导读:本文包含了耳毒性论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:毒性,氨基,糖苷,活性氧,内耳,线粒体,类抗生素。
耳毒性论文文献综述
赵艳,蒋军,陈学敏,徐瑾,薛鑫淼[1]（2019）在《耳毒性药物的种类及其对内耳的损伤机制与预防》一文中研究指出目的:通过总结归纳耳毒性药物的损伤机制,提出预防方法减少耳毒性药物的损伤。方法:通过检索近十年的文献,总结归纳氨基糖苷类抗生素、抗肿瘤药、解热镇痛抗炎药、抗疟药、袢利尿药对内耳的损伤机制。结果:药物耳毒性损伤大部分是不可逆的,而且治疗难度大,特别是耳聋和耳鸣症状难以治愈。结论:医务人员应该合理、慎重选用耳毒性药物,做好用药期间和用药后检测等综合措施来预防和减轻耳毒性药物的损伤。(本文来源于《西北国防医学杂志》期刊2019年11期）
管连城,陈雨佳,张孟之,王宗陵,任慧敏[2]（2019）在《从维生素D与中医肾藏精、耳聋的关系探讨氨基糖苷类抗生素耳毒性机制》一文中研究指出从维生素D与中医肾藏精、耳聋的关系探讨氨基糖苷类抗生素耳毒性机制。维生素D缺乏导致耳聋的机制与氨基糖苷类抗生素耳毒性机制相似;中医方面,肾虚与氨基糖苷类抗生素耳毒性存在相关性,中医"肾精"功能与维生素D的生物学功效存在较大的相似性和关联性,维生素D缺乏与肾虚证有着共同的病理改变,从而提出维生素D可能参与氨基糖苷类抗生素耳毒性机制。(本文来源于《中医药导报》期刊2019年17期）
胡超,邹焱,谭天宝,李嘉豪,杨纪亮[3]（2019）在《顺铂对小儿高危神经母细胞瘤耳毒性的临床观察》一文中研究指出目的分析顺铂对于小儿高位神经母细胞瘤(NB)的耳毒性。方法 80例高位神经母细胞瘤患儿,均进行化疗治疗,共划分为7个疗程,第1、2、4、6个疗程进行CVA方案(环磷酰胺、长春新碱、阿霉素、美司那)治疗,其他疗程进行CVP方案(依托泊苷、顺铂)治疗。比较患儿治疗前体液免疫指标、细胞免疫指标水平及听力损失发生情况。结果治疗后,患儿的免疫球蛋白E(IgE)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)水平分别为(187.52±9.62)、(1.45±1.02)、(9.60±2.52)、(1.52±0.62)g/L,均显着优于治疗前的(192.52±11.05)、(2.30±1.25)、(12.52±3.02)、(2.23±0.94)g/L,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,患儿的T辅助淋巴细胞(THL)、自然杀伤细胞(NK)、T抑制淋巴细胞(TSL)、外周血总T淋巴细胞(TTL)水平分别为(37.52±8.65)%、(32.12±4.58)%、(51.26±5.24)%、(78.52±5.92)%,均显着优于治疗前的(15.25±8.52)%、(9.58±4.45)%、(26.36±7.25)%、(69.82±5.62)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后患儿的听力损伤比率17.50%显着高于治疗前的0,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论顺铂对于神经母细胞癌患儿在治疗过程中的听力并无严重影响,听力障碍发生率比较低,但是顺铂对患儿听力的损伤是不可逆的,在对患儿治疗过程中要密切的检测听力,从而及时预防、发现和治疗。(本文来源于《中国现代药物应用》期刊2019年15期）
