导读:本文包含了快速扩增论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:技术,快速,杆菌,病菌,滤膜,病毒,结核。
快速扩增论文文献综述
丁小龙,程芳珍,李茜,李国秀[1]（2019）在《反转录环介导等温扩增技术快速检测猪水疱病毒方法的建立》一文中研究指出为了建立一种针对猪水泡病毒(SVDV)的反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),用于减少猪水泡病与口蹄疫因临床症状相似而造成的误诊,试验针对SVDV VP1基因序列设计4个LAMP引物,其中外侧引物用于SVDV PCR检测,并利用RT-LAMP和RT-PCR方法进行敏感性试验、特异性试验以及临床样品检测。结果表明:针对SVDV的RT-LAMP检测方法的敏感性是RT-PCR的10倍; RT-LAMP方法的特异性良好,与口蹄疫病毒无交叉反应;两种方法对临床样品检测的符合率为100%。说明试验建立的RT-LAMP方法具有敏感性高、特异性强、快速等特点,适合实验室和临床对SVDV的快速诊断。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年21期）
葛以跃,苏璇,张倩,陈银,赵康辰[2]（2019）在《CRISPR-Cas13a结合重组酶介导的扩增快速检测副溶血性弧菌方法的建立》一文中研究指出目的将重组酶介导的扩增(RAA)技术与成簇的规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白13a(CRISPR-Cas13a)检测系统相结合,建立一种快速、灵敏、特异的副溶血性弧菌检测方法(RAA-Cas13a)。方法样本DNA经RAA扩增后,产物采用CRISPR-Cas13a检测系统进行检测,比较CRISPR-Cas13a与琼脂糖凝胶电泳对RAA产物的检测敏感性。对方法进行灵敏度与特异度测试,通过临床样本检测比较建立的方法与real-time PCR法的一致性。结果CRISPR-Cas13a对RAA产物的检测敏感性高于琼脂糖凝胶电泳法;建立的RAA-Cas13a方法检测副溶血性弧菌的灵敏度为10拷贝DNA分子/反应,与其他病原体之间无交叉反应,与real-time PCR对临床样本的检测阳性率差异无统计学意义(P>0.05),二者的检测一致性较高(kappa=0.934)。结论建立的RAA-Cas13a方法具有快速简单、灵敏特异等优点,为副溶血性弧菌的快速检测提供了新的工具。(本文来源于《现代预防医学》期刊2019年20期）
梁君妮,尹伟力,谢爽,刘宁,段效辉[3]（2019）在《重组酶聚合酶扩增技术快速检测鲤春病毒血症病毒(SVCV)方法的建立》一文中研究指出为建立鲤春病毒血症病毒(SVCV)的快速检测方法,本研究根据SVCV的G基因保守序列设计特异性引物,通过条件优化初步建立了基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的SVCV检测方法。该RPA方法最优扩增温度为30℃,恒温反应20 min内即可完成。特异性试验结果显示,该方法与其它常见鱼类感染病毒无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法对SVCV质粒标准品的最低检出限为89.2拷贝/μL,高于传统的RT-PCR方法;利用已建立的RPA方法和RT-PCR方法对市场购买的80份临床样品进行检测,结果显示,RPA方法与RT-PCR方法检测结果一致,且RPA方法能够有效检出RT-PCR方法的弱阳性样品,表明RPA方法可以用于临床检测。本研究建立的检测SVCV的RPA方法具有快速、简便、特异性强、灵敏度高的特点,适合基层实验室及现地检测。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年10期）
冯洁,张泉,钱淼,谢建云,高诚[4]（2019）在《牛棒状杆菌环介导等温扩增快速检测方法的建立及初步应用》一文中研究指出目的建立牛棒状杆菌(C.bovis)环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。方法根据牛棒状杆菌16S rRNA基因保守区域设计一组特异性引物,对反应条件进行优化并对特异性和敏感性进行分析。结果建立的LAMP扩增方法仅能检测出牛棒状杆菌,其他常见细菌未见特异性扩增,检出牛棒状杆菌的最低模板量为118 fg/μL。结论建立的牛棒状杆菌LAMP检测方法操作简单、快速高效,结果易于观察,对仪器设备要求低,可用于牛棒状杆菌的快速检测。(本文来源于《实验动物与比较医学》期刊2019年05期）
