导读:本文包含了低温脂肪酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:脂肪,低温,耐受性,有机溶剂,性质,海洋,热稳定性。
低温脂肪酶论文文献综述
王兴吉,贾仁洁,王克芬,刘文龙[1]（2019）在《低温脂肪酶菌株的诱变筛选及酶学特性研究》一文中研究指出以本公司菌种保藏室的产脂肪酶黑曲霉菌株AG007作为出发菌株,通过常温常压等离子体(ARTP)诱变筛选得到突变株A45-72,其产脂肪酶的活力较AG007提高了86%。再对A45-72进行亚硝基胍(NTG)复合诱变,得到突变菌株GH-73,其摇瓶发酵酶活达到2 350 U/m L,较出发菌株AG007提高了1.2倍,将GH-73传到第10代,其产酶较稳定。摇瓶中添加2.5%橄榄油作为诱导剂时,产酶能力达到2 875 U/m L。通过酶学特性研究发现,其最适作用温度为30℃,且在0℃左右保留30%的活性,是一种低温脂肪酶。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2019年01期）
魏计东,于爽,张庆芳,迟乃玉[2]（2018）在《海洋低温脂肪酶菌株的筛选鉴定、诱变育种及酶学性质研究》一文中研究指出以海泥、海水为样品,经初筛、复筛得到1株脂肪酶高产菌FS119,测得酶活为17.8 U/m L。通过形态学、生理生化特征及16S rDNA序列分析,鉴定菌株FS119为液化沙雷氏菌(Serratia liquefaciens),对液化沙雷氏菌FS119进行物理化学合成诱变,筛选出1株高产诱变菌株FS119-1,该菌株遗传性能稳定,酶活达到24.9 U/m L,为原始菌株的1.4倍。该低温脂肪酶的最适反应温度为30℃,0℃时仍然有酶活;最适pH值为9,酸碱稳定性良好;K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Ba~(2+)对脂肪酶的活性有明显促进作用,Cu~(2+)、Mn~(2+)、EDTA对脂肪酶活性有严重抑制作用。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2018年15期）
刘元利,陈吉祥,李彦林,周敏,程琳[3]（2018）在《一株产低温脂肪酶沙雷氏菌的鉴定、基因表达及酶学性质》一文中研究指出采用罗丹明B平板法从青海污染原油筛选到一株脂肪酶高产菌株LHY-1。根据培养特征、生理生化及16S r DNA序列分析,初步鉴定LHY-1为沙雷氏菌。其最佳生长和产脂肪酶的碳源、氮源分别是牛肉膏和酵母粉,最适温度20℃,初始p H 7.0,在盐度9%的培养基中生长,优化培养条件后产脂肪酶可达1 326 U/m L。用特异性引物从LHY-1基因组克隆脂肪酶基因,构建表达载体p ET-28a(+)/lipase,在大肠杆菌高效表达,用NiNTA琼脂糖亲和柱纯化的蛋白分子质量为36 ku。重组脂肪酶最适温度为30℃,在4~30℃时表现出较大酶活力,属低温脂肪酶。该酶在p H 7.0~11.0范围稳定,30℃保持1 h,酶活力维持75%。Mg2+、Ca2+对酶活力有一定的促进作用。Co2+、Zn2+、SDS、PMSF、EDTA、EGTA对酶有部分抑制作用。纯化的脂肪酶能催化大豆油和乙醇酯交换反应,用于生物柴油的催化合成。(本文来源于《中国食品学报》期刊2018年06期）
苏宏飞,麦志茂,张偲[4]（2016）在《DNA改组技术提高低温脂肪酶Lip98热稳定性》一文中研究指出[目的]提高来源于海洋微生物的低温脂肪酶Lip98的热稳定性。[方法]采用DNA改组技术进行低温脂肪酶的基因改造,连接到表达载体p ET-28a中构建小突变文库。经过活性筛选产酶重组菌株。在96孔板中进行两轮热稳定筛选突变株。[结果]经过2轮筛选,获得了两个突变株P92A和I199F。其突变位点分别是274位的C变成了G和595位的A变成了T。突变株50℃下的半衰期从24 min分别延长到38 min、85 min。[结论]DNA改组有效提高Lip98的热稳定性,半衰期提高到1.5~3.5倍,为酶的分子改造提供理论依据。(本文来源于《生物技术》期刊2016年03期）