杨佳慧,呼佩霓,官颖,张哲,石丽娟[4]（2019）在《川芎嗪拮抗顺铂耳毒性损伤耳蜗STAT1表达的实验研究》一文中研究指出目的:探讨川芎嗪拮抗顺铂耳毒性损伤的作用机制。方法:将40只小鼠随机分为3组:对照组、顺铂组(CDDP组)、川芎嗪+顺铂组(TMP+CDDP组)。通过腹腔进行给药,连续用药10 d。于用药前后分别进行听性脑干电位(ABR)监测。10 d后断头处死并制备耳蜗标本,进行耳蜗柯蒂氏器、血管纹、螺旋神经节STAT1免疫组化染色,并用图像分析技术进行灰度值分析。结果:顺铂组ABR阈值明显高于对照组,提示耳毒性损伤的发生;而TMP+CDDP组ABR阈值明显低于CDDP组(P <0. 01)。CDDP组耳蜗柯蒂氏器、血管纹、螺旋神经节STAT1蛋白表达水平明显高于对照组,而TMP+CDDP组STAT1蛋白表达虽然高于对照组,但是明显低于CDDP组。结论:川芎嗪拮抗顺铂耳毒性损伤可能与STAT1蛋白表达下降相关。(本文来源于《辽宁中医杂志》期刊2019年06期）
陈阳[5]（2019）在《氨基糖甙类抗生素治疗耳毒性研究》一文中研究指出氨基糖甙类抗生素的抗菌谱较广,对革兰阴性需氧杆菌导致的感染具有显着效果,但是该种药物易导致肾毒性和耳毒性,从而限制药物的应用。因此,本次研究对氨基糖甙类抗生素治疗耳毒性研究进行相关综述。(本文来源于《中国实用医药》期刊2019年15期）
于晓宇[6]（2019）在《c-Myb及Paeoniflorin对氨基糖苷类耳毒性作用及机制研究》一文中研究指出第一部分c-Myb在内耳的表达及对氨基糖苷类耳毒性的作用研究研究目的听觉障碍严重影响人们的生活,给家庭和社会带来沉重负担。据世界卫生组织估计,全世界约有3.6亿人群罹患听觉障碍。毛细胞在听力的产生过程中扮演重要角色,它可将声音由机械振动转换为神经冲动,进而产生听力。毛细胞的退化或损伤是听觉障碍产生的重要原因,而噪音、药物、年龄等多种因素均可造成毛细胞损伤。氨基糖苷类药物广泛应用于临床治疗革兰式阴性细菌感染,但其耳毒性如耳鸣、听力损失和前庭功能障碍等严格限制了其临床应用。新霉素为氨基糖苷类药物的一员,具有杀菌作用,其抗菌谱较为广泛,包括化脓性球菌全部菌株、多种革兰式阳性细菌和革兰式阴性细菌。新霉素的耳毒性主要表现为耳蜗毒性,前庭毒性少见,可导致严重的双侧感音神经性聋。目前认为新霉素可诱导毛细胞产生过多的活性氧簇,干扰细胞内氧化还原平衡,进而激活内源性凋亡通路,致使毛细胞死亡。c-Myb是Myb家族的一员,属高度保守的转录因子,在细胞的增殖、分化及凋亡中扮演重要角色。在多种组织细胞中,Bcl-2被认为是c-Myb的靶基因,c-Myb可通过调节Bcl-2的表达进而调控凋亡通路;而且c-Myb过表达会使细胞内产生较少的活性氧簇,进而减少氧化应激。目前已有文献报道c-Myb表达于鸡胚内耳听板中,与Soxl0协同调控鸡胚内耳听板发育,但其在哺乳动物内耳中的表达和功能尚未可知。我们的研究目的在于:(1)明确c-Myb在小鼠基底膜及HEI-OC1细胞中的表达情况;(2)探讨c-Myb与新霉素耳毒性的相关性;(3)探讨在HEI-OC1细胞中下调c-Myb是否会改变其对新霉素的敏感性及潜在机制。研究方法1.取出生后1天、7天、11天、14天及30天的C57BL/6小鼠,运用免疫荧光染色从铺片和冰冻切片两个角度定位c-Myb在基底膜上的表达,Myosin 7a为毛细胞标记物,Sox2为支持细胞标记物。2.取C57BL/6小鼠新鲜耳蜗基底膜组织,提取mRNA和蛋白质,qRT-PCR和western blot法检测c-Myb在生后1天、7天、1 1天、14天和30天的表达变化。3.免疫荧光、PCR及western blot法确定c-Myb在HEI-OC1细胞中的表达情况,Myosin 7a为毛细胞标记物。4.为建立小鼠耳聋动物模型,将C57BL/6小鼠随机分为两组,于生后8-14天分别注射新霉素(200 mg/kg)及等量生理盐水,生后17天运用免疫荧光和western blot法检测新霉素组与对照组c-Myb表达水平的变化。5.HEI-OC1细胞给予2 mM新霉素处理,于0 h、4 h、8 h、12 h和24 h检测c-Myb表达水平的变化。6.运用shRNA转染法下调HEI-OC1细胞中c-Myb表达,免疫荧光、qRT-PCR和western blot法检测shRNA的转染效率。7.HEI-OC1细胞成功转染后,给予0 mM、1 mM、1.5 mM和2 mM新霉素分别处理24 h或48 h,MTT法检测处理后HEI-OC1细胞存活率。