金钱鱼鳃细胞系的建立及其生长特性的初步研究

论文摘要

鳃是鱼类渗透压调节的主要器官,鳃细胞的培养技术的建立可以为鱼类渗透压调节机理研究提供重要的实验手段和研究方法。金钱鱼（Scatophagusargus）作为一种广盐性鱼类,是研究渗透压调节机制的理想动物模型。本研究采用胰蛋白酶消化法进行了金钱鱼鳃细胞的体外培养,确定该类细胞原代和传代培养的最优条件,分析了其生长特性。结果表明,金钱鱼鳃细胞系在28℃,含有20%胎牛血清（fetal bovine serum, FBS）的L-15培养基中生长最佳, 2～4d即可传代,传代后可稳定培养,命名为SG。在传代培养过程中,对其增殖情况进行分析,发现SG细胞群体倍增时间为40.8h。正常传代的SG细胞冻存、复苏后,经台盼蓝染色测得细胞存活率约为87%。鳃细胞直接同水体环境接触,具有高效的渗透压调节能力。环境盐度变化时,鳃细胞启动渗透压胁迫应答机制,维持内环境稳态。本研究对SG细胞进行渗透压刺激后,检测其增殖情况并观察形态变化。分析表明,SG细胞在分别为150和600mOsmol·kg–1的低渗和高渗胁迫后均可增殖,且低渗胁迫后的增殖速度是高渗胁迫的1.5倍。渗透压胁迫后SG细胞的形态观察结果显示,低渗培养基胁迫后细胞体积发生膨胀而高渗条件下细胞体积发生皱缩。由此推断SG细胞具有较强渗透压耐受性,且低渗耐受能力强于高渗。SG细胞系的建立为金钱鱼渗透压应答机制和相关基因功能的研究提供了基础实验材料。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与主要试剂
•   1.2 方法
•     1.2.1 细胞培养基的配制
•     1.2.2 原代培养与传代培养
•     1.2.3 最适体外培养条件的确定
•     1.2.4 细胞系的生长曲线绘制
•     1.2.5 细胞系的分子生物学鉴定
•     1.2.6 冻存与复苏
•     1.2.7 金钱鱼鳃细胞渗透压耐受性测定
• 2 结果
•   2.1 原代培养及传代培养
•   2.2 最适体外培养条件的确定
•   2.3 细胞系的生长曲线绘制
•   2.4 细胞系来源鉴定
•   2.5 冻存和复苏
•   2.6 不同渗透压刺激后细胞增殖测定
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周佳楠,苏冒亮,张俊彬

关键词: 金钱鱼,鳃细胞系,原代培养,传代培养

来源: 热带海洋学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心,深圳市海洋生物资源与生态环境科学重点实验室深圳大学生命科学与海洋学院,光电子器件与系统教育部和广东省重点实验室深圳大学光电工程学院

基金: 国家自然科学基金项目(41806177),国家自然科学基金项目(41741006)~~

分类号: Q813.11

页码: 90-97

总页数: 8

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