刘元利[5]（2016）在《低温脂肪酶生产菌筛选、基因克隆及其在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出脂肪酶(甘油酯水解酶,EC 3.1.1.3)是一种特殊的甘油叁酯水解酶,不仅能催化甘油叁酯水解为甘油和脂肪酸,还能水解酯类,促进酯交换和酯合成。在药物合成、食品加工、洗涤剂和化妆品等行业领域都得到了广泛应用。采用罗丹明B平板透明圈法对不同来源的样品进行筛选,共获得55株脂肪酶生产菌株,其中菌株LHY-1具有生长速度快、在低温条件下产酶量高且稳定的特点。菌株LHY-1的16S rDNA序列与嗜线虫沙雷氏菌(Serratia nematodiphila)、粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)、深红沙雷氏菌(Serratia rubidaea)、无花果沙雷氏菌(Serratia ficaria)序列相似性分别为99%、99%、98%、98%,根据生理生化分析,初步鉴定LHY-1为沙雷氏菌(Serratia sp.)。对沙雷氏菌(Serratia sp.)LHY-1的生长和产酶条件进行优化。菌株在前10h生长迅速,10h后进入稳定期,最佳产酶时间为16h。最适生长和最佳产酶的碳源和氮源分别是牛肉膏、酵母粉。在10℃-40℃生长良好,最佳产酶温度为20℃。在初始pH为4.0-10.0范围内生长良好,最佳产酶初始pH为7.0。该菌有着很高的耐盐度,盐度为9%时还生长,但最佳产酶的盐度为0。最适生长和最适产酶的装液量为30mL。对沙雷氏菌(Serratia sp.)LHY-1的脂肪酶基因克隆和表达,重组脂肪酶用Ni琼脂糖亲和柱纯化和SDS–PAGE检测,该重组脂肪酶蛋白分子量为36kDa。最适作用温度为30℃,脂肪酶在pH7.0-11.0和温度0-30℃的范围内稳定。Mg2+、Ca2+对酶活力有一定的促进作用。Co2+、Zn2+、SDS、PMSF、EDTA、EGTA对酶有部分抑制作用。菌株LHY-1的脂肪酶具有转酯能力,可催化大豆油合成生物柴油,其转酯率达到5.60%。(本文来源于《兰州理工大学》期刊2016-06-08）
曹莹莹,邓盾,张云,孙爱君,夏方亮[6]（2016）在《南海深海新颖低温脂肪酶的克隆、表达及酶学性质鉴定》一文中研究指出从南海深海放线菌Pseudonocardia antitumoralis SCSIO 01299中克隆一个脂肪酶基因lipase B5。lipase B5基因片段大小为972bp,编码的蛋白质具有323个氨基酸残基并与Pseudonocardia sp.HH130629-09中假定脂肪酶有98%的同源性。以p ET28a(+)为载体,将重组质粒转化到E.coli BL21(DE3)中,实现lipase B5高效表达,并利用Ni-NTA亲和层析纯化lipase B5。Lipase B5最适反应底物为对硝基苯酚癸酸酯(p-NPD),最适温度为30℃,最适反应p H为7.5。Lipase B5催化p-NPD水解反应的活性达到140.14U/mg,Vmax和Km分别为109.8μmol/min、0.976mmol/L,催化橄榄油的活力为32.019 7U/mg。Lipase B5在p H7.5~8.5保持良好的p H稳定性;在10~20℃低温下保持较高的酶活力,在10~40℃内具有温度稳定性。Lipase B5对大部分金属离子有很好的耐受性,低浓度的Li+、Mg2+对该酶活性有促进作用。Lipase B5对高浓度的Na Cl有很好的耐受性,在100mmol/L的Na Cl存在下,酶活性大约保持在103%。Lipase B5对多种短链醇类有机溶剂和表面活性剂有很好的耐受性,Triton X-100、Tween-80和Tween-20对lipase B5酶有激活作用。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2016年03期）
