导读:本文包含了丙糖磷酸异构酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:磷酸,异构,抗原,基因,绦虫,细粒,戊烯。
丙糖磷酸异构酶论文文献综述
夏菲,李梦思,曹敏杰,刘光明[1]（2019）在《拟穴青蟹磷酸丙糖异构酶晶体结构及交叉反应分析》一文中研究指出目的:蟹类作为诱发亚洲地区食物过敏的主要来源之一,其过敏原研究对于过敏原特异性免疫诊断具有重要的意义。本文以重组新型拟穴青蟹过敏原磷酸丙糖异构酶(triosephosphate isomerase,TIM)为对象,研究其结构、表位、交叉关系。方法:采用悬滴法,通过优化沉淀剂浓度、蛋白浓度等条件获得TIM晶体并进行X-ray衍射,对结构进行解析,对氨基酸序列、二级结构及抗原表位以及物种间交叉进行分析。结果:我们获得1.8ATIM晶体,TIM呈(α/β)_8筒状结构,发现线性表位多位于α螺旋外侧,构象表位位于loop柔性区域,均利于与抗体接触,且线性表位多位于物种间的保守区域,构象表位关键氨基酸在五个物种间完全保守。一级结构比较发现,β折叠在多物种之间是保守的,α螺旋外侧多为可变区;二级结构比对发现,拟穴青蟹TIM序列同源性较高,使用兔抗拟穴青蟹TIM抗体对物种交叉进行验证,发现IgG结合能力存在差异;对TIM IgE表位定位。结论:本研究获得TIM晶体结构,分析TIM结构,对IgE表位定位,系统分析了表位、结构、交叉的关系,为后续结构与致敏性的研究提供理论指导。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集》期刊2019-11-13）
赵正虎,钱胜南,万静宜,唐子茹,沈双[2]（2019）在《刚地弓形虫磷酸丙糖异构酶多克隆抗体的制备及鉴定分析》一文中研究指出目的研制刚地弓形虫磷酸丙糖异构酶(TPI)兔多克隆抗体(多抗)并分析其诊断价值。方法在大肠埃希菌BL21重组表达菌表达TPI,镍柱亲和层析法纯化后与弗氏佐剂等体积混合,颈背部多点注射免疫新西兰大白兔(TPI 200μg/次,共3次)。末次免疫后2周收集兔血清, Protein A亲和层析纯化多抗。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析多抗纯度, ELISA分析多抗效价,蛋白质印迹(Western blotting)及ELISA分析多抗识别弓形虫排泄分泌抗原及纯化TPI的效果。利用多抗偶联磁珠,富集11份弓形虫感染小鼠和11份健康小鼠血清后, Dot-blot分析多抗的诊断价值,并与弓形虫循环抗原ELISA试剂盒的检测结果作比较。结果表达并纯化获得条带单一的TPI蛋白。SDS-PAGE分析结果显示,免疫兔血清经Protein A亲和纯化后获得的多抗,重链与轻链清晰可见。第3次免疫后兔血清抗体效价可达1∶280 000以上;纯化后的多抗纯度高,效价可达1∶100 000以上; Western blotting分析结果显示,纯化的多抗能识别弓形虫排泄分泌抗原中的TPI及纯化的TPI,在相对分子质量(Mr) 28 000处均出现一特异性条带; ELISA分析结果显示,纯化的多抗能结合纯化的TPI,其A450值与TPI蛋白的包被浓度呈正相关。Dot-blot结果显示, 11份感染鼠血清中10份鉴定为阳性, 1份阴性; 11份健康小鼠血清中10份鉴定为阴性, 1份假阳性。弓形虫循环抗原ELISA试剂盒检测结果显示, 11份感染小鼠血清中6份鉴定为阳性, 5份阴性; 11份健康小鼠血清均鉴定为阴性。Dot-blot与ELISA试剂盒检测结果差异无统计学意义(P> 0.05)。结论制备并纯化了弓形虫TPI多抗,该多抗具有潜在诊断价值,可用于开发免疫诊断试剂以检测弓形虫感染。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2019年03期）
