斑马鱼PKR双链RNA结合模体的点突变及功能分析

斑马鱼PKR双链RNA结合模体的点突变及功能分析

论文摘要

目的:构建ZPKR的dsRBM1和dsRBM3的点突变体,分别使其丧失dsRNA结合作用但保留二聚化作用。方法:通过点突变技术分别构建了ZPKR的dsRBM123K61A,和dsRBM123K263A的点突变体,并进一步通过定向删除技术构建了dsRBM12K61A和dsRBM23K263A突变体;通过二聚化和Poly I:C Pull-down实验检测其功能差异。结果:点突变后四种突变体的二聚化作用并没有改变,但结合Poly I:C作用明显减弱或者丧失。结论:ZPKR的dsRBM1和dsRBM3的保守序列KKEAK的单个K突变为A后,并不改变其二聚化功能,但结合Poly I:C的功能丧失,为进一步研究体内ZPKR不依赖dsRNA的活化机制奠定基础。

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文章来源

类型: 国内会议

作者: 高宗泽,欧湘滢,曾菲,褚开淼,许锦坤,胡有生

关键词: 斑马鱼,点突变,二聚化

来源: 华东六省一市生物化学与分子生物学会联盟2019年学术与教学交流会 2019-07-12

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学,生物学,生物学

单位: 井冈山大学医学部

分类号: Q953;Q78

页码: 24

总页数: 1

文件大小: 25k

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