奇异果甜蛋白论文_潘宁

导读:本文包含了奇异果甜蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,杆菌,甜味,奇异果,玉米,机理,基因。

奇异果甜蛋白论文文献综述

潘宁^[1]（2005）在《奇异果甜蛋白thaumatin基因二价载体在玉米中的共表达及其在酵母中的表达》一文中研究指出Thaumatin是一种超甜蛋白,来源于一种叫Thaumatococcus daniellii Benth的热带植物。其甜度按重量计是蔗糖的3000倍。其无毒、低热量、高甜度,是一种有可能取代蔗糖的新型甜味剂。但由于Thaumatococcus daniellii Benth生长条件苛刻,在原产地之外不能结实,这使得通过天然途径来提取Thaumatin变得不可能。因此人们便把希望寄托在Thaumatin的基因工程上。迄今为止,人们已在几十种微生物、真菌中表达了Thaumatin,但表达产物不是没活性,就是产量偏低。考虑到Thaumatin来源于植物,具有植物偏爱的密码子,也许在植物中会表达得更好。于是人们又尝试在植物中表达Thauamtin。1990年,M.Witty用毛根转化技术(hairy root transformation technique)将甜味蛋白基因插入到马铃薯基因组中,得到的转基因植株均是甜味。该实验的意义在于使通过转基因技术来改良某些作物口味成为可能。然而,事实上,除了上述成功的报道外,目前为止,还没有其它有关thaumatin基因作为外源基因在高等植物中表达成功的例子。一般来说,外源thaumatin基因在受体植物中都能成功地转录,但却无法成功地转译。有试验表明,PDI(protein disulfide isomerase,蛋白二硫键异构酶)在蛋白折迭和分泌过程中起重要的作用,Moraleio把PDI基因和thaumatin基因在黑曲霉中进行共表达,就得到了单产为150mg/L的重组Thaumatin。鉴于此,本实验室将thaumatin和PDI上游分别连上CaMV35S启动子,下游连上终止子,同时克隆于质粒pCAMBIA1302中,构建成二价协同表达载体pCAMBIA1302-TP,经测序证明了它们的正确性。将pCAMBIA1302-tha-PDI转入农杆菌LBA4404,侵染玉米18红新鲜幼胚及其诱导产生的胚性愈伤组织,拟通过组织培养技术得到玉米阳性植株。在玉米胚性愈伤组织状态最佳时进行侵染,摸索玉米幼胚诱导愈伤的一系列组培技术,培养活性状态良好的玉米胚性愈伤,但由于愈伤在侵染后分化条件的不成熟使本实验未能如期得到阳性植株,但此项实验仍有继续研究的必要性,探索甜味蛋白在玉米等高等植物中的表达及表(本文来源于《首都师范大学》期刊2005-05-01）

杨奇志^[2]（2004）在《奇异果甜蛋白thaumatin基因在玉米中的表达以及thaumatin-PDI二价载体在烟草中表达的研究》一文中研究指出奇异果甜蛋白Thaumatin是从一种叫Thaumatococcus daniellii Benth的竹芋科(Marabtaceae)植物的果实中提取出来的。它具有无毒安全、甜度高、热量低等许多优点，是一种新型甜味剂。但由于Thaumatococcus daniellii Benth对生长条件极其苛刻，在原产地之外的地方无法结实，试图通过人工栽培Thaumatococcus daniellii Benth大量提取Thaumatin是不可能的，于是人们便把希望寄托在thaumatin的基因工程上。叁十年来，人们把thaumatin基因转入不同的宿主，包括大肠杆菌、真菌和高等植物等，希望获得大量重组的具有活性的thaumatin，但结果并不理想，重组蛋白不是没甜昧就是产量很低，尤其在高等植物中难度更大。本文通过基因工程技术，构建了植物表达载体pCAMBIA1302-tha，测序证明其正确性。将pCAMBIA1302-tha转入农杆菌LBA4404，侵染玉米18红的胚性愈伤组织，通过组培技术得到玉米阳性植株。提取玉米18红阳性植株基因组DNA，分别用PCR、PCR-Southern和Southern杂交检测转基因植株，结果显示thaumatin cDNA基因已整合到转基因玉米中。用转基因玉米的总RNA通过RT-PCR反转录扩增出thaumatin cDNA基因，其Northern blotting检测出现目的杂交条带，证明在35S启动子及其它调控元件的控制下，thaumatin cDNA基因在转基因玉米中转录出mRNA，转基因玉米可溶性总蛋白的SDS-PAGE检测也发现相应分子量的蛋白条带。最后甜味品尝发现转基因玉米尚无甜味，证明thaumatin cDNA基因在转基因玉米中还未表达成有活性的甜味蛋白。显然，外源甜味蛋白基因thaumatin在玉米中未能表达成有活性的蛋白与很多原因有关，例如，Thaumatin蛋白来源于Thaumalococcus daniellii Benth果实的假种皮中，所以预期表达部位可能是玉米穗部，实验还未及对穗部进行甜味检测，所以还不能定论所得转基因玉米不甜。总之，通过本实验独创了一套切实可行的农杆菌介导转化玉米胚性愈伤组织的可靠方法。(本文来源于《首都师范大学》期刊2004-05-01）