陈艳玲[5]（2019）在《环介导等温扩增技术在快速病原菌检测中的价值》一文中研究指出目的探讨环介导等温扩增技术(LAMP)在临床快速检测病原菌中的价值。方法收集德州市夏津县人民医院366例下呼吸道感染患者的痰液标本,进行呼吸道病原菌核酸检测和痰培养,其中呼吸道病原菌核酸检测应用LAMP。比较两种检测方法的病原菌检测结果和阳性检出率。结果共纳入366份痰液标本。痰培养检出阳性标本72份,阳性率为19.7%;LAMP检出阳性标本175份,阳性率47.8%;LAMP阳性率较痰培养明显升高(χ~2=64.826,P<0.01)。痰培养方法共检出108株致病菌株,其中革兰阴性(G~-)杆菌为86株(占79.6%),革兰阳性(G~+)球菌22株(占20.4%);LAMP共检出236株致病菌株,其中G~-杆菌168株(占71.2%),G~+球菌68株(占28.8%);两种检测方法均未检出嗜麦芽窄食单胞菌和肺炎支原体。结论 LAMP采用等温扩增微阵列基因芯片技术,操作简便快速,可同时对痰液中13种临床常见呼吸道病原菌进行定性检测具有较高检出率,有一定的临床应用价值。(本文来源于《实用检验医师杂志》期刊2019年03期）
张梦寒,崔家瑞,王小龙[6]（2019）在《环介导等温扩增法快速检测感染性腹泻病例标本中的空肠弯曲菌》一文中研究指出目的建立环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测感染性腹泻病例标本中的空肠弯曲菌。方法收集2017年苏州市辖区3家医院的感染性腹泻患者的粪便样品326件,用LAMP法对空肠弯曲菌的DNA进行检测,在DNA扩增试剂盒提供的反应体系加入引物和模板进行空肠弯曲菌的LAMP反应,测定LAMP方法检测空肠弯曲菌菌液的灵敏度;同时用滤膜法进行空肠弯曲菌的分离培养,参照GB 4789.9-2014《食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验》分离鉴定空肠弯曲菌。结果 LAMP法检测空肠弯曲菌菌液的灵敏度是2.2 CFU/μL;326件腹泻患者粪便中16件空肠弯曲菌LAMP检测为阳性,阳性率为4.91%。共分离培养出14株空肠弯曲菌,阳性率为4.29%。结论针对感染性腹泻患者的粪便样本的空肠弯曲菌检测项目,可以采用LAMP方法进行等温扩增初筛,初筛阳性的样品再有针对性地进行后续的传统培养。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年18期）
冯雨苗,王淼淼,王洪生[7]（2019）在《皮肤结核快速诊断中环介导等温扩增技术的建立》一文中研究指出目的建立一种用于皮肤结核标本快速检测的环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。方法根据结核分枝杆菌复合群gyrB基因序列设计叁对特征性引物,采用LAMP对结核分枝杆菌进行65℃等温扩增。评价该方法的灵敏度和特异性,并初步探讨其在临床皮肤结核标本中的应用。结果建立的LAMP检测结核分枝杆菌的灵敏度与PCR相当;与其他分枝杆菌无交叉反应,特异性良好。针对培养阳性的皮肤结核标本,LAMP检出3例(3/5),略优于PCR(2/5),且LAMP电泳条带更清晰易辨认。结论 LAMP技术操作简单,敏感性和特异性较强,可应用于皮肤结核标本的快速检测。(本文来源于《中国皮肤性病学杂志》期刊2019年09期）
姚协丰,羊杏平,李苹芳,徐锦华,张曼[8]（2019）在《基于可视化环介导等温扩增技术快速、灵敏检测瓜类蔓枯病菌》一文中研究指出目的与意义:蔓枯病(gummy stem blight,GSB)是葫芦科作物(比如哈密瓜、香瓜、黄瓜和西瓜等)的世界性病害,往往危害茎和叶,且通过温室育苗和修剪被侵染植株而交叉感染传播,也可通过种子带菌传播。在有利的环境条件下,低水平的潜在侵染苗有可能导致病害大流行。大棚内的高湿环境有利于瓜类蔓枯病发生,已成为瓜类生产中继(本文来源于《中国瓜菜》期刊2019年08期）
吕观,常彦磊,石磊[9]（2019）在《免疫磁珠-环介导等温扩增快速检测牛肉中的鼠伤寒沙门氏菌与金黄色葡萄球菌》一文中研究指出建立免疫磁珠分离(immunomagnetic separation,IMS)联合环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术检测牛肉中鼠伤寒沙门氏菌与金黄色葡萄球菌的方法。用生物素标记的鼠伤寒沙门氏菌抗体和生物素标记的金黄色葡萄球菌菌体蛋白抗体对链霉亲和素磁珠进行功能化,从牛肉中捕获和分离目标致病菌。结果表明:经优化后,每毫克磁珠与10 μL鼠伤寒沙门氏菌抗体偶联,400 μL鼠伤寒沙门氏菌免疫磁珠在45 min内对10~4 CFU/mL鼠伤寒沙门氏菌的捕获率为52.16%;每毫克磁珠与6 μL金黄色葡萄球菌抗体偶联,300 μL金黄色葡萄球菌免疫磁珠在30 min内对10~4 CFU/mL金黄色葡萄球菌的捕获率为56.80%;建立的IMS-LAMP方法特异性高,对牛肉中鼠伤寒沙门氏菌的检测灵敏度为1.2×10~3 CFU/mL,对金黄色葡萄球菌的检测灵敏度为4.4×10~4 CFU/mL;富集5 h后,鼠伤寒沙门氏菌的检测限可至1.2 CFU/mL,富集7 h后,金黄色葡萄球菌的检测限可降至4.4 CFU/mL。建立的IMS-LAMP方法用时短,灵敏度高,操作简单,可以有效检测牛肉中的鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌。(本文来源于《肉类研究》期刊2019年07期）
