杂交瘤技术论文_张琳琳

导读:本文包含了杂交瘤技术论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:杂交瘤,技术,单克隆抗体,佐剂,抗原,专利申请,细胞。

杂交瘤技术论文文献综述

张琳琳[1](2016)在《杂交瘤技术制备单克隆抗体研究进展》一文中研究指出单克隆抗体广泛应用于生物医药和临床诊断等领域。本文综述杂交瘤技术制备单克隆抗体的研究进展,内容涉及实验动物和瘤细胞株的选择、免疫原和佐剂的使用,以及杂交瘤细胞的制备、筛选、克隆、培养和抗体的收集等方面的技术探索成果,旨在提供用杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本资料。(本文来源于《生物学教学》期刊2016年08期)

王锋,王宇,王弘,肖治理[2](2016)在《杂交-杂交瘤技术制备BsMAb的研究进展及其在食品安全检测中的应用》一文中研究指出双特异性单克隆抗体(bispecific monoclonal antibody,BsMAb)是指具有两个不同特异性抗原结合位点的单克隆抗体分子。杂交-杂交瘤技术因其简便易行、制备周期短,在制备Bs MAb方面有较大优势。基于杂交-杂交瘤技术能制备出可以特异性识别两种或者两类小分子药物的Bs MAb,在食品安全多残留免疫分析检测中具有较好的应用价值。本文综述了杂交-杂交瘤技术制备Bs MAb的进展,探讨了基于该技术的Bs MAb生成机制,讨论分析了杂交-杂交瘤及Bs MAb筛选制备的关键技术要点,并归纳了Bs MAb在检测食品中小分子污染物方面的应用进展,旨在为食品安全多残留免疫分析技术的发展应用提供参考。(本文来源于《食品科学》期刊2016年13期)

任娟[3](2014)在《杂交瘤技术与单克隆抗体》一文中研究指出本文从杂交瘤技术原理、单克隆抗体制备流程及应用现状3个方面,介绍了单克隆抗体技术的研究现状,为实验室工作者研究疾病诊断方法提供参考资料。(本文来源于《新疆畜牧业》期刊2014年04期)

顾若兰[4](2007)在《用杂交瘤技术建立永生化肝细胞研究药物代谢》一文中研究指出用杂交瘤技术建立永生化肝细胞研究药物代谢研究背景:原代肝细胞由于包含几乎肝脏所有的药物代谢酶及相应辅助因子,代谢功能与体内肝细胞相似,一直是体外药物代谢研究推崇的经典模型。但原代肝细胞体外分离培养条件复杂、药物代谢酶活性维持时间短、不能传代培养长期使用等弊端,导致原代肝细胞的应用成本较高、缺乏灵活性。因此,药物代谢研究领域迫切需要建立原代肝细胞的理想替代模型。研究目的:选择适宜种属和组织起源的肿瘤细胞株,采用杂交瘤技术将其与原代肝细胞融合,建立既具有原代肝细胞正常药物代谢活性,又具有肿瘤细胞无限增殖能力,可体外长期培养传代利用的永生化肝细胞(肝杂交瘤细胞株)。研究内容:分离、培养、冻存具备良好药物代谢活性的大鼠原代肝细胞;诱变筛选不同种属及组织起源的HGPRT基因缺陷(HGPRT~-)型肿瘤细胞株作为亲本瘤细胞的考察;利用杂交瘤技术将原代肝细胞与不同亲本瘤细胞株融合,建立符合药物代谢研究要求、具备良好药物代谢酶活性的肝杂交瘤细胞株,并对其生物学特性及功能进行鉴定;评价肝杂交瘤细胞株在体外药物代谢研究中的应用价值。技术方法:改进胶原酶二步灌流法分离培养大鼠原代肝细胞;化学诱变剂诱变、细胞克隆化培养、HAT筛选鉴定HGPRT~-型肿瘤细胞株;PEG化学融合法进行细胞融合实验;相关的细胞功能检测和鉴定综合采用形态学观察、HAT筛选、染色体核型分析、双荧光标记共聚焦激光扫描检测以及特征性生化指标包括糖原合成、白蛋白分泌和尿素合成功能的测定;细胞的药物代谢活性评价采用底物孵育法,HPLC和LC-MS技术检测。结果:优化建立了大鼠原代肝细胞的分离培养方法,所得原代肝细胞保持分泌白蛋白、合成尿素和糖原等肝细胞特征生物合成功能,具备全面良好的450酶代谢活性;克隆筛选了HAT敏感的HGPRT~-型人SMMC-7721肝癌细胞、小鼠骨髓瘤SP2/0细胞和大鼠H4TG肝癌细胞3株不同种属和组织起源的肿瘤细胞作为亲本瘤细胞进行与原代肝细胞的融合实验考察,得到的3株不同融合细胞表现出不同的培养特性。肝-7721杂交瘤细胞和肝-H4TG杂交瘤细胞能长期传代培养且具备药物代谢活性。其中肝-H4TG杂交瘤细胞株在长期培养传代过程中表现出较好的形态学和生物合成功能稳定性,目前已在体外培养5月余,纯化传代25次。具备几种典型P450亚型酶活性,纯化传代5次的肝杂交瘤细胞各典型P450酶活性约为原代肝细胞的40-50%,纯化传代10次后CYP2C、CYP3A活性有所下降,但CYP1A、CYP2D活性无明显改变。结论:3种不同种属和组织起源的亲本瘤细胞与大鼠原代肝细胞融合的结果倾向于表明:原代肝细胞与同组织起源的肝癌细胞融合比与异组织起源的肿瘤细胞融合效率高;原代肝细胞与同种属的肿瘤细胞融合比与异种属肿瘤细胞融合稳定。即应选择同种属起源的肝癌细胞株与原代肝细胞融合建立肝杂交瘤细胞。目前结果表明,大鼠肝-H4TG杂交瘤细胞株至少在较长的一段培养时期内能保持较好的药物代谢活性,在一定程度上可作为原代肝细胞的替代模型应用于药物代谢研究领域。但对其代谢活性的长期稳定维持,可能尚有未知影响因素与机制的参与和作用,值得做进一步深入探讨。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2007-05-18)

