导读:本文包含了叶盘转化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:野生毛葡萄,遗传转化,农杆菌,抗生素
叶盘转化论文文献综述
马孟增,甘专,张文娥,潘学军[1]（2013）在《中国野生毛葡萄叶盘法遗传转化中抗生素种类及体积质量分数的筛选》一文中研究指出为获得毛葡萄遗传转化体系中合适的抗生素种类和体积质量分数,以毛葡萄单株"花溪-4"为试材,研究了选择抗生素潮霉素(Hygromycin,Hyg)、卡纳霉素(Kanamycin,Kan)和抑菌抗生素羧苄青霉素(Carbenicillin,Carb)及头孢霉素(Cefotaxime,Cef)对其离体叶片再生和再生芽成苗的影响.结果表明:0.1mg/L的Hyg和10mg/L的Kan可完全抑制不定芽再生,适合遗传转化中转基因再生芽筛选;再生芽在添加5mg/L Hyg和40mg/L Kan培养基中表现黄化致死,不能成苗,可用于转基因苗选择.300mg/L的Cef或400mg/L的Carb均可促进花溪-4不定芽再生,同时对根癌农杆菌抑制效果良好,适宜于毛葡萄遗传转化中抑制农杆菌生长.(本文来源于《西南大学学报(自然科学版)》期刊2013年07期）
柏锡,狄少康,张秀芹,朱延明[2]（2012）在《草莓叶盘再生和遗传转化体系的优化》一文中研究指出农杆菌介导的叶盘法是目前草莓遗传转化的主要方法,建立高效稳定的叶盘再生体系是获得转基因草莓的必要条件。文章探讨了影响草莓离体叶片不定芽诱导的主要因素,建立了一个稳定的草莓植株再生体系,确定草莓品种弗吉尼亚不定芽诱导的最佳培养基组分为:MS+TDZ 2 mg.L-1+IBA 0.1 mg.L-1+2,4-D 0.2 mg.L-1,pH 5.8。发现叶盘近轴面向下放置能显着提高再生频率,且叶片幼嫩程度与草莓不定芽分化率呈正相关。并以此体系对草莓叶盘遗传转化进行优化,发现草莓品种弗吉尼亚遗传转化最佳预培养时间为2 d,最佳侵染时间为7 min。同时,利用该体系,将由不同启动子诱导的组织型纤溶酶原激活剂(Tissue-type plasminogen activator,t-PA)基因对草莓进行遗传转化。(本文来源于《东北农业大学学报》期刊2012年10期）
王彦立,贺柱,师校欣,杜国强[3]（2009）在《葡萄叶盘法基因转化中抗生素种类和浓度的筛选》一文中研究指出以优良无核葡萄品种莫利莎葡萄试管苗为试材,研究了卡那霉素(Kan)、潮霉素(Hyg)对葡萄继代苗生长和离体叶片再生的影响,以确定叶盘法基因转化的选择压和转化体的筛选浓度;同时研究了不同浓度的头孢霉素(Cef)和羧苄青霉素(Carb)对葡萄离体叶片再生的影响,以确定侵菌共培养后合适的抑菌抗生素种类和浓度。试验结果表明葡萄继代苗对Hyg的敏感性强于Kan,葡萄遗传转化更适合使用潮霉素磷酸转移酶基因作为选择标记。Hyg3.0mg/L即达到继代苗致死浓度,可作为转化后抗性苗的筛选浓度,Hyg0.8mg/L完全抑制叶片不定芽的分化,可作为叶盘法转化时抗性芽的选择压。葡萄叶盘法基因转化中抑制农杆菌生长的抗生素可选用Cef300mg/L或Carb400mg/L,但对不定芽的分化有抑制作用。(本文来源于《中国农学通报》期刊2009年21期）
孙磊,张启翔[4]（2007）在《利用gus基因瞬时表达探讨菊花叶盘基因枪转化参数》一文中研究指出为了将基因枪转化方法应用于菊花的遗传改良和品种选育,以gus基因为报告基因,利用基因枪方法将其转入菊花外植体内,通过检测gus基因在菊花叶盘中的瞬时表达情况,分析了轰击距离、氦气压力、金粉用量、质粒DNA浓度、轰击后培养时间、轰击次数等参数对gus瞬时表达的影响。结果表明,以幼嫩叶片为受体材料,在射程为6 cm、氦气压力为7.584×106Pa,每枪金粉用量为400μg,质粒DNA用量为3μg,轰击2次的条件下,2 d后可检测gus基因的最佳表达活性和最高瞬时表达率。(本文来源于《河南农业科学》期刊2007年11期）