张悦[7]（2015）在《嗜冷杆菌低温脂肪酶分离纯化及表征》一文中研究指出脂肪酶是一类能催化长链甘油叁酯水解的水解酶,脂肪酶广泛应用于医疗和制药工业、食品工业、精细化学合成以及环境治理等领域。脂肪酶催化手性有机化合物合成,以及发生酯化、酸解、醇解等反应,是当今酶工程领域的研究热点。本实验室从国家海洋环境监测中心获得25株菌株,这些菌株来源于中国第四次北极科学考察的采集样品。论文研究的目的是筛选产低温脂肪酶的嗜冷细菌,分析表征嗜冷细菌脂肪酶的结构和酶学性质,便于脂肪酶的进一步开发利用。论文研究,采用维多利亚蓝和溴甲酚紫脂肪酶筛选培养基,对25株细菌进行平皿初筛,根据变色圈直径与菌落直径的比值,查选产脂肪酶的菌株；对产脂肪酶菌株进行摇瓶发酵,检测脂肪酶活性,进行复筛,确定一株产脂肪酶能力较高菌株；提取该菌株基因组,通过PCR技术获得该菌株16S rDNA序列,测序后经过序列同源性比对,构建系统发育树,发现与嗜冷杆菌属相似度达到99%,确定该菌株为嗜冷杆菌属,命名为Psychrobacter sp. ZY214。较佳产酶条件下的Psychrobacter sp. ZY214发酵液,通过40%-60%饱和硫酸铵分级盐析后获得沉淀,利用50 mM Tris-HCl (pH8.0)溶解沉淀后,采用Phenyl Sepharose FF疏水层析分离,得到SDS-PAGE电泳纯单一分离组分,活性检测为脂肪酶；LC-MS-MS质谱检测分子量为38.1 kDa,命名为Lip ZC12。Lip ZC12的最适反应温度为40℃,最适反应pH为8.0,Ca2+、Mg2+可以提高Lip ZC12的酶活力,Lip ZC12具有较强的有机溶剂耐受性,50% DMSO溶液中混合3小时,酶活性力保持95%左右。以对硝基苯基脂肪酸酯为底物,Lip ZC12的最适作用底物碳链长度为C12,Km值为13.1 mM,kcat值为1.20×103 S-1。利用脂肪酶叁联体活性中心(Ser-Asp-His)和氧负离子洞(oxyanion hole)区域的保守序列引物3种OXF、4种ACR,组合为12种引物,以Psychrobacter sp. ZY214基因组DNA为模板,通过PCR方法进行脂肪酶基因片段扩增；通过保守序列PCR产物的测序结果与已知脂肪酶序列对比分析,确认Lip ZC12保守序列与Psychrobacter sp. JCM 18901脂肪酶前体具有相似性；利用Psychrobacter sp. JCM 18901作为参照基因组设计3对引物,通过PCR扩增获得脂肪酶全长基因,氨基酸序列与Psychrobacter sp. JCM18901脂肪酶前体相比,第32位I变为M,第182位N变为D。本论文筛选出一株产脂肪酶菌株,对嗜冷杆菌脂肪酶进行分离纯化以及基因、酶学性质表征。(本文来源于《大连理工大学》期刊2015-05-01）