许晓光,朱勇,刘雪松,刘莹,户义[5](2003)在《新型免疫佐剂在淋巴细胞杂交瘤技术中的应用》一文中研究指出目的 观察新型免疫佐剂ImmunEasyTM(CpGODN)的免疫调节作用 ,并与弗氏佐剂相比较 ,探讨其在单克隆抗体制备中的应用前景。方法 将小鼠用新型免疫佐剂ImmunEasyTM 或弗氏佐剂混合原核表达的重组APRIL抗原 ,分别以常规免疫和少量抗原免疫方案免疫Balb c小鼠 ,用间接ELISA法检测不同时相小鼠免疫血清抗APRIL抗体的总效价及各类和亚类的效价。建立一种能在单个细胞水平反映小鼠B细胞分泌特异性抗体亚类的改良ELISPOT方法 ,并对两种佐剂免疫组中配对的小鼠进行检测。常规方法制备杂交瘤 ,以间接ELISA法筛选阳性杂交瘤 ,比较不同佐剂免疫小鼠所获得的杂交瘤上清液的类及其亚类频率。结果 与弗氏佐剂相比 ,ImmunEasyTM 在单克隆抗体制备过程中可明显减少抗原用量 ,缩短免疫周期 ,提高免疫血清效价 ,并增加IgG2a、IgM及IgA抗体的比例。结论 在细胞融合制备鼠源性mAb中 ,应用ImmunEasyTM,可减少免疫原用量 ,提高效率 ,还可优先获得某些类及其亚类的mAb。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2003年06期)

潘晓蔚,曾艳,徐军[6](2003)在《在使用杂交瘤技术制备纯化单克隆抗体中应用BALB/c小鼠的几点体会》一文中研究指出自 1975年英国剑桥大学分子生物学研究室的Kohler和Milstein创立杂交瘤单克隆抗体技术以来 ,该技术的应用和推广为所有制备和使用特异性抗体的研究提供了全新的手段和制剂[1] 。采用何品系的动物进行免疫 ,是获得高质量单克隆抗体的一个关键。我们(本文来源于《沈阳医学院学报》期刊2003年02期)

