导读:本文包含了小鼠胎肺论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:肺泡,小鼠,细胞,胚胎,转基因,载体,鉴定。
小鼠胎肺论文文献综述
肖爱平[1](2013)在《Bmprla过表达对小鼠胎肺发育的影响》一文中研究指出肺发育受到多种信号通路的调控,其中BMP信号通路对于肺发育有不可替代的作用。已知经典BMP信号通路调控了细胞的增殖、凋亡及分化过程,对哺乳动物肺器官形态发生极为重要。研究经典BMP信号通路各成员在哺乳动物肺器官发育过程中的表达变化、作用功能及表达异常可能诱发的肺部疾病对于各类肺部疾病的这诊断与治疗有着重要的实际意义。为研究在鼠肺上皮细胞中过表达Ⅰ型受体(Bmpr1a)后BmpSmad信号通路的变化以及该变化可能对小鼠胎肺发育的影响,本实验利用Cre-loxP体系,用SP-C-rtTA, TetO-Cre和Pmes-Bmpr1a叁种转基因小鼠相互交配,得到在肺远端上皮细胞条件性过表达Bmpr1a的叁转基因小鼠。从E7.5(SP-C启动子开始起作用的时期)起,给和公鼠交配后可能怀有叁转基因的母鼠供应一定的浓度的强力霉素(Dox),启动转基因表达,直至不同时期鼠肺的收获时间点。先用鼠尾基因组DNA进行PCR鉴定各小鼠的基因型和检测绿色荧光蛋白的方法验证过表达的有效性,再用Real-timePCR技术及免疫组化检测Bmpr1a在小鼠肺发育不同时期的表达水平及表达位置。结果表明:过表达Bmpr1a的鼠肺要比对照组的鼠肺略小,并在肺边缘部分有异常膨大的囊泡。免疫组化结果显示,转基因鼠肺中异常表型形成的一部分原因是过表达Bmpr1a降低细胞增殖水平所致。进一步形态分析及肺近远端上皮细胞标志物免疫组化发现,过表达的鼠肺上近端上皮细胞标志物CCl0的表达模式没有明显变化,而远端上皮细胞标志物SP-C减少,同时Ⅰ型上皮细胞标志物Podoplanin的表达水平升高,这些结果表明Bmpr1a过表达后促进了鼠肺中远端上皮细胞的分化。(本文来源于《福建师范大学》期刊2013-06-01)
王虹[2](2011)在《Let-7 microRNA在小鼠胎肺发育时期的表达检测及其腺病毒穿梭质粒的构建》一文中研究指出微RNA (microRNA,miRNA)是一类在进化上高度保守、长度约20~24个核苷酸的小分子非编码RNA,能通过与靶基因3'非翻译区相结合,从而抑制靶基因的翻译或降解靶基因。Let-7 microRNA是发现较早的一类niRNA,最早在线虫上发现let-7能调控细胞分裂的时序。此后大量证据表明,let-7参与动物多个器官发育的调控过程,并与人类疾病发生密切相关。本研究利用real-time PCR技术检测了let-7家族8个成员在小鼠胚胎肺发育过程中的表达趋势,发现从小鼠假腺肺的前中期到囊状肺的前期,let-7家族8个成员均有表达,且表达量均持续升高,到囊状肺的中后期,其中let-7a、let-7d、let-7e、let-7f、let-7i五个家族成员表达量略有下降,let-7b、let-7c表达量没有明显变化、而let-7g表达量则有所升高。接着,本实验选取8个家族成员中表达丰度最高的let-7a和let-7d,利用原位杂交技术分析它们在小鼠胚胎肺发育过程中的表达模式,结果表明:let-7a和let-7d在小鼠胚胎肺的上皮和间充质中均有明显表达,且在肺芽远端上皮末梢中的表达较为强烈,到出生后叁天(P3),其在胚胎肺上皮和间充质中的表达减弱,这种表达趋势的变化与real-time PCR的结果相近。在此基础上,本实验通过构建pDC316-CMV-control、pDC316-CMV-let-7a以及pDC316-mCMV-mK-ras叁个腺病毒表达载体,并将其分别转染细胞,利用RT-PCR以及western blot的方法检测所构建的表达载体,实验结果表明,以pDC316-CMV-control作为对照组,pDC316-CMV-let-7a、pDC316-mCMV-mK-ras两个腺病毒表达载体在mRNA水平及蛋白质水平上均能实现体外过表达。本研究旨在为后期构建腺病毒,并在小鼠体内研究let-7 miRNAs与mK-ras基因负调控关系,及其参与调控哺乳动物胚胎肺发育的分子机制奠定基础。(本文来源于《福建师范大学》期刊2011-04-06)
张明凤,张彦定,王昕,王虹,张龙斌[3](2009)在《小鼠胎肺Ⅲ型上皮细胞的分离纯化及原代培养》一文中研究指出用免疫黏附和差速离心法分离和纯化小鼠胎肺Ⅱ型细胞,所得细胞纯度达(90±2)%,产量为每5只小鼠胎肺收获(23.6±7)×106个细胞.原代培养的小鼠胎肺Ⅱ型细胞在12~24 h开始贴壁,在36~48 h呈指数生长,72 h后生长减缓,4~5 d左右细胞开始变形分化.免疫荧光鉴定胎肺Ⅱ型细胞表面活性蛋白C(SP-C)染色阳性,透射电镜观察到细胞内板层小体,细胞中proSP-C蛋白在培养48 h后表达较高.体外病毒转染成功,可见强烈荧光表达.成功建立了小鼠胎肺Ⅱ型上皮细胞的培养模型.(本文来源于《福建师范大学学报(自然科学版)》期刊2009年06期)