郝文惠,王凡羽,郭玉,汤熙翔[8]（2014）在《南极深海沉积物中产低温脂肪酶菌株的筛选与基因克隆》一文中研究指出在10℃恒温培养条件下,从第29次南极科学考察获得的南极深海沉积物样品中分离筛选到产脂肪酶细菌3株,产脂肪酶真菌1株,对其进行分子生物学鉴定,确定为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas arctica)、芽孢杆菌属(Bacillus pumilus)、Glaciecola sp.以及白冬孢酵母属(Leucosporidium sp.).通过测定各酶的最适反应温度,获得产低温脂肪酶芽孢杆菌XZ18,该菌所产脂肪酶最适反应温度为30℃,在0℃仍有部分活性.从NaCl浓度和pH值2个条件对产酶条件进行研究,最终确定了该菌最适产酶NaCl浓度5.0%、最适产酶pH值为6,最高产酶量为4.65 U/cm3.通过PCR扩增,获得了脂肪酶全长序列,对该序列进行系统发育分析,发现该脂肪酶基因处于较独立的分支.(本文来源于《应用海洋学学报》期刊2014年03期）
梁秋艳,陈计峦,杨召霞,黄培,董娟[9]（2014）在《天山冰川假单胞菌产低温脂肪酶发酵条件优化及酶学性质研究》一文中研究指出针对一株从天山一号冰川沉积层中得到的假单胞菌T1-39,优化其产低温脂肪酶发酵条件,研究低温脂肪酶部分酶学性质,采用p-NPP法测定酶活力,设计产酶培养基成分及培养条件。确定产酶培养基成分为:葡萄糖5 g/L、胰蛋白胨5 g/L、(NH4)2SO4 5 g/L、K2HPO4 2 g/L、橄榄油乳化液50 mL/L、MgSO4·7H2O 0.5 g/L。优化后培养条件为250 mL摇瓶装液量为20 mL,培养温度15℃,初始pH为9。在优化发酵条件下,菌株发酵液低温脂肪酶酶活力可达到9.77 U/mL,较优化前(3.14 U/mL)提高了3.11倍。粗酶液最适反应温度为30℃,在60℃处理30 min后仍有40%的酶活,最适pH值为9,Mg2+、Zn2+、Ni2+、Ba2+对粗酶液有激活作用,而Sn2+、Cu2+对酶活均有不同的抑制作用。(本文来源于《食品科技》期刊2014年06期）
梁秋艳[10]（2014）在《低温脂肪酶产生菌株的筛选、发酵条件优化及其酶学性质研究》一文中研究指出目的：低温脂肪酶因具有低温高催化活性，对热敏感以及耐有机溶剂等特性，在食品、洗涤、脂类加工、制药以及低温环境修复等方面有着广泛的应用前景。目前低温脂肪酶大多来自于低温微生物，而自然界中分布着极其丰富的各类极端环境，在这些极端环境中蕴藏着类型多样的极端环境微生物资源。低温微生物会为了适应低温环境而合成、分泌大量的低温酶类。本文旨在从天山冰川冻土层中分离产低温脂肪酶菌株，并挑选一株高产菌株，进行初步鉴定及其产低温脂肪酶的条件探讨。为挖掘不同环境下低温脂肪酶产生菌，获得具有新特性的高酶活力的脂肪酶奠定更坚实的基础。方法：本实验依托新疆独特的地理环境，利用Rhodamine-B、Tween-80不同的培养基对采自新疆天山一号冰川冻土层中的菌株进行分离、纯化，结合棕榈酸对硝基苯酯（p-NPP）比色法，筛选出产低温脂肪酶酶活较高的菌株，挑选一株研究其生长特性及常规生理生化特性，并结合16S rDNA基因序列初步确定其所属菌属。再利用响应面法对菌株产酶条件进行优化，最后对所产低温脂肪酶进行初步纯化及其酶学性质研究。结论：1、本实验利用Rhodamine-B、Tween-80不同的培养基从新疆天山一号冰川冻土中，分离筛选得到产脂肪酶的菌株有75株，经过进一步的复筛，获取一株产脂肪酶酶活力较高的菌株，经过形态学观察、生理生化实验以及16S rDNA序列同源性分析，该菌株为假单胞菌属，命名为Pseudomonas sp.T1-39。2、通过菌株最适生长温度等实验，其最适生长范围为16℃~30℃，属于耐冷菌范畴。在摇瓶发酵的基础上，对Pseudomonas sp.T1-39产酶条件进行了优化。进行单因素实验，探究碳源、氮源、金属离子、诱导剂以及温度、初始pH、发酵时间等不同因素对产酶的影响，确定最佳产酶培养基的单因素水平：可溶性淀粉5.0g/L，胰蛋白胨：硫酸铵（1:1）10.0g/L，橄榄油乳化液40mL/L，MgSO4·7H2O2.0g/L，K2HPO42.0g/L。