8.HEI-OC1细胞转染后48h,2 mM新霉素处理24h后,应用流式分析、TUNEL染色检测HEI-OC1细胞凋亡改变。9.HEI-OC1细胞转染后48 h,2 mM新霉素处理24 h后,qRT-PCR法检测Apaf-1、Bax、caspase-3和caspase-9的mRNA表达,western blot 检测cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和Bcl-2的蛋白表达水平。10.HEI-OC1细胞转染后48h,2 mM新霉素处理24 h后,MitoSOX染色和流式分析法检测细胞内活性氧簇变化。11.HEI-OC1细胞转染后48 h,western blot法检测HEI-OC1细胞中Bcl-2蛋白水平。研究结果1.基底膜铺片和耳蜗切片的免疫荧光结果提示c-Myb存在于哺乳动物内耳中,且特异性地表达于内耳毛细胞。2.qRT-PCR和western blot结果表明c-Myb在内耳的表达具有时间依赖性,生后14天为其表达高峰点。3.免疫荧光、PCR和western blot结果显示,c-Myb表达于HEI-OC1细胞系中。4.免疫荧光和western blot结果显示,C57BL/6小鼠给予新霉素处理后,其内耳毛细胞中c-Myb表达较对照组显着降低(**p<0.01)。5.HEI-OC1细胞给予新霉素处理后,免疫荧光、qRT-PCR和estern blot结果显示新霉素处理组c-Myb表达显着降低,且具有时间依赖性。6.HEI-OC1细胞给予shRNA转染,免疫荧光、qRT-PCR和western blot结果显示shRNA-Myb组c-Myb表达水平明显低于shRNA-Control组(***p<0.001)。7.转染后HEI-OC1细胞给予新霉素损伤,随着新霉素浓度的提高,HEI-OC1细胞存活率降低,且新霉素处理48 h组其细胞存活率明显低于24 h组;不同浓度和时间条件下shRNA-Myb组细胞存活率均低于shRNA-Control组(*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001)。8.流式分析及TUNEL染色显示,新霉素处理后shRNA-Myb组HEI-OC1细胞凋亡率较shRNA-Control组显着提高(**p<0.01,***p<0.001)。9.qRT-PCR和western blot结果表明,新霉素处理后shRNA-Myb组Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和Apaf-1 表达增高,Bcl-2表达降低。10.HEI-OC1细胞转染下调c-Myb表达,不给予新霉素损伤时,Bcl-2表达明显降低。11.MitoSOX染色显示,新霉素处理后shRNA-Myb组细胞内活性氧簇水平较shRNA-Control组明显升高。研究结论本研究首次发现c-Myb存在于哺乳动物内耳,特异性地表达于内耳毛细胞及HEI-OC1细胞中,且其表达具有时间依赖性。新霉素损伤后内耳毛细胞和HEI-OC1细胞中c-Myb表达降低,提示c-Myb与新霉素耳毒性密切相关,在正常内耳毛细胞和HEI-OC1细胞中可能起保护作用。在HEI-OC1细胞中下调c-Myb表达会使抗凋亡因子Bcl-2水平降低,在给予新霉素损伤后,细胞内活性氧水平明显升高,促凋亡因子Bax、Apaf-1、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9表达增高,抗凋亡因子Bcl-2表达进一步降低,HEI-OC1细胞凋亡增加,存活率降低。总而言之,c-Myb低表达会增加HEI-OC1细胞对新霉素的敏感性,c-Myb可能为预防氨基糖苷类耳毒性的新靶点。第二部分Paeoniflorin对氨基糖苷类耳毒性的作用及机制研究研究目的芍药苷(Paeoniflorin,PF)为一种单萜苷复合物,由芍药提取而来,具有镇痛、抗炎、抗抑郁等多种生物活性。