Ac-SDKP对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

Ac-SDKP对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

论文摘要

目的:观察氮乙酰丝氨酰天冬氨酰赖氨酰脯氨酸(Acetyl-N-ser-asp-lys-pro,Ac-SDKP)对肾小管上皮细胞表达胸腺肽β4(Thymosinβ4,Tβ4)及上皮间充质转分化(Epithelial-mesenehymal transition,EMT)的影响,探讨Ac-SDKP与肾小管上皮细胞EMT及Ac-SDKP之间的关系。方法:用转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导大鼠肾小管上皮细胞发生EMT后,再予外源性不同浓度的Ac-SDKP干预,通过细胞免疫组化染色的方法检测肾小管上皮细胞Tβ4和α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)表达。结果:1.TGF-β1(5 ng/mL)刺激48 h后肾小管上皮细胞形态明显拉长,呈梭长形,似成纤维细胞;予Ac-SDKP(10 nmol/L)干预后,细胞形态似有恢复类圆形,但未恢复至正常的细胞形态;2.在空白组,Tβ4在肾小管上皮细胞胞浆及胞核内表达,平均光密度(OD)值为(0.203±0.009);α-SMA仅在肾小管上皮细胞胞浆内微量表达,OD值为(0.184±0.007);TGF-β1刺激组Tβ4和α-SMA表达显著升高,OD值分别为(0.346±0.016)和(0.345±0.008),与空白组比,差异均有统计学意义(P<0.05);3.TGF-β1+卡托普利组Tβ4及α-SMA表达减少,OD值分别为(0.337±0.021)和(0.334±0.023),与TGF-β1刺激组比,差异均无统计学意义(P>0.05);4.Ac-SDKP为0.1、1、10nmol/L时,Tβ4和α-SMA表达均下降,且与TGF-β1刺激组比较差异均有统计学意义(P<0.05),其中10 nmol/L下降最显著,OD值分别为(0.237±0.008)和(0.225±0.018);5.肾小管上皮细胞中Tβ4和α-SMA的表达量之间存在直线正相关关系(r=0.995,P<0.01)。结论:TGF-β1诱导肾小管上皮细胞EMT后,Tβ4在肾小管上皮细胞内表达明显上调,予不同浓度的Ac-SDKP刺激后,Tβ4表达下调,在10 nmol/L Ac-SDKP时下降最为显著。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 主要试剂
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细胞的传代及药物刺激
  •     1.2.2 培养细胞的Envision免疫组化二步法实验步骤
  •       1.2.2.1 细胞爬片
  •       1.2.2.2 细胞免疫组化染色
  •     1.2.3 Tβ4和α-SMA细胞免疫组化染色结果的半定量分析
  •   1.3 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 肾小管上皮细胞的形态改变
  •   2.2 细胞免疫组化染色结果
  •     2.2.1 肾小管上皮细胞中Tβ4的表达变化
  •     2.2.2 肾小管上皮细胞中α-SMA的表达变化
  •     2.2.3 Tβ4和α-SMA在TGFβ-1刺激大鼠肾小管上皮细胞EMT后表达量的相关性分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 黄凤璋,覃玉花,梁鸣

    关键词: 肾小管上皮细胞转分化,胸腺肽,转化生长因子

    来源: 广州医科大学学报 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 泌尿科学

    单位: 广州医科大学附属市一人民医院肾内科,广西医科大学第四附属医院风湿免疫科

    基金: 2017年广东省自然科学基金(2017A030313566),2017年度广州市科技计划项目(201707010290)

    分类号: R692

    页码: 5-9+12

    总页数: 6

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