邵露营,周延清,杨珂,郭萌萌[3]（2018）在《地黄磷酸丙糖异构酶基因的克隆与空间表达》一文中研究指出在已知地黄磷酸丙糖异构酶(RgTPI)基因少量片段的基础上,采用电子克隆技术克隆出RgTPI基因的完整开放阅读框(ORF),并进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR (qRTPCR)法分析其空间表达模式,为进一步研究其在糖酵解过程中的作用及其他功能的开发应用奠定基础。结果表明,克隆得到的RgTPI基因完整ORF序列全长为765 bp,编码254个氨基酸,该序列与芝麻和猴面花等植物中的TPI基因有较高的同源性。经预测发现,RgTPI为稳定的亲水性蛋白,属于ICL-KPHMT超家族的成员。该蛋白中α螺旋占46.06%,无规卷曲占28.35%,延伸链占16.93%,β转角占8.66%,是一种转移酶,没有跨膜运输功能,不是分泌性蛋白,大多存在于线粒体中。qRT-PCR结果表明,RgTPI在地黄叶中的表达量明显高于根和茎。(本文来源于《河南农业科学》期刊2018年11期）
夏菲,李梦思,刘红,曹敏杰,刘光明[4]（2018）在《拟穴青蟹磷酸丙糖异构酶构象抗原表位定位及突变体设计》一文中研究指出目的:以课题组前期成功构建的重组蛋白,即拟穴青蟹(Scylla paramamosain)磷酸丙糖异构酶(Triosephosphate isomerase)为研究对象,对TIM抗原表位进行定位并通过定点突变技术对其过敏原性进行改造。方法:通过噬菌体随机肽库展示技术结合蟹类过敏患者血清,淘选出TIM构象抗原表位并确定关键氨基酸为W_(168)、K_(237);通过基因定点突变技术,将TIM氨基酸序列中168位的Trp、237位的Lys均突变为Ala,基因测序结果表明成功获得两个TIM突变体W168A和K237A;通过体外基因重组技术,借助大肠杆菌表达载体pET28a将以上两个突变基因分别转入大肠杆菌表达宿主BL21(DE3)中,获得突变体表达菌株;对预期序列结果一致的菌株进行诱导表达,利用IPTG对重组菌株进行诱导,采用SDS-PAGE及Western blot对表达蛋白进行鉴定,结果显示通过镍柱纯化得到分子量约为28 ku的重组蛋白,该蛋白能够与兔抗拟穴青蟹TIM多克隆抗体、蟹类过敏患者血清产生阳性反应,后期会进一步探究比较TIM与其突变体的竞争关系、对效应细胞的激活能力及与蛋白构象变化分析。结论:通过对TIM的构象抗原表位进行定位,结合其关键氨基酸进行突变体设计与重组表达,为探究过敏原构象表位对影响其致敏性的重要作用及消减甲壳类水产过敏原致敏性研究鉴定奠定理论基础。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07）
彭文军,李超群,张耀刚,姜博璠,刘佳[5]（2019）在《细粒棘球绦虫磷酸丙糖异构酶抗原表位预测与分析》一文中研究指出目的利用生物信息学的方法对细粒棘球绦虫EgTPI B、T细胞表位进行预测,为细粒棘球绦虫诊断抗原的筛选提供分子生物学依据。方法采用Expasy中的protparam数据库推测EgTPI的理化性质;利用IEDB、ABCpred软件分析B细胞抗原表位。AMPHI法预测Th细胞的抗原表位;使用Jpred 4软件和SWISS-MODEL构建TPI的二、叁级结构;应用MEGA 4.0软件比对细粒棘球绦虫TPI和人类TPI、日本血吸虫TPI、肝片吸虫TPI等7种生物的序列。结果通过分析得出EgTPI二级结构中直链结构占15.6%、α螺旋占38.9%、转角结构占12.0%、其他结构占42.2%;经多序列比对,人类TPI与细粒棘球绦虫TPI—致度仅为40.08%,较大的差异更有利于形成抗原表位。预测可能的T细胞表位有16-30、71-85、98-119、142-154、178-200;可能的B细胞表位有28-39、50-60、70-80、131-139、150-159、213-231。结论 EgTPI可能形成T细胞表位区域有5个,B细胞表位的区域有6个,EgTPI抗原表位预测分析为疾病诊断的候选分子筛选奠定分子生物学理论依据。(本文来源于《中国公共卫生》期刊2019年02期）
杨帆,苏卜利,姚青,李华平,朱红惠[6]（2018）在《不同来源异戊烯基焦磷酸异构酶(IDI)和脱氧木酮糖磷酸合成酶(DXS)对重组大肠杆菌番茄红素产量的影响》一文中研究指出为获得更多异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)和脱氧木酮糖磷酸合成酶(1-deoxyxylulose-5-phosphate synthase,DXS)相关功能基因资源,本研究选取来源于大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、粘细菌(Myxococcus stipitatus)、戈壁奇球菌(Deinococcus gobiensis)的4种IDI和DXS,分别克隆到表达载体,将其与含有合成番茄红素基因的p Trc99a EBI质粒共同在大肠杆菌中进行异源表达。结果表明,来源于粘细菌的IDI和DXS可以获得最高的番茄红素产量,分别达到了10.86、7.94 mg/g DCW。协同表达经过密码子优化的IDI、DXS,番茄红素产量达到了15.26 mg/g DCW。本研究通过比较不同来源的IDI和DXS,获得了新的基因资源。(本文来源于《食品工业科技》期刊2018年18期）
