狂犬病野毒株论文-王雅婷,赵灵燕,柴娟,虞一聪,董建斐

狂犬病野毒株论文-王雅婷,赵灵燕,柴娟,虞一聪,董建斐

导读:本文包含了狂犬病野毒株论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:伪狂犬病病毒,荧光定量PCR

狂犬病野毒株论文文献综述

王雅婷,赵灵燕,柴娟,虞一聪,董建斐[1](2019)在《猪伪狂犬病病毒野毒株与疫苗株荧光定量PCR检测方法的建立和应用》一文中研究指出根据伪狂犬病病毒gD、gE基因序列设计2对引物及其对应的探针,通过对引物、探针浓度的优化,建立了猪伪狂犬病病毒野毒和减毒活疫苗株荧光定量PCR检测鉴别方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪流行性乙型脑炎病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪博卡病毒、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒均无扩增曲线。野毒株均出现gD和gE基因扩增曲线,而疫苗株只出现了gD基因扩增曲线,表明该检测方法具有良好的特异性。建立的gD和gE基因标准曲线Ct值和模板终浓度在1×108~1×10 copies/μL范围内均具有良好的线性关系,灵敏度均可达1×10 copies/μL。对39份猪组织样品进行检测,荧光定量PCR检出5份样品猪伪狂犬病病毒gD、gE阳性,表明这5份猪组织样品为猪伪狂犬病病毒野毒感染。常规PCR检出5份猪伪狂犬病病毒阳性,经测序为野毒感染,2种方法符合率为100%。本研究建立的荧光定量PCR可用于猪伪狂犬病病毒的快速检测和流行病学调查。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2019年11期)

姜子义,李碧,蔡瑶,颜久淇,龚双燕[2](2018)在《猪伪狂犬病毒野毒株与疫苗株的多重PCR鉴别》一文中研究指出为建立一种快速鉴别猪伪狂犬病毒野毒株与疫苗株的方法,根据猪伪狂犬病毒(PRV)全基因序列,并参照SA215、Bartha-K61疫苗株基因缺失位点特征,在单一检测野毒株与疫苗株的基础上,针对g E、g B和TK基因设计引物,首次建立了同时检测猪伪狂犬病毒野毒株与疫苗株的多重PCR检测方法。通过一次PCR检测能区分感染野毒株、疫苗株SA215和Bartha-K61,且与猪圆环Ⅱ型病毒(PCV-2)、细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)无交叉反应。多次试验证明该方法简单、可靠且敏感度高,可用于科学研究和临床诊断等方面。(本文来源于《江苏农业学报》期刊2018年06期)

兰德松,魏澍,顾贵波,侯振中[3](2018)在《伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株微滴数字PCR鉴别方法的建立》一文中研究指出为建立伪狂犬病病毒(PRV)野毒株与gE基因缺失疫苗株的鉴别诊断和准确定量的微滴数字PCR(ddPCR)方法,本研究以PRV gD和gE基因为靶基因,设计并合成了2套特异性引物和Taq Man探针,建立了分别针对PRV gD和gE基因的dd PCR方法。结果显示,本研究建立的dd PCR方法能够特异性地鉴别检测PRV野毒株和疫苗株,与圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等均无交叉反应;该方法针对PRV gD、gE基因的检测限分别为3.9拷贝/μL、2.3拷贝/μL,分别比相应的荧光定量PCR (qPCR)方法敏感性高10倍和5倍;针对PRV gD、gE基因的批内和批间重复性试验结果变异系数(C.V)均小于4%;通过对45份临床样品的检测,结果显示,与病毒分离方法相比,dd PCR方法敏感性为91.7%,特异性为97.2%,符合率为97.8%;与dd PCR方法相比,q PCR的敏感性为83.3%,特异性为94.3%,符合率为95.6%。本研究建立的dd PCR方法在检测低拷贝临床样品时敏感性更高、特异性强、重复性好,可以作为PRV野毒株与疫苗株的鉴别、准确定量的有效检测手段。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2018年12期)