培养温度16℃，培养基初始pH值9.0，接种量2%，装样量20mL/250mL，发酵培养32h达到产酶高峰，另摇床转速在180rpm。3、单因素结果的基础上，利用Plackett-Burman设计筛选出对发酵酶活影响最大的叁个因素：温度、胰蛋白胨和初始pH。再通过最陡爬坡实验确定最大产酶区域，并以该区域为中心点进行Box-Benhnken响应面设计。确定出实际值，温度17℃，初始pH为8.5，胰蛋白胨4.6g/L，优化后脂肪酶的酶活达10.71U/mL。是优化前的3.42倍。4、对Pseudomonas sp.T1-39所产脂肪酶进行硫酸铵沉淀，并对初步纯化后的脂肪酶进行酶学性质研究。结果表明：Lip-39的最适反应温度为30℃，在20℃处理1h后，酶活仍保持70%左右，60℃处理30min酶活不到40%，对热敏感，属于低温脂肪酶脂肪酶范畴。最适pH为9.0，pH在7.0~9.0范围内酶活相对比较稳定。金属离子Mg2+、Zn2+、Ni2+、Ba2+对该酶有明显的激活作用，10mmol/L的金属离子螯合剂对Lip-39酶有着强烈的激活作用。有机溶剂正己烷对酶的活力有显着的激活作用。(本文来源于《石河子大学》期刊2014-06-01）
低温脂肪酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以海泥、海水为样品,经初筛、复筛得到1株脂肪酶高产菌FS119,测得酶活为17.8 U/m L。通过形态学、生理生化特征及16S rDNA序列分析,鉴定菌株FS119为液化沙雷氏菌(Serratia liquefaciens),对液化沙雷氏菌FS119进行物理化学合成诱变,筛选出1株高产诱变菌株FS119-1,该菌株遗传性能稳定,酶活达到24.9 U/m L,为原始菌株的1.4倍。该低温脂肪酶的最适反应温度为30℃,0℃时仍然有酶活;最适pH值为9,酸碱稳定性良好;K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、Ba~(2+)对脂肪酶的活性有明显促进作用,Cu~(2+)、Mn~(2+)、EDTA对脂肪酶活性有严重抑制作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
低温脂肪酶论文参考文献
[1].王兴吉,贾仁洁,王克芬,刘文龙.低温脂肪酶菌株的诱变筛选及酶学特性研究[J].安徽农业科学.2019
[2].魏计东,于爽,张庆芳,迟乃玉.海洋低温脂肪酶菌株的筛选鉴定、诱变育种及酶学性质研究[J].江苏农业科学.2018
[3].刘元利,陈吉祥,李彦林,周敏,程琳.一株产低温脂肪酶沙雷氏菌的鉴定、基因表达及酶学性质[J].中国食品学报.2018
[4].苏宏飞,麦志茂,张偲.DNA改组技术提高低温脂肪酶Lip98热稳定性[J].生物技术.2016
[5].刘元利.低温脂肪酶生产菌筛选、基因克隆及其在大肠杆菌中的表达[D].兰州理工大学.2016
[6].曹莹莹,邓盾,张云,孙爱君,夏方亮.南海深海新颖低温脂肪酶的克隆、表达及酶学性质鉴定[J].中国生物工程杂志.2016
[7].张悦.嗜冷杆菌低温脂肪酶分离纯化及表征[D].大连理工大学.2015
[8].郝文惠,王凡羽,郭玉,汤熙翔.南极深海沉积物中产低温脂肪酶菌株的筛选与基因克隆[J].应用海洋学学报.2014
[9].梁秋艳,陈计峦,杨召霞,黄培,董娟.天山冰川假单胞菌产低温脂肪酶发酵条件优化及酶学性质研究[J].食品科技.2014
[10].梁秋艳.低温脂肪酶产生菌株的筛选、发酵条件优化及其酶学性质研究[D].石河子大学.2014
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