眼针对CIRI大鼠抗焦亡作用的机制研究

论文摘要

目的:通过观察眼针对CIRI大鼠脑组织中IL-1β、IL-18含量和P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1表达水平的影响,探讨眼针通过调控细胞焦亡途径发挥对CIRI大鼠抗炎作用的机制。方法:SD大鼠85只,随机分为假手术组（16只）和造模组（69只）,采用改良的线栓法对造模组大鼠进行CIRI模型复制,假手术组大鼠采用相同术式进行手术,但不进行大脑中动脉栓塞。术后以神经功能缺损评分和脑组织TTC染色对CIRI大鼠进行模型质量评价,将造模成功的大鼠再次随机均分为:模型对照组、眼针组、抑制剂组。然后对于眼针组大鼠行眼针干预,干预时机分别为:再灌注即刻及再灌注8、16、24 h,共计进行4次干预。抑制剂组大鼠一次性经腹腔注射格列本脲,500 mg/kg。假手术组和模型对照组大鼠不作处理,正常饲养至实验结束。末次针刺后,对各组大鼠进行神经功能缺损评分,然后采用过量麻醉法处死大鼠,用免疫组织化学法检测、Western blot法检测脑组织中P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达水平;ELISA法检测脑缺血半暗带组织中IL-1β、IL-18的含量。结果:与假手术组比较,模型对照组大鼠脑缺血半暗带组织中IL-1β、IL-18含量显著升高,P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达水平显著上调,差异有统计学意义（P<0.01）;与模型对照组比较,眼针组和抑制剂组大鼠脑缺血半暗带组织中IL-1β、IL-18含量显著降低,NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达水平显著下调,差异有统计学意义（P<0.01）。结论:CIRI损伤可能引起缺血半暗带脑组织中细胞焦亡的发生,同时脑组织中细胞因子IL-1β、IL-18高表达,P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达高于假手术组;而眼针干预能够抑制IL-1β、IL-18及P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达,进而调控细胞焦亡的发生而发挥抗炎作用。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 实验动物
•     1.1.2 实验试剂
•   1.2 方法
•     1.2.1 分组方法
•     1.2.2 模型复制
•     1.2.3 模型评价
•       1.2.3.1 行为体征评分
•       1.2.3.2 脑组织TTC染色
•     1.2.4 干预措施
•     1.2.5 样本采集
•     1.2.6 指标检测
•       1.2.6.1 ELISA法检测脑缺血半暗带组织中IL-1β、IL-18的含量
•       1.2.6.2 电镜检测焦亡小体
•       1.2.6.3 免疫组织化学法检测脑组织中P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达
•       1.2.6.4 Western blot法检测海马组织中P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达
•   1.3 统计学方法
• 2 结果
•   2.1 模型评价
•     2.1.1 行为体征评分
•     2.1.2 TTC染色结果
•   2.2 各组大鼠一般状态
•     2.2.1 基本情况
•     2.2.2 行为体征评分
•   2.3 ELISA法检测脑组织及脑缺血半暗带组织中IL-1β、IL-18的含量
•   2.4 电镜观察脑组织神经元细胞中细胞焦亡的发生
•   2.5 免疫组织化学法检测脑组织中P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达
•   2.6 Western blot法检测海马组织中P2X7R、NLRP3、pro-caspase-1、ASC、caspase-1的表达
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘昱麟,马贤德,宋采秋,徐畅,张双双,王哲

关键词: 眼针,缺血性脑中风,细胞焦亡

来源: 中国免疫学杂志 2019年24期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 中医学

单位: 辽宁中医药大学

基金: 国家自然科学基金面上项目(No.8167150734),国家自然科学基金青年基金(No.81703993),辽宁省自然科学基金(No.201602507),辽宁省教育厅项目(No.L201714)

分类号: R245

页码: 2964-2970

总页数: 7

文件大小: 1020K

下载量: 172