卢晓晔,黄中新,王樯[4](2000)在《小鼠胎肺发育中肺泡上皮细胞的电镜观察》一文中研究指出小鼠胚胎第 12天至生后 7天的肺组织 ,隔天取材 ,共 15例 ,常规电镜标本制作 ,透射电镜观察 ,探讨胎肺发育过程中肺泡上皮细胞的超微结构变化。观察结果表明 :胚胎第 12~ 14天 (相当于人胎肺的假腺期 )肺内均为管状 ;肺泡由形态相同的柱形细(本文来源于《解剖科学进展》期刊2000年01期)
卢晓晔,黄中新,王樯[5](1999)在《小鼠胎肺发育中肺泡上皮细胞的电镜观察》一文中研究指出小鼠胚胎第12天至生后7天的肺组织,隔天取材,共15例,常规电镜标本制作,透射电镜观察,探讨胎肺发育过程中肺泡上皮细胞的超微结构变化.观察结果表明:胚胎第12~14天(相当于人胎肺的假腺期)肺内均为管状“肺泡”,由形态相同的柱形细胞围成,核椭圆形,核膜平整,有1-2个核仁.细胞内含高尔基氏体、线粒体、粗面内质网和糖原.细胞表面有微绒毛,细胞之间有连结复合体.胚胎第16~18天,胞质内出现大量的糖原颗粒.胚胎第19天(相当于人胎肺的原始肺泡期),肺泡上皮细胞多为立方形,出现Ⅱ型肺泡细胞,其特征为表现有微绒毛,胞质内糖原减少,出现椭圆形板层小体,长约1~2μm,外有界膜,内含平行排列的板层,肺泡腔内偶可见板层小体.同时,肺内支气管上皮分化出纤毛细胞,其胞质电子密度低,纤毛的基粒处有线粒体.新生 1~4天,肺泡上皮仍以Ⅱ型细胞为主,Ⅱ型细胞内板层小体及线粒体数目增多,线粒体基质较致密.开始出现少量扁形的I型肺泡细胞.致新生7天,肺泡上皮才分化为以I型细胞为主.结论:胚胎18~19天以前胎肺内以形成结构分化为主,胚胎19天是Ⅱ型肺泡细胞分化的关键时期,而Ⅰ而型(本文来源于《解剖学研究》期刊1999年01期)
小鼠胎肺论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
微RNA (microRNA,miRNA)是一类在进化上高度保守、长度约20~24个核苷酸的小分子非编码RNA,能通过与靶基因3'非翻译区相结合,从而抑制靶基因的翻译或降解靶基因。Let-7 microRNA是发现较早的一类niRNA,最早在线虫上发现let-7能调控细胞分裂的时序。此后大量证据表明,let-7参与动物多个器官发育的调控过程,并与人类疾病发生密切相关。本研究利用real-time PCR技术检测了let-7家族8个成员在小鼠胚胎肺发育过程中的表达趋势,发现从小鼠假腺肺的前中期到囊状肺的前期,let-7家族8个成员均有表达,且表达量均持续升高,到囊状肺的中后期,其中let-7a、let-7d、let-7e、let-7f、let-7i五个家族成员表达量略有下降,let-7b、let-7c表达量没有明显变化、而let-7g表达量则有所升高。接着,本实验选取8个家族成员中表达丰度最高的let-7a和let-7d,利用原位杂交技术分析它们在小鼠胚胎肺发育过程中的表达模式,结果表明:let-7a和let-7d在小鼠胚胎肺的上皮和间充质中均有明显表达,且在肺芽远端上皮末梢中的表达较为强烈,到出生后叁天(P3),其在胚胎肺上皮和间充质中的表达减弱,这种表达趋势的变化与real-time PCR的结果相近。在此基础上,本实验通过构建pDC316-CMV-control、pDC316-CMV-let-7a以及pDC316-mCMV-mK-ras叁个腺病毒表达载体,并将其分别转染细胞,利用RT-PCR以及western blot的方法检测所构建的表达载体,实验结果表明,以pDC316-CMV-control作为对照组,pDC316-CMV-let-7a、pDC316-mCMV-mK-ras两个腺病毒表达载体在mRNA水平及蛋白质水平上均能实现体外过表达。本研究旨在为后期构建腺病毒,并在小鼠体内研究let-7 miRNAs与mK-ras基因负调控关系,及其参与调控哺乳动物胚胎肺发育的分子机制奠定基础。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
小鼠胎肺论文参考文献
[1].肖爱平.Bmprla过表达对小鼠胎肺发育的影响[D].福建师范大学.2013
[2].王虹.Let-7microRNA在小鼠胎肺发育时期的表达检测及其腺病毒穿梭质粒的构建[D].福建师范大学.2011
[3].张明凤,张彦定,王昕,王虹,张龙斌.小鼠胎肺Ⅲ型上皮细胞的分离纯化及原代培养[J].福建师范大学学报(自然科学版).2009
[4].卢晓晔,黄中新,王樯.小鼠胎肺发育中肺泡上皮细胞的电镜观察[J].解剖科学进展.2000
[5].卢晓晔,黄中新,王樯.小鼠胎肺发育中肺泡上皮细胞的电镜观察[J].解剖学研究.1999