张丽丽,师校欣,杜国强,冯莎莎,张俊阁[5]（2006）在《苹果叶盘法基因转化中抗生素种类和浓度的筛选》一文中研究指出以苹果品种嘠拉试管苗为试材,研究了卡那霉素(Km)、潮霉素(Hm)对继代苗生长和离体叶片再生的影响,以确定叶盘法基因转化的选择压和转化体的筛选浓度;同时研究了不同浓度的头孢霉素(Cef)和羧苄青霉素(Carb)对苹果离体叶片再生的影响及对农杆菌EHA105和LBA4404的抑菌效果;以确定侵菌共培养后合适的抑菌抗生素种类和浓度。结果表明:Km10mg/L、Hm4.0mg/L完全抑制了叶片不定芽的分化,可作为苹果叶盘法转化时抗性芽的选择压;Km50mg/L、Hm5.0mg/L达到继代苗的半致死浓度,可作为转化后抗性苗的筛选浓度;由于抗性芽再生的选择压与抗性苗筛选浓度相差较小,Hm相对于Km更适合作为苹果基因转化的选择标记;培养基中附加Cef300mg/L能完全抑制农杆菌生长,对叶片不定芽的再生影响不大;而附加Carb则需400mg/L以上才能抑制农杆菌生长,同时严重抑制了叶片再生。因此,宜选用Cef作为苹果基因转化的抑菌抗生素。(本文来源于《中国农学通报》期刊2006年10期）
李敬蕊[6]（2006）在《月季再生体系的建立及叶盘法转化月季‘萨蔓莎’的研究》一文中研究指出月季以其花朵美丽、花色多样、香味浓郁、四季开花等深受人们的喜爱。月季在我国广泛栽培，是城市绿化的主要材料。作为世界四大鲜切花之一，月季有很高的商品价值。本试验以切花月季‘萨蔓莎’小叶片为外植体优化了其再生体系和遗传转化体系。同时以离体小叶片为外植体，建立了15个切花月季品种的直接器官发生的再生体系。其主要研究结果如下： 1．通过‘萨蔓莎’小叶片离体培养探讨暗培养时间和碳源种类对再生的影响，优化了通过器官发生途径诱导形成不定芽的再生体系。结果表明：月季小叶片外植体在诱导培养基(1／2MS+1.5mg／L TDZ+0.05mg／L NAA+10mg／L AgNO_3+3％Gluose+0.25％GEL)上黑暗培养15d，之后转入扩繁培养基(MS+0.5mg／LBA+0.004mg／L NAA+0.1mg／L GA_3)中光下培养，再生效果最好，在小叶片叶柄及主脉的切口处都可以再生不定芽。其不定芽诱导率最高可达到95.0％以上，其不定芽在扩繁培养基上培养4周后植株再生率达60.0％以上，平均再生枝数为2.0个／小叶片。 2．建立了15种月季切花品种叶片直接再生体系，比较了不同基因型和不同植物生长调节剂组合对月季再生的影响。研究结果表明：基因型是影响叶片直接再生的首要因素。在8种添加TDZ的培养基上，‘蒙特苏玛’的植株再生率最高，其不定芽诱导率和植株再生率最高分别为86.5％和50.0％，‘格伦娣·盖拉’再生芽率最低为5.7％。‘蝴蝶玫瑰’植株再生率最低为2.9％。基因型不同，再生所需最适植物生长调节剂组合不同。当诱导培养基中细胞分裂素(TDZ)与生长素(NAA)比值为10-30时，多数品种可获得最高不定芽诱导率。同时，取其中8个品种的小叶片为外植体，试验BA对诱导植物再生的影响，结果表明：尽管在诱导培养基中加入BA可以诱导月季不定芽的产生，但是最终没有再生成植株。 3．通过对GUS基因瞬时表达率及抗性芽率的分析，优化了以月季品种‘萨蔓莎’小叶片作为根癌农杆菌介导的转化的受体的遗传转化体系，结果表明：渗透处理是影响月季‘萨蔓莎’遗传转化成败的关键，用0.3mol／L的甘露醇高渗处理2h的小叶片GUS瞬间表达率最高可达50％。不用甘露醇处理的则完全检测不到GUS瞬间表达。另外，叶片的生理状态、共培养时间、侵染后的选择方式对转化效率都有一定的影响。最后利用优化好的转化条件侵染了近千张小叶片，直到目前为止，已获得了13个抗性芽。(本文来源于《华中农业大学》期刊2006-05-01）
周春丽,郭卫东,王德解,余初浪,路梅[7]（2005）在《利用GUS基因瞬时表达探索佛手叶盘基因枪转化参数》一文中研究指出佛手是芳香科枸橼类植物,有很好的药用和观赏价值,但其品种较为单一,对其进行遗传改良和品种选育显得十分必要.为了将基因枪转化方法应用于佛手的遗传改良和品种选育,本实验以GUS基因为报告基因,利用基因枪方法将其转入金华佛手外植体内,通过检测GUS基因在佛手叶盘中的瞬时表达情况,分析了外植体的幼嫩程度、射程、氦气压力、真空度、轰击次数等参数对GUS瞬时表达的影响,并研究了最佳检测时间.结果表明,以幼叶为受体,在射程为6 cm、氦气压力为7.584×106Pa,真空度为88.046 kPa条件下,2 d后可检测出GUS基因的最佳表达活性.轰击次数多少对GUS基因瞬时表达影响不明显.(本文来源于《西北植物学报》期刊2005年11期）
