樟绒枝霉α-淀粉酶在毕赤酵母中的高效表达及在麦芽糖浆制备中的作用

论文摘要

从嗜热真菌樟绒枝霉（Malbranchea cinnamomea）中克隆α-淀粉酶基因McAmyA,并在毕赤酵母GS115中高效表达,经高密度发酵至168 h时,胞外酶活力达到13 440. 6 U/mL。重组α-淀粉酶McAmyA粗酶液经QSFF强阴离子交换层析纯化得到电泳级纯酶,比酶活力为1 230. 2 U/mg。酶学性质研究表明,重组α-淀粉酶McAmyA的最适pH和最适温度分别是6. 5和65℃。以淀粉液化液为底物,在温度60℃,加酶量120 U/g,水解24 h的条件下,重组α-淀粉酶McAmyA水解液化液,制备得到麦芽糖含量为50. 0%（质量分数）的麦芽糖浆。该真菌α-淀粉酶在毕赤酵母中表达水平高,具有很大的应用潜力。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 试验材料
•     1.1.2 培养基
•   1.2 方法
•     1.2.1 樟绒枝霉α-淀粉酶基因McAmyA的克隆和表达载体构建
•     1.2.2 α-淀粉酶基因Mc AmyA在毕赤酵母中表达
•     1.2.3 毕赤酵母高密度发酵
•     1.2.4 α-淀粉酶活力及蛋白含量的测定
•     1.2.5 重组α-淀粉酶Mc AmyA的纯化
•     1.2.6 最适pH和最适温度测定
•     1.2.7 重组α-淀粉酶Mc AmyA水解液化液制备麦芽糖浆
•       1.2.7. 1 重组α-淀粉酶Mc AmyA加酶量对麦芽糖含量的影响
•       1.2.7. 2 水解温度对麦芽糖含量的影响
•       1.2.7. 3 水解时间对麦芽糖含量的影响
•       1.2.7. 4 糖含量测定和水解率计算
• 2 结果与分析
•   2.1 α-淀粉酶基因Mc AmyA的毕赤酵母表达和高密度发酵
•   2.2 重组α-淀粉酶Mc AmyA的纯化
•   2.3 重组α-淀粉酶Mc Amy A的最适p H和最适温度
•   2.4 重组α-淀粉酶Mc Amy A制备麦芽糖浆
•     2.4.1 重组α-淀粉酶Mc AmyA加酶量对麦芽糖含量的影响
•     2.4.2 水解温度对麦芽糖含量的影响
•     2.4.3 水解时间对麦芽糖含量的影响
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵宁,王玉川,易萍,闫巧娟,江正强

关键词: 樟绒枝霉,淀粉酶,毕赤酵母,高密度发酵,麦芽糖浆

来源: 食品与发酵工业 2019年02期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 中国农业大学食品科学与营养工程学院,中国农业大学工学院

基金: 国家重点研发计划2018YFD0400404

分类号: TQ926

DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.016703

页码: 1-6

总页数: 6

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