奶牛源绿脓杆菌内毒素蛋白的提取及免疫原性和保护性研究

论文摘要

为了评估绿脓杆菌内毒素蛋白的免疫原性和保护性,试验采用最小致死量（MLD）测定法从奶牛源绿脓杆菌菌株中筛选高毒力菌株,用可使蛋白质与脂多糖分离的合成培养基进行发酵、提取、纯化制备内毒素蛋白,采用考马斯亮蓝法测定内毒素蛋白含量,间接ELISA法和免疫攻毒保护试验对制备的内毒素蛋白进行免疫原性和保护性研究。结果表明:筛选得到1株高毒力绿脓杆菌CPA-009菌株,其MLD为2.0×107 cfu/mL;用CPA-009菌株发酵制备出5批次内毒素蛋白,平均含量为44.62%,各批次间差异不显著（P>0.05）;免疫组小鼠体内抗体效价随着免疫进程持续升高,最高达到1∶12 500;内毒素蛋白对CPA-009菌株的保护率为100%,对其他3种血清型绿脓杆菌菌株的保护率均在80.0%以上。说明由高毒力绿脓杆菌CPA-009菌株制备的内毒素蛋白具有良好的免疫原性和高保护性。

论文目录

• 1 材料
•   1.1 试验动物
•   1.2 菌株
•   1.3 药品
•   1.4 主要试剂
•   1.5 主要仪器
• 2 方法
•   2.1 高毒力菌株的筛选
•   2.2 内毒素蛋白的制备及含量的测定
•   2.3 抗体效价的检测
•   2.4 内毒素蛋白免疫保护率的测定
•   2.5 数据的统计分析
• 3 结果与分析
•   3.1 高毒力菌株的筛选
•   3.2 内毒素蛋白的制备及含量的测定
•   3.3 抗体效价的检测
•   3.4 内毒素蛋白免疫保护率的测定
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 曲晓军,王金英,孙建华,于冲,夏海华,潘钰

关键词: 绿脓杆菌,内毒素蛋白,提取,免疫,间接,攻毒

来源: 黑龙江畜牧兽医 2019年07期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 黑龙江省科学院微生物研究所,黑龙江省科学院高技术研究院

基金: 黑龙江省院所基本应用技术研究专项(ZNJZ2016SW01),黑龙江省科学院科学研究基金项目(ZS201604)

分类号: S852.61

DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.05.0035

页码: 25-28

总页数: 4

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