葡萄柚中糖基转移酶对槲皮素及其类似物催化机制探讨

论文摘要

研究了葡萄柚中糖基转移酶（FGT）作为催化酶,以UDP-葡萄糖、UDP-N-乙酰-D-氨基葡萄糖、UDP-甘露糖为糖基供体,槲皮素、柚皮素、柚皮苷为糖基受体,研究糖基化合成情况。通过高效液相、质谱及核磁共振氢谱对产物反应进行检测。确定了槲皮素与UDP-葡萄糖、UDP-N-乙酰-D-氨基葡萄糖可以发生糖基化反应,生成的槲皮素糖苷分子量分别为464、505。根据核磁结果鉴定,所得到的产物结构分别为槲皮素-3-O-β-D葡萄糖苷、槲皮素3-O-β-D-N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷。以FGT酶为催化酶,对槲皮素进行了糖基化修饰。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 菌种的来源
•     1.1.2 试剂与仪器
•   1.2 方法
•     1.2.1 菌株的表达与纯化
•     1.2.2 酶浓度的测定
•     1.2.3 酶催化反应
•     1.2.4 酶催化反应条件的研究
•       1.2.4. 1 pH对酶活的影响
•       1.2.4. 2 温度对酶活的影响
•     1.2.5 槲皮素糖苷分离纯化
•       1.2.5. 1 AB-8大孔吸附树脂分离纯化[20]
•       1.2.5. 2 Sephadex LH-20柱分离纯化[21]
•     1.2.6 产物检测方法
•       1.2.6. 1 HPLC检测
•       1.2.6. 2 槲皮素糖苷的液相色谱-质谱联用（LC-MS）检测分析
•       1.2.6. 3 槲皮素糖苷的核磁氢谱（NMR）检测分析
• 2 结果
•   2.1 FGT纯化及浓度测定结果
•   2.2 酶催化反应体系
•   2.3 酶催化反应条件
•     2.3.1 pH对FGT酶活力的影响
•     2.3.2 温度对FGT酶活力的影响
•   2.4 槲皮素糖苷分离纯化结果
•   2.5 槲皮素糖苷的质谱分析
•   2.6 产物结构分析
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 叶静斯,窦文芳,王程

关键词: 糖基化,槲皮素,槲皮素糖苷

来源: 生物技术通报 2019年07期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 化学

单位: 江南大学药学院

分类号: O643.31

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0057

页码: 121-128

总页数: 8

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