿瘤微环境中的缺氧因素提供了新的视野。(本文来源于《第9届全国胃癌学术会议暨第二届阳光长城肿瘤学术会议论文汇编》期刊2014-06-27）
杨晓鲲,杨亚东,杨桂红,唐书谦,伍津津[10]（2013）在《人皮肤鳞状细胞癌体外叁维模型的建立及高侵袭性鳞癌细胞的生物学评价》一文中研究指出目的建立人皮肤鳞癌细胞体外叁维培养模型,分离高侵袭性细胞亚群,并比较其生物学特性。方法利用复方壳多糖组织工程皮肤,成功建立人皮肤鳞癌细胞体外叁维培养模型,消化分离得到高侵袭性鳞癌细胞亚群,比较肉桂醛和干扰素作用后对不同侵袭特性细胞亚群的增殖抑制效果,同时比较不同侵袭特性细胞亚群在裸鼠中成瘤效果的不同。结果不同浓度的肉桂醛和干扰素对皮肤鳞癌细胞的增殖抑制差异有统计学意义(P<0.01),不同侵袭特性的皮肤鳞癌细胞亚群之间的增殖抑制差异也有统计学意义(P<0.01),另外,两种不同侵袭特性的细胞亚群的成瘤特性差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功建立人皮肤鳞癌体外叁维培养模型,同时运用此种叁维培养模型能够筛选得到侵袭特性更强的细胞亚群。(本文来源于《重庆医学》期刊2013年29期）
细胞侵袭模型论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景:乳腺癌已经成为危害中国女性健康的第一大癌症,也是目前医疗卫生研究的重点。虽然目前乳腺癌临床上治疗方法较多(如手术治疗、放疗和化疗等),但是依然没有完全攻克这类癌症。因此,寻找新的更有效的治疗途径也是目前最为迫切的任务之一。随着我国近年对中医药学研究的不断深入,中药治疗肿瘤的潜力被逐渐发掘。胡椒碱便是其中一种比较有潜力的抗肿瘤药物。胡椒碱是存在于黑胡椒中最主要的生物碱,具有抑制肿瘤细胞生长和转移的作用。但已有的药代动力学研究表明,胡椒碱的生物利用度较低,而且直接服用副作用较多。因此,如何合理利用和提高胡椒碱的抗肿瘤效应是目前亟待解决的问题。纳米载药系统是目前应用很广的一种药物递送系统,它的应用与发展可提高抗肿瘤药物的有效性。近年来,纳米技术在传统中医药领域应用逐渐深入,进一步推进中药的发展及在临床上的应用。其中纳米靶向给药系统是目前纳米技术领域研究热点。目的:探讨巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体对乳腺癌细胞增殖、转移及侵袭的影响。方法:1.巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体的制备及表征鉴定首先以卵磷脂、胆固醇为膜材料,采用薄膜分散法制作胡椒碱脂质体(PL),然后从RAW 264.7巨噬细胞中分离并纯化细胞膜,最后通过过滤增压使细胞膜和胡椒碱脂质体混合而形成巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体(MPL)。利用透射电镜、扫描电镜、傅里叶红外分光光度计,紫外分光光度计等方法对MPL的结构特征、粒径分布、Zeta电位载药量、包封率等表征指标进行测定。2.巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体在体外抑制乳腺癌细胞用香豆素-6标记PL和MPL,检测两者的细胞摄取能力。细胞实验分成5组:对照组(Control组)、胡椒碱组(Pipe组)、胡椒碱脂质体组(PL组)、巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体组(MPL组)、巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体加游离巨噬细胞膜组(MPL+Mem组)。分别采用结晶紫实验、划痕实验、Transwell实验来检测MPL对乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移的抑制作用。3.巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体在体内抑制乳腺癌细胞建立4T1荷瘤BALB/c小鼠模型,随机将小鼠分为4组:空白对照组(Control组)、阳性对照组(Docetaxel组)、胡椒碱脂质体组(PL组)和巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体组(MPL组)。造模2周后,阳性对照组按照100 mg/kg的剂量配制多西他赛生理盐水溶液(50 mg/mL),MPL组给予相应剂量的MPL生理盐水溶液(50 mg/mL),PL组给予相应剂量的PL生理盐水溶液(50 mg/mL),空白对照组则是给予等量的生理盐水,每3天给药1次。观察小鼠一般情况,测定小鼠体重及肿瘤体积。造模四周后将小鼠处死,测量原位瘤的最终直径并称重;肺组织HE染色观察病理学变化。结果:1.制备的MPL为球形纳米颗粒,其分布均匀,平均粒径为148.2 nm,电位为19.7±6.39 mV,包封率为97.4%,载药量为16.54%。2.在体外实验中,MPL的细胞摄取能力高于PL的细胞摄取能力,且MPL有效提高了胡椒碱单体药及胡椒碱脂质体(PL)抑制肿瘤细胞增殖、侵袭和转移的能力。3.在体内实验中,MPL在小鼠体内是无毒安全的,且有很好的抑制乳腺癌生长及降低肺转移率的作用。结论:本研究制备的巨噬细胞膜包被胡椒碱脂质体在体外及体内均抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移。目的:越来越多的证据表明,叁阴性乳腺癌(Triple negative breast cancer,TNBC)比其他亚型乳腺癌能激发更强的免疫反应。我们假设,将免疫相关的基因组特征与临床病理因素相结合,可能会有比现存系统更高的预测准确性。方法:利用生物信息学方法鉴定并重新分析了反映TNBC特异性免疫原性或免疫微环境特性的10个特征。然后,将临床TNBC(n=711)与预测患者无病生存率(DFS)和总生存期(OS)的相应表达谱结合,评价其预后价值,并建立临床病理-基因组预测列线图。分别从10个免疫特征中筛选出3个和2个免疫特征,通过多变量后逐步Cox回归分析,构建DFS和OS预测的预测性列线图。结果:通过上述免疫表达特点与预后的临床病理特征相结合,构建临床病理基因组列线图,显示了合理的预测准确性(DFS:HR,1.79;95%CI,1.46-2.18,P<0.001;AUC,0.71;OS:HR,1.96;95%CI,1.54-2.49;P<0.001;AUC,0.73)。列线图显示,低危亚组的免疫检查点分子(PD-L1,PD-1,CTLA-4,LAG-3)表达水平较高,放疗(HR,0.2,95%CI,0.05-0.89;P=0.034)优于化疗(HR,1.26,95%CI,0.66-2.43;P=0.485)。结论:这些研究结果证明免疫相关基因组数据为TNBC提供了独立和互补的预后信息,且该列线图可能是一种实用的预测工具,可以用于确定从化疗、放疗和即将推广的免疫治疗中受益的TNBC患者。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞侵袭模型论文参考文献
[1].王春玲,张荣芳,陈峰杰,周露,姬颖华.miR-509靶向Rac1调节人肝癌LM3细胞侵袭和迁移及裸鼠模型的存活[J].中国病理生理杂志.2019
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[10].杨晓鲲,杨亚东,杨桂红,唐书谦,伍津津.人皮肤鳞状细胞癌体外叁维模型的建立及高侵袭性鳞癌细胞的生物学评价[J].重庆医学.2013
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