近期研究表明,PF同时具有抗氧化活性和抗凋亡活性。氨基糖苷类药物广泛应用于临床治疗革兰氏阴性细菌感染,但听力损失、耳鸣及前庭功能障碍等耳毒性严格限制其临床应用。新霉素为氨基糖苷类药物一员,抗菌谱广泛,能够杀死多种革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌及化脓性球菌。其耳毒性主要表现为耳蜗毒性,前庭毒性少见,可导致严重的双侧感音神经性聋。据文献报道新霉素耳毒性最常见的原因是毛细胞损害,新霉素可诱导毛细胞内活性氧产生过量,影响细胞内氧化还原平衡,进而激活内源性凋亡通路,致使毛细胞死亡,而MAPK蛋白家族为此过程的重要参与因子。目前大量研究证实PF在细胞中发挥抗氧化和抗凋亡作用,但其在新霉素耳毒性中的作用尚未可知。本研究旨在研究PF在新霉素耳毒性中的作用及潜在机制。研究方法1.体内实验中,取出生后8天C57BL/6小鼠,新霉素组连续7天皮下注射200 mg/kg新霉素,PF组仅给予30 mg/kg PF腹腔注射,PF+新霉素组先给予30 mg/kg PF腹腔注射,再给予200 mg/kg新霉素连续注射7天,对照组仅给予等量生理盐水,出生后30天解剖出耳蜗。2.运用免疫荧光染色法鉴定体内实验中各组小鼠毛细胞形态、排列及存活数变化。3.运用TUNEL/Myosin 7a染色法鉴定体内实验中各组小鼠毛细胞凋亡改变。4.体外实验取生后3天C57BL/6小鼠的基底膜进行培养,新霉素组给予2 mM新霉素处理24 h,PF组给予30 μM PF处理,PF+新霉素组给予30 μM PF预处理2 h,后新霉素处理24 h,对照组不与处理。5.免疫荧光染色法鉴定体外试验各组毛细胞形态、排列及存活数变化。6.TUNEL/Myosin 7a染色法鉴定体外实验各组小鼠毛细胞凋亡改变。7.Western blot法鉴定体内及体外实验各组凋亡因子的变化。8.免疫荧光染色及western blot法鉴定小鼠基底膜内p-ERK表达变化。9.MitoSOX染色法鉴定小鼠毛细胞内活性氧的变化。研究结果1.免疫荧光染色结果示,对照组与PF组毛细胞排列整齐、无缺失;新霉素组毛细胞排列紊乱、严重缺失;PF+新霉素组毛细胞形态尚可、缺失较少。2.剩余毛细胞计数显示,PF组与对照组毛细胞无明显缺失,新霉素组毛细胞较对照组明显减少(#p<0.05),PF+新霉素组毛细胞剩余数高于新霉素组(*p<0.05)。3.TUNEL染色显示,新霉素组毛细胞凋亡较对照组明显增高,PF+新霉素组毛细胞凋亡较新霉素组明显降低(*p<0.05)。4.Western blot结果显示,新霉素组cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白水平明显高于对照组,而Bcl-2表达低于对照组(#p<0.05);PF+新霉素组cleaved caspase-3和cleaved caspase-9表达低于新霉素组,而Bcl-2表达高于新霉素组(*p<0.05)。5.免疫荧光和western blot结果显示,新霉素组p-ERK表达高于对照组(##p<0.01),PF+新霉素组p-ERK表达低于新霉素组(*p<0.05)。6.MitoSOX染色显示新霉素组活性氧水平高于对照组,PF+新霉素组活性氧水平低于新霉素组。研究结论新霉素诱导的毛细胞损伤与活性氧过量、ERK通路活化和线粒体凋亡激活密切相关。PF可通过减少活性氧产生、降低ERK通路活化和抑制线粒体凋亡途径保护毛细胞免受新霉素损伤。我们的研究提示PF可能为预防氨基糖苷类耳毒性的新型药物。(本文来源于《山东大学》期刊2019-05-21）
