化脓隐秘杆菌TatD960的原核表达及其体外降解DNA作用研究

化脓隐秘杆菌TatD960的原核表达及其体外降解DNA作用研究

论文摘要

[目的]TatD脱氧核糖核苷酸酶(TatD-like DNase)广泛存在于多种生物体内,已有研究表明它与病原微生物逃避宿主免疫密切相关。化脓隐秘杆菌是引起奶牛乳房炎及子宫内膜炎的重要致病菌之一,本研究旨在初步探讨化脓隐秘杆菌TatD-like DNase的功能,将为进一步研究化脓隐秘杆菌的免疫逃逸机制奠定基础。[方法]采用常规方法构建化脓隐秘杆菌tatD960基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达,获得可溶性蛋白,采用Ni-NTA方法纯化重组蛋白;采用酚氯仿抽提方法制备小鼠肝脏组织DNA;将Mg2+、Cu2+、Zn2+、Ni2+、Ca2+等五种金属离子分别作用于重组蛋白TatD960,使用荧光染料Picogreen检测TatD960对鼠源DNA的影响。[结果]结果表明,化脓隐秘杆菌TatD960可降解DNA,其合适的反应温度为35-41℃,Mg2+、Ni2+和Ca2+能够促进其对DNA的降解作用。[结论]化脓隐秘杆菌TatD960在体外可降解鼠源DNA,且是一种Mg2+依赖的脱氧核糖核苷酸酶;化脓隐秘杆菌TatD-like DNase对其自身毒力及致病性的影响有待进一步研究。

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文章来源

类型: 国内会议

作者: 张泽辉,李名昂,张德显,张路遥,崔璨璨,牛生吏,刘明春

关键词: 化脓隐秘杆菌,免疫逃避

来源: 中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会 2019-10-13

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 沈阳农业大学畜牧兽医学院

分类号: S852.61

DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.034449

页码: 58

总页数: 1

文件大小: 80k

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