基于金纳米花标记的免疫层析法检测牛奶中黄曲霉毒素M1

论文摘要

研究金纳米花作为信号放大用于黄曲霉毒素M1高灵敏检测。用粒径为（91.8±0.8）nm、分支数多的金纳米花（gold nanoflowers,AuNFs）标记黄曲霉毒素M1（aflatoxin M1,AFM1）单克隆抗体（monoclonal antibody,Mab）,制备用于检测牛奶中AFM1的金纳米花免疫层析检测卡（aflatoxin M1-gold nanoflower immunochromatographic test card,AFM1-GFICT）。纳米金免疫分析读数仪被用于读取AFM1系列浓度（20 pg/mL～1 000 pg/mL）的信号值。以AFM1浓度为横坐标,信号值为纵坐标绘制非线性四参数拟合曲线。非线性四参数拟合曲线相关系数R2=0.999 3,检测限为12.3 pg/mL。检测在空白牛奶样品加入AFM1标准品浓度为0.1、0.3、0.5μg/kg的回收率为80.4%～118.2%,变异系数（n=10）为4.27%～9.43%。15份牛奶样品的AFM1-GFICT和商业化AFM1-ELISA检测结果相比,线性拟合相关系数R2=0.976 8。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 试验方法
•     1.3.1 溶液配置
•     1.3.2 AuNSs和AuNFs的制备
•     1.3.3 金纳米花AFM1抗体 （AuNF-AFM1-Mab） 和的球形纳米金AFM1抗体 （AuNS-AFM1-Mab） 标记物的制备
•     1.3.4 AFM1金纳米花免疫层析检测卡 （AFM1-gold nanoflower immunochromatographic test card, AFM1-GFICT） 和球形纳米金免疫层析检测卡 （AFM1-gold nanospherical immunochromatographic test card, AFM1-GICT） 的制备
•     1.3.5 AFM1-GFICT和AFM1-GICT标准曲线的建立
•     1.3.6 AFM1-GFICT分析性能评估
•       1.3.6. 1 准确度、精密度和稳定性评价
•       1.3.6. 2 特异性评价
•       1.3.6. 3 实际样品检测
• 2 结果与分析
•   2.1 AuNFs和AuNSs的表征
•   2.2 AuNFs标记AFM1-Mab最佳标记pH值和最合适标记蛋白质浓度
•   2.3 AFM1-GFICT关键参数优化
•   2.4 AFM1-GFICT和AFM1-GICT定量标准曲线的建立
•   2.5 AFM1-GFICT分析性能评估
•     2.5.1 AFM1-GFICT加标回收、精密度和稳定性测试
•     2.5.2 AFM1-GFICT特异性
•     2.5.3 AFM1-GFICT与商业化AFM1-ELISA试剂盒检测结果的相关性
• 3结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 金玉,刘仁荣,裘雪梅

关键词: 金纳米花,黄曲霉毒素,免疫层析,非线性四参数曲线拟合

来源: 食品研究与开发 2019年13期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 江西科技师范大学生命科学学院

基金: 国家自然科学基金(81360429),江西省教育厅科技项目(KJLD14067)

分类号: TS252.7

页码: 164-170

总页数: 7

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