杨倩倩[7]（2019）在《PINK1在调控顺铂及庆大霉素耳毒性中的机制研究》一文中研究指出第一部分PINK1在顺铂所致耳毒性中的作用机制研究Study on the Mechanism underlying the actions of PINK1 in Cisplatin-induced Ototoxity研究目的:临床上行之有效且应用广泛的化疗药——顺铂,能够产生以耳鸣、耳聋为主的副作用,其耳毒性具有不可逆性,因而极大地限制了其临床应用。顺铂的耳毒性机制复杂,研究表明主要涉及活性氧(ROS)的累积增加、线粒体功能障碍、细胞自噬和细胞凋亡等,但其确切机制尚不明了。同源性磷酸酶-张力蛋白诱导的激酶1(phosphatase and tensin homologue(PTEN)-induced putative kinase 1,PINK 1)作为一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在对抗外源性氧化胁迫、线粒体稳态调节、减轻内质网应激、协调细胞内运输等方面发挥广泛的调控作用。目前PINK1在耳科学领域还没有研究,本研究旨在探索PINK 1在C57BL/6小鼠耳蜗及HEI-OC1细胞系中的表达情况,在此基础上,探究其在顺铂所致耳毒性中是否发挥一定的调控作用,从而阐明顺铂耳毒性的新机制,为顺铂耳毒性的预防治疗提供新思路。实验方法:(1)选取新生4天、2个月的成年C57BL/6小鼠及HEI-OC1细胞,以脑组织为阳性对照,应用免疫荧光法观察PINK1在C57BL/6小鼠耳蜗各个部位的表达情况,并应用WB法对其在耳蜗毛细胞、神经元及HEI-OC1细胞内的表达情况进行半定量分析。(2)CCK8法检测不同浓度顺铂对HEI-OC1细胞活力的影响,筛选出有效的药物浓度及作用时间。(3)1010 DCFH-DA或5 μM Mito-SOX Red染色,流式细胞法及荧光显微镜观察法检测顺铂及顺铂联合应用ROS抑制剂2 mM NAC或40 μg/ml PEG-catalase刺激下ROS产生水平(联合处理组需先用ROS抑制剂预处理1-2h,后将抑制剂与顺铂联合加入)。(4)WB法检测顺铂及顺铂联合应用ROS抑制剂NAC或PEG-catalase刺激后,细胞内PINK1的表达情况,免疫荧光法检测PINK1下游分子parkin的形态、分布及颗粒数目,罗丹明123及TMRM染色,流式细胞法及荧光显微镜观察法检测各组线粒体膜电位情况。(5)Tom 20、Mitotracker-deep Red及Lamp-1共定位标识线粒体自噬,并通过WB法、免疫荧光法、TUNEL法及流式细胞法检测凋亡相关蛋白p-JNK及细胞凋亡情况。(6)应用PINK1-siRNA沉默其在HEI-OC1中的表达,WB法、免疫荧光法及流式细胞法检测PINK1沉默情况下,顺铂诱导细胞自噬及JNK相关凋亡水平的变化。(7)应用PINK1-siRNA沉默其在HEI-OC1中的表达,顺铂联合应用自噬抑制剂5 mM 3-MA或JNK信号通路抑制剂10 μM SP(联合处理组需先用抑制剂预处理1-2h,后将抑制剂与顺铂联合加入),CCK8法检测细胞的生存率。(8)体外培养小鼠耳蜗基底膜,WB法、免疫荧光法、TUNEL法检测顺铂及顺铂联合应用ROS抑制剂NAC或PEG-catalase刺激下PINK1的表达变化、parkin的形态分布、组织内ROS水平、毛细胞线粒体膜电位情况、自噬及凋亡情况。(9)体外培养小鼠耳蜗螺旋神经节神经元,WB法、免疫荧光法、TUNEL法检测顺铂及顺铂联合应用ROS抑制剂NAC或PEG-catalase刺激下PINK1的下游分子parkin的形态分布、组织内ROS水平、神经元线粒体膜电位情况、自噬及凋亡情况。实验结果:(1)PINK1在C57BL/6小鼠耳蜗HCs、SGNs、血管纹和HEI-OC1细胞的细胞质中广泛点状表达,值得注意的是,出生后第4天(P4)小鼠耳蜗HCs和SGNs的表达水平高于成年小鼠,我们后续将以新生小鼠耳蜗及HEI-OC1细胞为主要研究材料。(2)30 μM顺铂处理HEI-OC1细胞能够引起时间依赖性活性氧(ROS)的形成,表现为DCFH-DA及Mito-SOX Red 阳性细胞比例逐步增加;顺铂联合应用活性氧清除剂NAC或H202抑制剂PEG-catalase能够有效或部分抑制细胞内ROS的生成。