孔建强,赵琦,高音,祁晓廷,杨奇志^[3]（2003）在《奇异果甜蛋白及其基因工程》一文中研究指出奇异果甜蛋白(thaumatin)是迄今为止最甜的物质之一,对其研究具有很重要的意义。奇异果甜蛋白的生化性质基本清楚,基因序列和氨基酸序列都已测定。它的甜味可能是由奇异果甜蛋白上特定基团和受体结合引起的。对奇异果甜蛋白的生理功能知之甚少。近二十年来,在奇异果甜蛋白的基因工程上取得了一定进展,但仍然存在许多困难。(本文来源于《遗传》期刊2003年02期）

奇异果甜蛋白论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

奇异果甜蛋白Thaumatin是从一种叫Thaumatococcus daniellii Benth的竹芋科(Marabtaceae)植物的果实中提取出来的。它具有无毒安全、甜度高、热量低等许多优点，是一种新型甜味剂。但由于Thaumatococcus daniellii Benth对生长条件极其苛刻，在原产地之外的地方无法结实，试图通过人工栽培Thaumatococcus daniellii Benth大量提取Thaumatin是不可能的，于是人们便把希望寄托在thaumatin的基因工程上。叁十年来，人们把thaumatin基因转入不同的宿主，包括大肠杆菌、真菌和高等植物等，希望获得大量重组的具有活性的thaumatin，但结果并不理想，重组蛋白不是没甜昧就是产量很低，尤其在高等植物中难度更大。本文通过基因工程技术，构建了植物表达载体pCAMBIA1302-tha，测序证明其正确性。将pCAMBIA1302-tha转入农杆菌LBA4404，侵染玉米18红的胚性愈伤组织，通过组培技术得到玉米阳性植株。提取玉米18红阳性植株基因组DNA，分别用PCR、PCR-Southern和Southern杂交检测转基因植株，结果显示thaumatin cDNA基因已整合到转基因玉米中。用转基因玉米的总RNA通过RT-PCR反转录扩增出thaumatin cDNA基因，其Northern blotting检测出现目的杂交条带，证明在35S启动子及其它调控元件的控制下，thaumatin cDNA基因在转基因玉米中转录出mRNA，转基因玉米可溶性总蛋白的SDS-PAGE检测也发现相应分子量的蛋白条带。最后甜味品尝发现转基因玉米尚无甜味，证明thaumatin cDNA基因在转基因玉米中还未表达成有活性的甜味蛋白。显然，外源甜味蛋白基因thaumatin在玉米中未能表达成有活性的蛋白与很多原因有关，例如，Thaumatin蛋白来源于Thaumalococcus daniellii Benth果实的假种皮中，所以预期表达部位可能是玉米穗部，实验还未及对穗部进行甜味检测，所以还不能定论所得转基因玉米不甜。总之，通过本实验独创了一套切实可行的农杆菌介导转化玉米胚性愈伤组织的可靠方法。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。