兰德松,顾贵波,侯振中[4](2018)在《伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法的建立》一文中研究指出为实现对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)野毒株与gE基因缺失疫苗株的快速、敏感、特异的鉴别诊断,本试验针对PRVgD和gE基因设计了2套特异性引物和TaqMan探针,建立了PRV野毒株与gE基因缺失疫苗株的TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法,对引物和探针浓度、退火温度等进行了优化,对方法进行敏感性、特异性、重复性试验,并进行临床样品检测。结果显示,建立的针对gD、gE基因的TaqMan实时荧光定量PCR方法线性相关系数(R2)分别为0.996和0.980,均呈良好的线性关系;检测限分别为39.4和12.1拷贝/μL;与圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒均无交叉反应;重复性试验结果显示,针对gD基因的批内和批间变异系数分别为1.43%~1.86%、1.10%~2.07%,针对gE基因的批内和批间变异系数分别为0.98%~1.41%、1.12%~1.86%。应用建立的TaqMan实时荧光定量PCR与普通PCR分别对11份临床疑似感染样品进行检测,阳性率分别为36.4%和27.3%。结果表明,该方法敏感性高、特异性强、重复性好,可作为伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株的早期鉴别诊断和定量检测的有效手段。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2018年07期)

王凤求,侯文凤,李中圣,王贵平[5](2018)在《一种快速检测猪伪狂犬病毒野毒株的普通PCR方法的优化研究》一文中研究指出为了快速、便捷运用普通PCR对猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)野毒株进行检测,试验选取PRV g B、g E基因保守区序列,设计2对特异性引物,通过正交试验设计探索最优水平组合的PCR体系,建立鉴别检测PRV野毒株的普通PCR方法,并验证其特异性、敏感性、重复性、稳定性以及对临床样品的检测效果。结果表明:PCR体系的最优水平组合为Taq Mix 8μL,g B、g E引物的终浓度分别为0.2μmol/L和0.2μmol/L。建立的普通PCR检测体系仅对PRV野毒株呈双阳性,对疫苗株g B基因呈单阳性,检测猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪流行性腹泻病毒、猪乙型脑炎病毒、大肠杆菌等均显示阴性;敏感度介于1×103~1×104TCID50/m L病毒效价之间;重复性与稳定性良好;检测20份广东地区猪场临床疑似样品,疫苗毒株阳性率为25%,野毒株阳性率为10%,g B、g E单项PCR检测的符合率为100%。说明试验优化建立的普通PCR方法能对PRV野毒株进行快速鉴别诊断。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2018年13期)

苗淑淑,刘嫦,高洪,严玉霖,赵汝[6](2016)在《云南省昭通部分地区猪伪狂犬病野毒株的血清学调查》一文中研究指出为了了解云南省昭通部分地区猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒的感染状况,本试验从云南省昭通部分地区的3个规模化养猪厂以及6个散养户中随机采集335份血样,采用阻断ELISA对血样进行PRV-gE抗体检测。结果显示:335份血清中抗PRV-gE抗体的阳性率为42.39%,规模化猪场、农户散养的阳性率分别为27.5%、84.1%;长白猪、约克猪的阳性率分别为44.03%、40.91%;保育猪、育肥猪、哺乳仔猪的阳性率分别为50.47%、54.22%、29.66%。说明在昭通部分地区,部分猪场在饲养环境、管理水平和防疫措施等方面应加强工作。(本文来源于《上海畜牧兽医通讯》期刊2016年04期)

钟舒红,胡帅,李军,潘艳,杨威[7](2016)在《2012—2014年广西部分地区猪伪狂犬病野毒株感染血清学调查》一文中研究指出为了解2012—2014年广西部分地区猪伪狂犬病(PR)野毒感染及其分布情况,采用g EELISA方法对采自广西部分地区181个猪场的7 739份血清进行了伪狂犬病野毒的血清学调查。结果表明:在2012—2014年检测的181个猪场中有15.47%的猪场为PR野毒阳性场;在7 739份猪血清样本中有7.55%的为阳性样本;在所检测的8个市中以玉林市、南宁市、梧州市的阳性率较高。说明广西猪群已普遍存在PRV野毒株感染,并呈散发性流行,且感染率呈逐年上升趋势,故加强广西地区猪场的PR防控和净化工作尤为重要。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2016年08期)

李丰清,陶顺梅,马庆菊,李世珍[8](2015)在《青海海北州地区猪伪狂犬病病毒野毒株感染的血清学调查》一文中研究指出猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)引起的一种急性、接触性传染病,可引起母猪屡配不孕,妊娠母猪流产,仔猪发病死亡,成年猪潜伏感染,长期带毒并排毒。g E基因是PRV的主要毒力基因,PRV g E基因缺失弱毒疫苗,在我国的大规模免疫应用,对预防和控制PR起到了极其重要的作用。但自2011年以来,(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2015年09期)

