脂肪酶GZEL及其C-端截断突变体对磷脂单分子膜的吸附动力学研究

论文摘要

基于单分子层技术研究了禾谷镰孢菌脂肪酶GZEL对不同磷脂单分子膜的吸附动力学。同时,采用截断突变方法分析C-端肽段（编号为269-319的氨基酸）缺失后对脂肪酶GZEL界面吸附动力学参数的影响。研究发现,脂肪酶GZEL对不同磷脂单分子层的吸附动力学参数(吸附常数ka,解离常数kd,吸附平衡常数KAds)与磷脂单分子膜的种类及初始表面压力密切相关。尽管如此,相比于野生型GZEL,269-319肽段缺失后导致酶蛋白对不同磷脂单分子膜的吸附常数ka均显著降低,而解离常数kd则显著升高,两者共同导致酶蛋白对于磷脂单分子膜的亲和力KAds显著降低。野生型GZEL对不同磷脂单分子膜的选择性顺序为磷脂酰丝氨酸>磷脂酰胆碱>磷脂酰乙醇胺。而269-319肽段缺失后,酶蛋白对于这三种磷脂单分子膜的亲和力则表现为无显著差异。以上结果表明269-319肽段在脂肪酶GZEL的界面吸附及对磷脂选择性方面均发挥有重要作用。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料和仪器
•   1.2 方法
•     1.2.1 失活型GZEL及其C-末端截断突变体大肠杆菌重组表达菌株的构建
•     1.2.2 GZEL及其C-末端截断突变体的表达与纯化
•     1.2.3 GZEL及其C-末端截断突变体对不同磷脂单分子膜吸附动力学参数测定
•     1.2.4 数据统计分析
• 2 结果与讨论
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王方华,陈吴翀,魏瑞霞,张慧,杨博,王永华

关键词: 脂肪酶,禾谷镰孢菌,单分子层技术,界面吸附动力学

来源: 现代食品科技 2019年03期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 华南理工大学食品科学与工程学院,华南理工大学生物科学与工程学院

基金: 国家自然科学基金项目(31671791),广东省科技计划项目(2016B090920082),广州市珠江科技新星专项(201610010074),中央高校基本科研业务费(2017ZD090)资助

分类号: Q55

DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.3.005

页码: 26-32

总页数: 7

文件大小: 1755K

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