李超群[7]（2017）在《细粒棘球蚴延伸因子-1和磷酸丙糖异构酶基因克隆表达及免疫诊断研究》一文中研究指出目的:1.运用生物信息学的方法对细粒棘球蚴延伸因子-1和磷酸丙糖异构酶T、B细胞表位以及各级结构进行预测,获得可取的抗原表位,对两者的免疫诊断性初步分析,了解其诊断价值。2.利用原核表达技术,通过对上述两种基因构建表达载体,获得重组蛋白,为后期免疫保护和诊断价值等研究奠定基础。方法:1.经Expasy系统预测两种基因的理化性质,使用DNAStar软件来分析蛋白亲水性、柔性区域、抗原指数及表面可及性,利用ABCpred与IEDB软件综合预测B细胞线性抗原表位,通过DNAStar软件预测T细胞表位,使用SOPMA软件预测二级结构,SWISS-MODEL网站构建叁维结构。使用DNAstar软件对Eg和人类EF-1、TPI的氨基酸序列进行比对。2.通过RT-PCR获得目的基因与克隆载体连接形成重组质粒,重组质粒与p ET-28α(+)经双酶切连接成原核表达重组质粒,表达、纯化目的蛋白。用ELISA方法分别对37例囊型包虫、29例泡型包虫患者、16例正常人的血清检出率测定,了解其诊断价值。结果:1.EgEF-1亲水性得分较高的区域有7个;6个柔性区域;抗原性指数得分较高的区域分布与柔性区域一致;表面可及性得分较高的区域较少;可能的B细胞线性表位区域是:120-130、286-295、306-320、365-378;可能的优势性T细胞表位区域是:34-48、164-177、222-244、280-290、321-330、396-407;Eg EF-1的二级结构中α螺旋占32.81%、β折叠22.54%、β转角10.94%、无规则卷曲33.71%;序列比对,Eg EF-1与人类EF-1的一致性为35.06%,Eg TPI与人类TPI的一致性为8%。Eg TPI亲水性得分较高的区域有8个;8个柔性区域;抗原性指数得分较高的区域分布与柔性区域大部分一致;表面可及性得分较高的区域分布区域相对较少;可能的B细胞线性表位的氨基酸序列为:28-39、50-60、70-80、131-139、150-159、213-231。Eg TPI二级结构中α螺旋占36%、β折叠22.00%、β转角12.00%、无规则卷曲30.00%;可能的优势性T细胞表位区域为:16-30、71-85、98-119、142-154、178-200。2.成功构建重组表达载体,诱导纯化出重组蛋白Eg EF-1的分子量在34KD左右,Eg TPI的分子量在27KD左右。ELISA结果显示,Eg EF-1血清检测阳性率为0,但OD值普遍较高,Eg TPI细粒棘球蚴病患者阳性检出率为86.48%,多房棘球蚴患者阳性检出率为72.41%,与健康人群比较,差异具有统计学意义(P<0.05),但CE和AE间差异没有显着性。结论:1.通过对抗原表位的预测,Eg EF-1有4个B细胞表位的区域、6个优势性T细胞表位区域,Eg TPI有6个可能形成B细胞表位的区域、5个优势性T细胞表位区域,这些抗原表位预示可作为免疫诊断和药物治疗靶点2.成功纯化重组蛋白后,Eg EF-1对两种病人血清检测结果无阳性例数;Eg TPI检测结果表明,细粒患者与多房患者之间存在交叉反应,Eg TPI重组蛋白无种属特异性。(本文来源于《青海大学》期刊2017-05-01）
陈仲玮,费丹霞,杨阳,刘鹏源,蔡秋凤[8]（2016）在《拟穴青蟹新型过敏原磷酸丙糖异构酶的鉴定分析》一文中研究指出利用硫酸铵盐析和柱层析对拟穴青蟹(Scylla paramamosain)进行处理,纯化得到28 ku的新型过敏原蛋白,经质谱鉴定为磷酸丙糖异构酶(triosephosphate isomerase,TIM),与中华绒螯(Eriocheir sinensis)TIM序列相似度达到93%。该过敏原蛋白能够与甲壳类过敏患者血清和兔抗克氏原螯虾多克隆抗体发生特异性反应,等电点为5.8。对热处理稳定,加热温度高于50℃时发生聚合,且多聚体仍具有免疫结合活性,p H>9.0时,对TIM免疫结合活性略有影响。在模拟胃肠液消化过程中,TIM耐受胰蛋白酶消化但不耐受胃蛋白酶消化,模拟胃液消化后的小分子片段仍保留有Ig G结合活性。综合血清学及性质分析,该磷酸丙糖异构酶是拟穴青蟹的一种新型过敏原。(本文来源于《集美大学学报(自然科学版)》期刊2016年06期）