王静琰,张博,祁凯,张悦丽,马立国[10]（2019）在《生姜茎基腐病原菌环介导等温扩增技术快速检测体系的建立》一文中研究指出生姜茎基腐病是生姜主产区发生严重的病害之一,为典型的土传病害和种子传播病害,为害造成根部和茎基部腐烂,一般损失20%～30%,严重可达50%以上。经分离鉴定发现是由多种腐霉菌(Pyhtium)侵染引起,以群结腐霉(P.myriotylum)、林栖腐霉(P.sylvaticum)为主。为了进一步研究病害的发生规律与预警,建立病菌快速检测技术十分必要,目前针对生姜茎基腐病菌常用的检测技术为普通PCR等分子生物学方法,存在对仪器设备及操作人员要求高且耗时长等缺点,不利于向基层技术部门推广。本研究所采用的环介导等温扩增(loop-mediated isothermalamplification,LAMP)技术,通过比对林栖腐霉与其他腐霉菌的基因序列,筛选有序列特异性的基因作为靶标来设计LAMP特异性引物,从而建立一种可通过颜色判定的检测体系,能在短时间内实现DNA的大量扩增,具有快速、准确、简便的特点。该体系为25μL,扩增前在反应管管盖内侧加入SYBR Green I作为指示剂,在等温条件65℃下进行核酸扩增反应60 min,80℃10min灭活DNA Polymerase,将反应管离心1min后即可通过肉眼直接观察结果,SYBR Green I显示绿色即为阳性反应;同时,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳验证为梯形条带,也可判定为阳性反应。该体系对DNA的最低检测限为100pg/μL。本研究建立了一种针对林栖腐霉的快速检测技术,为其他病原腐霉菌快速检测体系的建立和以腐霉菌侵染引起生姜茎基腐病的快速诊断提供了技术支撑和理论依据。(本文来源于《中国植物病理学会2019年学术年会论文集》期刊2019-07-20）
快速扩增论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的将重组酶介导的扩增(RAA)技术与成簇的规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白13a(CRISPR-Cas13a)检测系统相结合,建立一种快速、灵敏、特异的副溶血性弧菌检测方法(RAA-Cas13a)。方法样本DNA经RAA扩增后,产物采用CRISPR-Cas13a检测系统进行检测,比较CRISPR-Cas13a与琼脂糖凝胶电泳对RAA产物的检测敏感性。对方法进行灵敏度与特异度测试,通过临床样本检测比较建立的方法与real-time PCR法的一致性。结果CRISPR-Cas13a对RAA产物的检测敏感性高于琼脂糖凝胶电泳法;建立的RAA-Cas13a方法检测副溶血性弧菌的灵敏度为10拷贝DNA分子/反应,与其他病原体之间无交叉反应,与real-time PCR对临床样本的检测阳性率差异无统计学意义(P>0.05),二者的检测一致性较高(kappa=0.934)。结论建立的RAA-Cas13a方法具有快速简单、灵敏特异等优点,为副溶血性弧菌的快速检测提供了新的工具。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
快速扩增论文参考文献
[1].丁小龙,程芳珍,李茜,李国秀.反转录环介导等温扩增技术快速检测猪水疱病毒方法的建立[J].黑龙江畜牧兽医.2019
[2].葛以跃,苏璇,张倩,陈银,赵康辰.CRISPR-Cas13a结合重组酶介导的扩增快速检测副溶血性弧菌方法的建立[J].现代预防医学.2019
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[4].冯洁,张泉,钱淼,谢建云,高诚.牛棒状杆菌环介导等温扩增快速检测方法的建立及初步应用[J].实验动物与比较医学.2019
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[7].冯雨苗,王淼淼,王洪生.皮肤结核快速诊断中环介导等温扩增技术的建立[J].中国皮肤性病学杂志.2019
[8].姚协丰,羊杏平,李苹芳,徐锦华,张曼.基于可视化环介导等温扩增技术快速、灵敏检测瓜类蔓枯病菌[J].中国瓜菜.2019
[9].吕观,常彦磊,石磊.免疫磁珠-环介导等温扩增快速检测牛肉中的鼠伤寒沙门氏菌与金黄色葡萄球菌[J].肉类研究.2019
[10].王静琰,张博,祁凯,张悦丽,马立国.生姜茎基腐病原菌环介导等温扩增技术快速检测体系的建立[C].中国植物病理学会2019年学术年会论文集.2019
论文知识图
