CDC6 siRNA对肝癌干细胞HepG2-CSCs增殖和迁移的影响

论文摘要

目的观察细胞分裂周期蛋白6（cell division cycle 6,CDC6）在肝癌干细胞（Hep G2-CSCs）中的表达,并探讨CDC6 siRNA对Hep G2-CSCs增殖和迁移的影响。方法通过免疫磁珠分选法从肝癌细胞株Hep G2中分离肝癌干细胞Hep G2-CSCs,并通过流式细胞术鉴定细胞免疫表型,Western blot法检测Hep G2-CSCs中CDC6蛋白的表达水平。将Hep G2-CSCs分为两组,分别为对照siRNA组和CDC6 siRNA组,其中CDC6 siRNA组和对照siRNA组分别为通过lipofectamine 2000转染CDC6 siRNA和对照siRNA的Hep G2-CSCs细胞,平板克隆形成实验和Transwell法分别检测CDC6 siRNA对Hep G2-CSCs克隆形成和迁移的影响;Western blot检测CDC6 siRNA对Hep G2-CSCs CDC6、wnt3a和β-catenin蛋白表达的影响。结果流式细胞术检测结果显示,CD133在Hep G2和Hep G2-CSCs中阳性率分别为（0. 54±0. 16）%和（98. 82±0. 95）%;Western blot结果显示CDC6蛋白在Hep G2-CSCs细胞中的表达显著高于Hep G2细胞（P <0. 01）;克隆形成实验结果显示,与对照siRNA组比较,CDC6 siRNA组细胞克隆形成率显著降低（P <0. 01）;Transwell检测结果显示,与对照siRNA组比较,CDC6 siRNA组Hep G2-CSCs细胞迁移能力显著降低（P <0. 01）;Western blot结果显示,与对照siRNA组比较,CDC6 siRNA组CDC6、wnt3a和β-catenin蛋白表达显著降低（P <0. 01）。结论 CDC6在Hep G2-CSCs中高表达,CDC6siRNA能够抑制wnt3a和β-catenin蛋白表达,抑制Hep G2-CSCs克隆形成和迁移。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 细胞株及主要试剂
•   1.2 HepG2-CSCs分离培养
•   1.3 流式细胞术鉴定HepG2-CSCs
•   1.4 细胞转染
•   1.5 克隆形成实验
•   1.6 Transwell法检测细胞迁移能力
•   1.7 Western blot检测wnt3a和β-catenin蛋白表达
•   1.8 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 HepG2-CSCs的抗原标记表达
•   2.2 CDC6在HepG2-CSCs中高表达
•   2.3 CDC6 siRNA抑制HepG2-CSCs克隆形成能力CCK8检测结果显示，与对照siRNA组比较，
•   2.4 CDC6 siRNA抑制HepG2-CSCs迁移能力
•   2.5 CDC6 siRNA抑制wnt/β-catenin通路
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 牛广旭,郭晓娟,杨建华,刘小慧

关键词: 肝癌干细胞,细胞增殖,细胞迁移

来源: 山西医科大学学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 邯郸市中心医院病理科,邯郸市中心医院普外二科

基金: 河北省青年科技项目指令性课题资助(20170227)

分类号: R735.7

DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2019.12.003

页码: 1649-1654

总页数: 6

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