唐先兵[8]（2001）在《脱水素基因BDN1双元表达载体的构建与农杆菌介导叶盘法转化烟草》一文中研究指出随着生物技术的迅速发展，特别是植物基因工程技术的飞速发展，植物耐旱研究已从传统的生理研究转向分子方向的研究。利用植物基因工程技术进行植物耐旱研究，包括耐旱相关基因的克隆、分离、鉴定以及通过遗传转化获得耐旱植株。 脱水素（dehydrins）是当前植物耐旱研究的一个热点，脱水素通常大量存在于复苏植物、植物种子、或水胁迫条件下的植物体内。在实验中，我们分别构建了以脱水素基因BDN1为目的基因、筛选基因为NPTⅡ的双元表达载体pBI121BDN1和Bar基因作为抗性筛选基因、在单子叶启动子Ubiquitin promoter启动下表达的基因枪表达载体pAHC25BDN1。以及利用6-磷酸-海藻糖合酶基因（TIS）作为目的基因，Bar基因作为抗性筛选基因，在单子叶启动子Ubiquitin promoter启动下表达的基因枪表达载体pAHC25TPS。将构建好的双元表达载体pBI121BDN1转入农杆菌中，用农杆菌介导叶盘燃化烟草W38。共获得20株具有Kan抗性的转化烟草。SDS法提取转化烟草植株的总DNA，并用PCR初步鉴定有8株烟草出现与目的基因大小相同的DNA条带（800bp左右）其余为Kan假阳性。进一步用DIG标记的Southern杂交进行检测，有两株烟草出现相应的杂交带。转化烟草耐旱能力的检测正在进行中。单子叶表达载体pAHC25BDN1、pAHC25TPS转化玉米、草坪草的工作也正在进行中。(本文来源于《首都师范大学》期刊2001-05-01）
叶盘转化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
农杆菌介导的叶盘法是目前草莓遗传转化的主要方法,建立高效稳定的叶盘再生体系是获得转基因草莓的必要条件。文章探讨了影响草莓离体叶片不定芽诱导的主要因素,建立了一个稳定的草莓植株再生体系,确定草莓品种弗吉尼亚不定芽诱导的最佳培养基组分为:MS+TDZ 2 mg.L-1+IBA 0.1 mg.L-1+2,4-D 0.2 mg.L-1,pH 5.8。发现叶盘近轴面向下放置能显着提高再生频率,且叶片幼嫩程度与草莓不定芽分化率呈正相关。并以此体系对草莓叶盘遗传转化进行优化,发现草莓品种弗吉尼亚遗传转化最佳预培养时间为2 d,最佳侵染时间为7 min。同时,利用该体系,将由不同启动子诱导的组织型纤溶酶原激活剂(Tissue-type plasminogen activator,t-PA)基因对草莓进行遗传转化。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
叶盘转化论文参考文献
[1].马孟增,甘专,张文娥,潘学军.中国野生毛葡萄叶盘法遗传转化中抗生素种类及体积质量分数的筛选[J].西南大学学报(自然科学版).2013
[2].柏锡,狄少康,张秀芹,朱延明.草莓叶盘再生和遗传转化体系的优化[J].东北农业大学学报.2012
[3].王彦立,贺柱,师校欣,杜国强.葡萄叶盘法基因转化中抗生素种类和浓度的筛选[J].中国农学通报.2009
[4].孙磊,张启翔.利用gus基因瞬时表达探讨菊花叶盘基因枪转化参数[J].河南农业科学.2007
[5].张丽丽,师校欣,杜国强,冯莎莎,张俊阁.苹果叶盘法基因转化中抗生素种类和浓度的筛选[J].中国农学通报.2006
[6].李敬蕊.月季再生体系的建立及叶盘法转化月季‘萨蔓莎’的研究[D].华中农业大学.2006
[7].周春丽,郭卫东,王德解,余初浪,路梅.利用GUS基因瞬时表达探索佛手叶盘基因枪转化参数[J].西北植物学报.2005
[8].唐先兵.脱水素基因BDN1双元表达载体的构建与农杆菌介导叶盘法转化烟草[D].首都师范大学.2001