(3)30 μM顺铂处理HEI-OC1细胞能够引起线粒体膜电位的损伤;顺铂联合应用活性氧清除剂NAC或H202抑制剂PEG-catalase能够减轻线粒体膜电位的损伤。(4)30μ顺铂处理HEI-OC1细胞能够引起PINK1的表达呈波动性变化,及其下游parkin分子的聚集、线粒体自噬的形成和p-JNK相关的细胞凋亡;抑制ROS水平能够减少parkin颗粒数目、线粒体自噬及p-JNK相关的细胞凋亡程度。(5)干扰HEI-OC1细胞内的PINK1表达,能够减轻顺铂所致的PINK1信号通路的激活、细胞自噬,但是p-JNK相关凋亡水平增加。(6)SP抑制JNK信号通路能够提高细胞存活率,3-MA抑制细胞自噬能够降低细胞存活率。(7)顺铂处理体外培养的P4小鼠耳蜗基底膜,能够引起毛细胞内ROS水平增加、线粒体膜电位的受损、PINK1/parkin信号通路的激活、自噬及凋亡水平的增加;联合应用ROS抑制剂能够减轻毛细胞内ROS水平、线粒体膜电位的受损、PINK1/parkin信号通路的激活、自噬及凋亡水平。(8)顺铂处理体外培养的P4小鼠耳蜗蜗轴,能够引起SGNs内ROS水平增加、线粒体膜电位的受损、PINK1/parkin信号通路的激活、自噬及凋亡水平的增加;联合应用ROS抑制剂能够减轻毛细胞内ROS水平增加、线粒体膜电位的受损、PINK1/parkin信号通路的激活、自噬及凋亡水平。结论:首次将PINK1在C57BL/6小鼠耳蜗内进行定位,并初步探讨了 PINK1在顺铂所致耳毒性中的调节功能,结果表明,PINK1信号通路可以通过激活线粒体自噬及抑制p-JNK相关的凋亡途径,起到对抗顺铂引起的损伤作用;并且PINK1信号通路的激活程度受顺铂所诱导的ROS水平影响。第二部分PINK1在庆大霉素所致耳毒性中的机制研究Study of the Mechanism of PINK1 in Gentamicin(GM)-induced Ototoxity研究目的:包括庆大霉素在内的氨基糖苷类抗生素因其抗菌谱广及价格低廉在临床上广泛使用,但是其耳毒性副作用降低了患者的生活质量,也限制了其在临床的应用。氨基糖苷类抗生素引起的感音神经性聋主要集中于耳蜗毛细胞的损伤,其机制主要涉及氧化应激损伤、细胞自噬、凋亡等,我们前期研究表明PINK1信号通路在顺铂所致的耳毒性中具有一定的保护作用,而PINK1的保护作用是否具有普遍性还未可知,因而我们希望通过探讨PINK1信号通路在庆大霉素所致的耳毒性中可能的调控机制,为常见药物性聋的防治提供新思路。实验方法:(1)400 μM庆大霉素及400 μM庆大霉素联合应用ROS抑制剂2 mM NAC处理体外培养HEI-OC1细胞(联合处理组需先用ROS抑制剂预处理1-2h,后将抑制剂与庆大霉素联合加入),DCFH-DA染色,流式细胞法及荧光显微镜观察法检测细胞内ROS产生水平。(2)WB法检测庆大霉素及庆大霉素联合应用ROS抑制剂NAC后,细胞内PINK1的表达变化,免疫荧光法检测PINK1的下游分子parkin的形态、分布及颗粒数目,罗丹明123染色,流式细胞法及荧光显微镜观察法检测各组线粒体膜电位情况。(3)Tom 20及Lamp-1共定位标识线粒体自噬,并通过WB法、免疫荧光法及CCK8法检测凋亡相关蛋白p53及细胞存活情况。(4)应用PINK1-siRNA沉默其在HEI-OC1中的表达,WB法、免疫荧光法、流式细胞法及TUNEL法检测PINK1沉默情况下,庆大霉素诱导的细胞内ROS水平、线粒体膜电位情况、PICNK1/parkin信号通路激活情况、细胞内自噬及p53相关凋亡水平。(5)应用PINK1-siRNA沉默其在HEI-OC1中的表达,庆大霉素或联合应用自噬抑制剂5 mM 3-MA、p53信号通路抑制剂10 μM PFTα处理后,CCK8法检测细胞的生存率(6)体外培养小鼠耳蜗基底膜,WB法检测庆大霉素及庆大霉素联合应用ROS抑制剂NAC刺激下PINK1的表达变化。(7)免疫荧光法检测庆大霉素及庆大霉素联合应用ROS抑制剂NAC刺激下耳蜗毛细胞内parkin的分布、组织内ROS水平、毛细胞线粒体膜电位情况。