吴华俊[9]（2016）在《松墨天牛磷酸丙糖异构酶基因的克隆及表达分析》一文中研究指出松墨天牛,Monochamus alternatus Hope(Coleoptera:Cerambycidae),是我国的重要林业害虫,主要危害马尾松(Pinus massoniana)等松属植物,也是传播毁灭性病害松材线虫病(Bursaphelench xylophilus)的媒介昆虫。磷酸丙糖异构酶(Triosephosphate isomerase,TPI)是糖酵解酶的一种,广泛存在于自然界生物体中。磷酸丙糖异构酶参与机体细胞质内的葡萄糖分解代谢,催化二羟丙酮磷酸与3-磷酸甘油醛之间的可逆反应,并且在糖酵解、糖原异生、脂肪酸合成和戊糖磷酸等包含叁糖磷酸脂代谢的途径中发挥着重要作用。本研究从松墨天牛cDNA文库中筛选出含有5′端的TPI基因片段,通过cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of c DNA ends,RACE)扩增该基因的3′端,通过软件进行拼接得到磷酸丙糖异构酶基因全长序列。本研究获得的松墨天牛磷酸丙糖异构酶基因全长为1450 bp,生物信息学软件分析表明其开放阅读框(ORF)为744 bp,编码247个氨基酸,命名为MaTPI(GenBank登录号:KX024698)。推测MaTPI分子量为26.71 kDa,等电点为5.07。MaTPI分子式为C1192H1892N320O363S6,属于亲水蛋白,不含有跨膜区域和信号肽,含有7个丝氨酸磷酸化位点和4个苏氨酸磷酸化位点。对MaTPI蛋白的二级结构及叁级结构预测,发现该蛋白以α螺旋结构和β折叠结构居多。对该蛋白的结构域进行预测,发现MaTPI蛋白含有完整的磷酸丙糖异构酶结构域,这表明MaTPI编码蛋白属于TPI家族。同源序列比对显示MaTPI与赤拟谷盗(Tribolium castaneum)、大黄粉虫(Tenebrio molitor)有80%的最高同源性,与棉铃虫(Helicoverpa armigera)等12种昆虫的同源性在70-73%之间,并含有TPI活性功能位点序列——AYEPVWAIGTG。系统发育树显示松墨天牛与赤拟谷盗和大黄粉虫在同一分枝上,而与小火蚁(Wasmannia auropunctata)等昆虫的遗传距离较远。荧光定量PCR分析显示:MaTPI在成虫的表达量高于蛹和幼虫,叁者表达量具有显着性差异(P<0.05);MaTPI在成虫腹部的相对表达量显着高于头部、胸部、足、触角和翅(P<0.05);MaTPI在幼虫各组织中的表达量是:脂肪体>体壁>血淋巴>中肠>马氏管(P<0.05)。用11种农药处理松墨天牛幼虫后,发现有3种农药(白僵菌、啶虫脒、马拉硫磷)处理后的松墨天牛MaTPI表达量出现了上调表达,有8种农药(Bt、绿僵菌、印楝素、噻虫啉、灭多威、毒死蜱、杀虫双、敌杀死)处理的表达量出现下调表达。(本文来源于《华南农业大学》期刊2016-06-01）
马芳芳,苏彦冰,张彬,李红英,韩渊怀[10]（2016）在《玉米磷酸丙糖异构酶基因的克隆及原核表达》一文中研究指出为克隆玉米(Zea mays L.)磷酸丙糖异构酶基因ZmTPI,并进行序列分析和原核表达研究,根据玉米TPI基因的cDNA全长序列设计特异引物,以玉米叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增得到了约750bp的基因编码区cDNA片段,T/A克隆后进行了序列测定及序列分析,随后将克隆到的该基因片段构建到原核表达载体PGEX-4T-1上,得到的重组表达质粒GST-ZmTPI转化Bl21进行融合蛋白的诱导表达及纯化。结果显示,玉米ZmTPI(GenBank:EU959275)cDNA全长1 216bp,753bp开放阅读框编码250个氨基酸,推测分子量26.7205kDa,理论等电点为5.12;该蛋白具有高度保守的TIM结构域,与其它高等植物的同源蛋白有很高的相似性;进化树分析表明,玉米TPI与甘蔗亲缘关系最近,处于同一进化支;SDS-PAGE检测结果显示,成功诱导表达并且纯化了与预期大小一致的融合蛋白。玉米ZmTPI蛋白的基因克隆和原核表达及纯化的成功,为进一步研究目的蛋白的酶活性质及生物学功能奠定了基础。(本文来源于《山西农业大学学报(自然科学版)》期刊2016年06期）
