RP-HPLC法测定可溶性CD95-Fc融合蛋白中异天冬氨酸的含量

论文摘要

目的测定可溶性CD95-Fc融合蛋白中异天冬氨酸（IsoAsp）含量。方法采用ISOQUANT誖异天冬氨酸检测试剂盒结合反相高效液相色谱法测定样品中IsoAsp含量,采用Phenomenex Synergi 4μm Hydro RP-80 C18色谱柱（150 mm×3 mm,4μm）,以7.9 mmol/L磷酸二氢钾-1.1 mmol/L磷酸氢二钾-10%甲醇为流动相A,以甲醇为流动相B,梯度洗脱,流速为0.43 mL/min。结果对照品和3批原液中IsoAsp含量相近（0.30～0.32 mol/mol sCD95-Fc）,3批成品中IsoAsp含量明显增高（0.51～0.53 mol/mol sCD95-Fc）;25℃和37℃处理24 h后成品中IsoAsp含量无明显变化,60℃处理后明显增加。结论该法适用于可溶性CD95-Fc融合蛋白中IsoAsp含量检测,高温处理可加快样品中IsoAsp生成。

论文目录

• 1 仪器与试药
•   1.1 仪器
•   1.2 试药
• 2 方法与结果
•   2.1 方法
•     2.1.1 sCD9-Fc样品前处理
•     2.1.2 异天冬氨酸-人促睡眠肽样品制备
•     2.1.3 SAH对照品溶液制备
•     2.1.4 色谱条件
•   2.2 结果
•     2.2.1 SAH最大紫外吸收波长测定
•     2.2.2 系统适用性
•     2.2.3 SAH标准曲线
•     2.2.4 IsoAsp-DSIP回收率
•     2.2.5 sCD95-Fc样品中IsoAsp含量
•     2.2.6 热处理后sCD95-Fc成品中IsoAsp含量变化
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 于雷,陶磊,毕华,李响,饶春明

关键词: 可溶性,异天冬氨酸,脱酰胺修饰,反相高效液相色谱

来源: 中国医药导报 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 化学,药学

单位: 中国食品药品检定研究院重组药物室

基金: 国家科技重大专项项目(2015ZX09501008-001),中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金课题(2017B3)

分类号: R927.2;O657.72

页码: 109-112

总页数: 4

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