(8)免疫荧光法、WB法及TUNEL法检测庆大霉素及庆大霉素联合应用ROS抑制剂NAC刺激下耳蜗毛细胞自噬及凋亡情况。实验结果:(1)400 μM庆大霉素处理HEI-OC1细胞能够引起时间依赖性ROS的形成,表现为DCFH-DA 阳性细胞比例逐步增加;庆大霉素联合应用活性氧清除剂NAC能够有效抑制细胞内ROS的生成。(2)400 μM庆大霉素处理HEI-OC1细胞能够引起线粒体膜电位的损伤;庆大霉素联合应用活性氧清除剂NAC能够减轻线粒体膜电位的损伤。(3)400 μM庆大霉素处理HEI-OC1细胞能够引起PINK1的表达呈波动性变化,及其下游parkin分子的聚集、线粒体自噬的显着增加及p53表达水平增加;抑制ROS水平能够减少parkin颗粒数目、线粒体自噬及p53表达水平。(4)干扰HEI-OC1细胞内的PINK1表达,能够减轻庆大霉素所致的PINK1信号通路的激活、细胞自噬,但是p53相关凋亡水平增加。(5)PFTα抑制p53信号通路能够提高细胞存活率,3-MA抑制细胞自噬能够降低细胞存活率。(6)庆大霉素处理体外培养的P4小鼠耳蜗基底膜,能够引起毛细胞内ROS水平增加、线粒体膜电位的受损、PINK1/parkin信号通路的激活、自噬及凋亡水平的增加;联合应用ROS抑制剂能够减轻毛细胞内ROS水平、线粒体膜电位的受损、PINK1/parkin信号通路的激活、自噬及凋亡水平。结论:本研究表明PINK1信号通路可以通过激活线粒体自噬及抑制p53信号通路,起到对抗庆大霉素引起的毛细胞损伤作用;并且PINK1信号通路的激活程度受庆大霉素所诱导的ROS水平影响。推断PINK1在抵抗耳毒性药物引起的损伤方面可能具有普遍性,为药物性聋病的治疗和预防提供了新的调控靶点。(本文来源于《山东大学》期刊2019-05-16）
罗盼[8]（2019）在《二甲双胍通过上调SIRT3介导的自噬拮抗顺铂耳毒性的体外研究》一文中研究指出目的:在体外实验中探明二甲双胍对顺铂耳毒性的保护作用,并从SIRT3-自噬信号的角度初步探明其可能的产生机制。方法:1、首先在HEI-OC1细胞中建立顺铂耳毒性的细胞模型。分组为对照组(C组)、顺铂组(CP组)、二甲双胍组(M组)、顺铂+二甲双胍组(CPM组)这四组。CP组给予顺铂处理24小时,CPM组在给予顺铂处理前给予二甲双胍预处理24h,M组仅给予二甲双胍作用24小时,C组不做处理,于造模终点收集细胞用于后续实验。提取细胞总蛋白应用Western Blot技术检测组间SIRT3蛋白表达水平的差异,采用PCR技术检测组间SIRT3 mRNA水平上的差异。用Western Blot和免疫荧光技术通过对组间自噬相关蛋白LC3II和P62的蛋白表达水平差异的检测,探明顺铂及二甲双胍对自噬的影响。我们进一步用流式细胞技术(FITC/PI检测法)来检测组间细胞的凋亡比例的差异。2、我们进一步应用干扰SIRT3的慢病毒转染HEI-OC1细胞,建立干扰SIRT3的细胞模型,并分为:对照组(C组)、顺铂组(CP组)、二甲双胍组(M组)、顺铂+二甲双胍组(CPM组)、干扰SIRT3组(sh-lv-SIRT3)、干扰SIRT3+顺铂+二甲双胍组(sh-lv-SIRT3+CPM组)。除慢病毒转染外,其他各组药物处理方式同前。采用Western Blot检测组间SIRT3、P62和LC3-II表达水平的差异,采用流式细胞技术检测各组细胞间凋亡比例的差异。实验结果:与对照组相比(1.9%±0.3),顺铂明显降低了HEI-OC1细胞的存活率,增加了细胞的凋亡比例(25.6%±0.4,p<0.05);顺铂组细胞中SIRT3及p62的表达水平低于对照组,而LC3B的表达水平高于对照组。与顺铂组相比,二甲双胍显着的改善了顺铂作用下HEI-OC1细胞的存活率,减少了细胞凋亡的比例(15.6%±0.2,p<0.05),同时二甲双胍上调了HEI-OC1细胞中SIRT3的表达及自噬水平。干扰SIRT3后,二甲双胍作用下HEI-OC1细胞中的自噬水平较敲除前有明显下降,二甲双胍对顺铂上述毒性效应的改善作用均明显减弱。上述结果均有统计学意义。结论:二甲双胍可以部分的拮抗顺铂对HEI-OC1的损伤作用,这种作用可能是通过上调HEI-OC1细胞中的SIRT3-自噬信号实现的。(本文来源于《华中科技大学》期刊2019-05-01）