丙糖磷酸异构酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研制刚地弓形虫磷酸丙糖异构酶(TPI)兔多克隆抗体(多抗)并分析其诊断价值。方法在大肠埃希菌BL21重组表达菌表达TPI,镍柱亲和层析法纯化后与弗氏佐剂等体积混合,颈背部多点注射免疫新西兰大白兔(TPI 200μg/次,共3次)。末次免疫后2周收集兔血清, Protein A亲和层析纯化多抗。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析多抗纯度, ELISA分析多抗效价,蛋白质印迹(Western blotting)及ELISA分析多抗识别弓形虫排泄分泌抗原及纯化TPI的效果。利用多抗偶联磁珠,富集11份弓形虫感染小鼠和11份健康小鼠血清后, Dot-blot分析多抗的诊断价值,并与弓形虫循环抗原ELISA试剂盒的检测结果作比较。结果表达并纯化获得条带单一的TPI蛋白。SDS-PAGE分析结果显示,免疫兔血清经Protein A亲和纯化后获得的多抗,重链与轻链清晰可见。第3次免疫后兔血清抗体效价可达1∶280 000以上;纯化后的多抗纯度高,效价可达1∶100 000以上; Western blotting分析结果显示,纯化的多抗能识别弓形虫排泄分泌抗原中的TPI及纯化的TPI,在相对分子质量(Mr) 28 000处均出现一特异性条带; ELISA分析结果显示,纯化的多抗能结合纯化的TPI,其A450值与TPI蛋白的包被浓度呈正相关。Dot-blot结果显示, 11份感染鼠血清中10份鉴定为阳性, 1份阴性; 11份健康小鼠血清中10份鉴定为阴性, 1份假阳性。弓形虫循环抗原ELISA试剂盒检测结果显示, 11份感染小鼠血清中6份鉴定为阳性, 5份阴性; 11份健康小鼠血清均鉴定为阴性。Dot-blot与ELISA试剂盒检测结果差异无统计学意义(P> 0.05)。结论制备并纯化了弓形虫TPI多抗,该多抗具有潜在诊断价值,可用于开发免疫诊断试剂以检测弓形虫感染。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
丙糖磷酸异构酶论文参考文献
[1].夏菲,李梦思,曹敏杰,刘光明.拟穴青蟹磷酸丙糖异构酶晶体结构及交叉反应分析[C].中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集.2019
[2].赵正虎,钱胜南,万静宜,唐子茹,沈双.刚地弓形虫磷酸丙糖异构酶多克隆抗体的制备及鉴定分析[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2019
[3].邵露营,周延清,杨珂,郭萌萌.地黄磷酸丙糖异构酶基因的克隆与空间表达[J].河南农业科学.2018
[4].夏菲,李梦思,刘红,曹敏杰,刘光明.拟穴青蟹磷酸丙糖异构酶构象抗原表位定位及突变体设计[C].中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集.2018
[5].彭文军,李超群,张耀刚,姜博璠,刘佳.细粒棘球绦虫磷酸丙糖异构酶抗原表位预测与分析[J].中国公共卫生.2019
[6].杨帆,苏卜利,姚青,李华平,朱红惠.不同来源异戊烯基焦磷酸异构酶(IDI)和脱氧木酮糖磷酸合成酶(DXS)对重组大肠杆菌番茄红素产量的影响[J].食品工业科技.2018
[7].李超群.细粒棘球蚴延伸因子-1和磷酸丙糖异构酶基因克隆表达及免疫诊断研究[D].青海大学.2017
[8].陈仲玮,费丹霞,杨阳,刘鹏源,蔡秋凤.拟穴青蟹新型过敏原磷酸丙糖异构酶的鉴定分析[J].集美大学学报(自然科学版).2016
[9].吴华俊.松墨天牛磷酸丙糖异构酶基因的克隆及表达分析[D].华南农业大学.2016
[10].马芳芳,苏彦冰,张彬,李红英,韩渊怀.玉米磷酸丙糖异构酶基因的克隆及原核表达[J].山西农业大学学报(自然科学版).2016
论文知识图