谢建平[7](2003)在《杂交瘤技术和单克隆抗体的专利问题》一文中研究指出单抗药物已代替重组蛋白药物成为生物技术药品的主导产品。上世纪80年代末以来,利用基因工程手段构建嵌合抗体或人源化抗体为发展治疗性单抗药物带来突破。上世纪90年代,美国旧金山南部的GenentechInc.开发了治疗乳腺癌的新药Herceptin,1998(本文来源于《中国家禽》期刊2003年12期)

许晓光[8](2003)在《新型免疫佐剂(CpG ODN)的免疫调节作用及其在淋巴细胞杂交瘤技术中的应用研究》一文中研究指出免疫佐剂是一种非特异性免疫增强剂,其种类繁多,如卡介苗、脂多糖、氢氧化铝、明矾、矿物油,以及近年来开始应用的脂质体和CpG寡核苷酸等。其作用机制主要有叁种:一是通过改变抗原的物理性状,增加抗原在体内的潴留时间;二是通过刺激单核—巨噬细胞,增加对抗原的处理和呈递能力;叁是通过刺激淋巴细胞的增殖分化,从而增强和扩大免疫应答的能力。 处于特定碱基背景中的非甲基化的CpG二核苷酸(CpG基序)在细菌及病毒的DNA中普遍存在,而在哺乳动物中则被强烈抑制和甲基化。含CpG基序的寡核苷酸(CpG ODN)可通过其受体TLR-9诱导MAPK和NF-κB的活化而直接活化表达TLR-9的浆细胞样前DC细胞(pDC)和B细胞,间接活化单核、巨噬细胞、NK细胞和T细胞,提高中性粒细胞的防御反应能力,并诱导Th1样致炎细胞因子、干扰素和趋化性细胞因子的分泌,从而激活天然免疫应答和诱导适应性免疫应答。含不同骨架的寡核苷酸有不同的免疫活化效应,CpG-A ODN可有效地活化NK细胞,诱导浆细胞样树突状细胞前体产生IFN-α;而CpG-B ODN有很强的活化B细胞的能力,而其活化NK细胞的能力较低。CpG ODN在对肿瘤、过第四军医大学硕士学位论文 中文摘要敏性疾病及感染性疾病的预防和治疗疫苗中有广阔的应用前景。 本文中,我们首先对新型免疫佐剂(CpG ODN)的免疫调节作用进行了初步研究,并与弗氏佐剂进行了对比。依照重复、对照、随机的统计学原则,分别用新型佐剂和弗氏佐剂混合原核表达的诱导增殖的配体 (APRIL)免疫原,以常规方案免疫,检测了不同时间点(第一次免疫后SW和SW)各组小鼠免疫血清抗APRIL抗体的总效价及各种Ig类和亚类效价,结果表明,新型免疫佐剂(CpG ODN)能够诱导比弗氏完全佐剂更为强烈的Thl型免疫应答,并能促进IgGZa、IgM及IgA的优势分泌。此外,本实验还建立了一种能在单个细胞水平反映小鼠B细胞分泌特异性抗体类和亚类的改良ELISPOT方法。 生命科学的发展极大地依赖于实验技术的进步,单克隆抗体制备技术也己成为生物工程的核心技术之一。蛋白组学研究是继基因组学研究后的生命科学发展的重要方向之一。抗体芯片技术为蛋白组学研究提供了新的手段。显然,单克隆抗体制备技术己成为蛋白质组学研究的重要技术之一。本实验又对新型免疫佐剂在淋巴细胞杂交瘤技术中的应用进行了研究,并分别在免疫原用量、免疫周期、InAb的类和亚类叁个方面与传统的弗氏佐剂进行了比较。结果表明,新型免疫佐剂能够显着地减少"LAb制备所需的兔疫原用量,缩短免疫周期,并可优先获得IgGZa和IgM的InAb。 本实验所用免疫原APRIL是新发现的T’NFSF的成员,也是第八届人类白细胞分化抗原国际协作组会议(HLDAS)的 198个侯选CD分子之一,在调节T细胞的存活及活性、B细胞活性及许多重要的生理和病理过程中可能有重要的作用。本实验建立了10株能够稳定分泌可识别天然和变性APRIL的InAb的杂交瘤细胞株,并对ITUlb进行了初步鉴定。这为在HLDAS中申报新的CD编号提供了有利条件,并为进一步研究APRIL及其亚家族的功能研究提供了重要手段。此外,利用ITUlb对APRIL的表达分布作了初步的研究,发现APML除可表达于人外周血单个核细胞 0BMC)、扁桃体细胞、脐带血B细胞等天然细胞外,还可表达在Ran细胞系和骨髓瘤细胞系等肿瘤细胞系,提示APRIL可能参与淋巴细胞的硕士研究生:许晓光 导师:金伯泉、朱勇4第四军医大学硕士学住论文 中文摘要分化与发育过程及肿瘤的发生。(本文来源于《中国人民解放军第四军医大学》期刊2003-04-01)