覃霄燕,李晓玲,李培培[9]（2019）在《颈项针为主治疗顺铂相关耳毒性的临床观察》一文中研究指出目的观察颈项针为主治疗顺铂相关耳毒性的临床疗效。方法 60例老年顺铂相关耳毒性的患者,随机分为观察组和对照组,每组30例,观察组患耳32只,对照组患耳37只。观察组予患侧颈项针为主针刺治疗;对照组予血管扩张药物、改善微循环类药物、激素和神经营养类药物治疗。观察两组治疗前后耳聋程度、听力曲线、耳鸣残疾评估量表(THI)评分变化,并比较两组临床疗效。结果观察组总有效率为90.6%,对照组为70.2%,两组总有效率及临床疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后THI评分均较同组治疗前降低(P<0.05),观察组治疗后THI评分低于对照组(P<0.05)。两组耳聋程度和听力曲线分布比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论颈项针为主治疗顺铂化疗后出现的耳鸣、耳聋疗效确切。(本文来源于《上海针灸杂志》期刊2019年03期）
李永奇,曾祥丽,丁大连,蒋海燕,Richard,SALVI[10]（2019）在《顺铂耳毒性小鼠模型的建立》一文中研究指出【目的】建立一种可靠的、重复性好的顺铂耳毒性小鼠模型,为进一步从分子学和基因方面研究顺铂的耳毒性机制提供可能。【方法】20只听力正常的健康小鼠,随机平分为2组,A组小鼠先行200 mg/kg呋塞米腹腔注射,1 h后腹腔注射1.0 mg/kg顺铂;B组小鼠先行200 mg/kg呋塞米腹腔注射,1 h后腹腔注射0.5 mg/kg顺铂。6只同年龄小鼠做正常对照组。治疗后第10天所有小鼠行听觉脑干电反应(ABR)测听和畸变产物耳声发射(DPOAE)检查,之后取双侧耳蜗,分别行全耳蜗基底膜铺片和环氧树脂包埋半薄切片,观察内外毛细胞、血管纹和螺旋神经节细胞等的病变。【结果】2组小鼠治疗后各频率ABR平均听阈都提高,DPOAE值都降低,其中A组的ABR平均听阈显着提高,各频率振幅明显降低,高频区DPOAE消失;B组的ABR平均听阈稍提高,高频(16、20、32 kHz)振幅轻度降低,低频(4、8、12 kHz)振幅无变化,高频DPOAE稍下降,低频DPOAE无变化。全耳蜗基底膜铺片结果 A组蜗底外毛细胞全部破坏,蜗尖大部分外毛细胞破坏;B组仅蜗底外毛细胞大部分被破坏,蜗尖外毛细胞形态和数目接近正常,两组内毛细胞均无明显减少。半薄切片结果显示A、B两组小鼠的耳蜗血管纹和螺旋神经节细胞的形态和数目都接近正常。【结论】1.0 mg/kg顺铂联合200 mg/kg呋塞米单次腹腔注射法可引起小鼠内耳组织显着损伤,主要表现为耳蜗外毛细胞损失。(本文来源于《中山大学学报(医学版)》期刊2019年02期）
耳毒性论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
从维生素D与中医肾藏精、耳聋的关系探讨氨基糖苷类抗生素耳毒性机制。维生素D缺乏导致耳聋的机制与氨基糖苷类抗生素耳毒性机制相似;中医方面,肾虚与氨基糖苷类抗生素耳毒性存在相关性,中医"肾精"功能与维生素D的生物学功效存在较大的相似性和关联性,维生素D缺乏与肾虚证有着共同的病理改变,从而提出维生素D可能参与氨基糖苷类抗生素耳毒性机制。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
耳毒性论文参考文献
[1].赵艳,蒋军,陈学敏,徐瑾,薛鑫淼.耳毒性药物的种类及其对内耳的损伤机制与预防[J].西北国防医学杂志.2019
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