张志,樊雅婷,吴发兴,刘爽,董雅琴[9](2015)在《伪狂犬病病毒野毒株与疫苗株的实时荧光定量PCR鉴别方法的建立》一文中研究指出针对伪狂犬病病毒疫苗株基因组缺失的3.5kb片段,设计3套引物和探针,并用标准的伪狂犬病病毒野毒株和疫苗毒株进行测试,建立了一种新的快速鉴别伪狂犬病病毒野毒株和疫苗株的实时荧光定量PCR方法。该方法的检测极限可达10copies/μL,并与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒等不存在交叉反应现象,批内和批间重复性试验的变异系数分别为1.70%±1.07%和2.22%±1.02%,显示该方法具有良好的重复性。在对临床20份样品的检测时,该荧光定量PCR的阳性率为60%,普通PCR的阳性率仅为40%。结果表明,该方法具有特异性高、敏感性强的特点,是一种值得推广的快速诊断技术,可用于猪伪狂犬病的诊断和流行病学调查等。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2015年07期)

张志,樊雅婷,吴发兴,刘爽,董雅琴[10](2015)在《猪伪狂犬病毒野毒株套式PCR检测方法的建立和应用》一文中研究指出为建立能鉴别猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒株和疫苗株的实用方法,本文以疫苗株缺失的3.5kb片段为靶基因,设计了2对PCR引物,建立了能够特异性检测PRV野毒株的套式PCR方法。与常规PCR相比,该方法检测极限可达10个病毒拷贝/μL,是常规PCR的1000倍,并与猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒等不存在交叉反应现象。在对临床150份样品检测时,套式PCR的阳性率为21.33%,常规PCR的阳性率为10%。这表明该方法具有特异性高、敏感性强的特点,是一种值得基层推广应用的快速诊断技术,可用于PRV的诊断和流行病学调查等。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2015年05期)

狂犬病野毒株论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为建立一种快速鉴别猪伪狂犬病毒野毒株与疫苗株的方法,根据猪伪狂犬病毒(PRV)全基因序列,并参照SA215、Bartha-K61疫苗株基因缺失位点特征,在单一检测野毒株与疫苗株的基础上,针对g E、g B和TK基因设计引物,首次建立了同时检测猪伪狂犬病毒野毒株与疫苗株的多重PCR检测方法。通过一次PCR检测能区分感染野毒株、疫苗株SA215和Bartha-K61,且与猪圆环Ⅱ型病毒(PCV-2)、细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)无交叉反应。多次试验证明该方法简单、可靠且敏感度高,可用于科学研究和临床诊断等方面。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

狂犬病野毒株论文参考文献

[1].王雅婷,赵灵燕,柴娟,虞一聪,董建斐.猪伪狂犬病病毒野毒株与疫苗株荧光定量PCR检测方法的建立和应用[J].中国兽医科学.2019

[2].姜子义,李碧,蔡瑶,颜久淇,龚双燕.猪伪狂犬病毒野毒株与疫苗株的多重PCR鉴别[J].江苏农业学报.2018

[3].兰德松,魏澍,顾贵波,侯振中.伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株微滴数字PCR鉴别方法的建立[J].中国预防兽医学报.2018

[4].兰德松,顾贵波,侯振中.伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法的建立[J].中国畜牧兽医.2018

[5].王凤求,侯文凤,李中圣,王贵平.一种快速检测猪伪狂犬病毒野毒株的普通PCR方法的优化研究[J].黑龙江畜牧兽医.2018

[6].苗淑淑,刘嫦,高洪,严玉霖,赵汝.云南省昭通部分地区猪伪狂犬病野毒株的血清学调查[J].上海畜牧兽医通讯.2016

[7].钟舒红,胡帅,李军,潘艳,杨威.2012—2014年广西部分地区猪伪狂犬病野毒株感染血清学调查[J].黑龙江畜牧兽医.2016

[8].李丰清,陶顺梅,马庆菊,李世珍.青海海北州地区猪伪狂犬病病毒野毒株感染的血清学调查[J].畜牧与兽医.2015

[9].张志,樊雅婷,吴发兴,刘爽,董雅琴.伪狂犬病病毒野毒株与疫苗株的实时荧光定量PCR鉴别方法的建立[J].中国兽医科学.2015

[10].张志,樊雅婷,吴发兴,刘爽,董雅琴.猪伪狂犬病毒野毒株套式PCR检测方法的建立和应用[J].中国动物检疫.2015

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