谢建平[9](2003)在《杂交瘤技术和单克隆抗体的专利问题》一文中研究指出单抗药物代替重组蛋白药物已成为生物技术药品中的主导产品。上世纪 80年代末以来 ,利用基因工程手段构建嵌合抗体或人源化抗体为发展治疗性单抗药物带来突破。上世纪 90年代 ,美国旧金山南部的GenentechInc .开发了治疗乳腺癌的新药Hercepti(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2003年01期)

本刊编辑部[10](2002)在《淋巴细胞杂交瘤技术创始人Milstein逝世》一文中研究指出淋巴细胞杂交瘤技术创始人Dr .C’esarMilstein于 2 0 0 2年 3月 2 4日在英国剑桥因心脏病不幸逝世 ,享年 74岁。 1975年 ,Milstein同他的博士后Dr .GeorgesK¨ohler从事了单克隆抗体的研究工作 ,于(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2002年03期)

杂交瘤技术论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

双特异性单克隆抗体(bispecific monoclonal antibody,BsMAb)是指具有两个不同特异性抗原结合位点的单克隆抗体分子。杂交-杂交瘤技术因其简便易行、制备周期短,在制备Bs MAb方面有较大优势。基于杂交-杂交瘤技术能制备出可以特异性识别两种或者两类小分子药物的Bs MAb,在食品安全多残留免疫分析检测中具有较好的应用价值。本文综述了杂交-杂交瘤技术制备Bs MAb的进展,探讨了基于该技术的Bs MAb生成机制,讨论分析了杂交-杂交瘤及Bs MAb筛选制备的关键技术要点,并归纳了Bs MAb在检测食品中小分子污染物方面的应用进展,旨在为食品安全多残留免疫分析技术的发展应用提供参考。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

杂交瘤技术论文参考文献

[1].张琳琳.杂交瘤技术制备单克隆抗体研究进展[J].生物学教学.2016

[2].王锋,王宇,王弘,肖治理.杂交-杂交瘤技术制备BsMAb的研究进展及其在食品安全检测中的应用[J].食品科学.2016

[3].任娟.杂交瘤技术与单克隆抗体[J].新疆畜牧业.2014

[4].顾若兰.用杂交瘤技术建立永生化肝细胞研究药物代谢[D].中国人民解放军军事医学科学院.2007

[5].许晓光,朱勇,刘雪松,刘莹,户义.新型免疫佐剂在淋巴细胞杂交瘤技术中的应用[J].免疫学杂志.2003

[6].潘晓蔚,曾艳,徐军.在使用杂交瘤技术制备纯化单克隆抗体中应用BALB/c小鼠的几点体会[J].沈阳医学院学报.2003

[7].谢建平.杂交瘤技术和单克隆抗体的专利问题[J].中国家禽.2003

[8].许晓光.新型免疫佐剂(CpGODN)的免疫调节作用及其在淋巴细胞杂交瘤技术中的应用研究[D].中国人民解放军第四军医大学.2003

[9].谢建平.杂交瘤技术和单克隆抗体的专利问题[J].中国生物工程杂志.2003

[10].本刊编辑部.淋巴细胞杂交瘤技术创始人Milstein逝世[J].细胞与分子免疫学杂志.2002

论文知识图

介导的人T细胞IL-2基因表达调控的信...整合基因组和蛋白质组研究手段鉴定和研...免疫细胞化学染色法检测免疫小鼠血清...细胞融合技术制备单克隆抗体Fig.1-8P...一杂交瘤技术基本过程单克隆抗体杂交瘤技术基本流程

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