抗生素次生代谢调控论文_李永泉,吴丹,岑沛霖,陈时飞,郑静

导读:本文包含了抗生素次生代谢调控论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:抗生素,霉菌,天蓝,基因组,基因,论文,ligation。

抗生素次生代谢调控论文文献综述

李永泉,吴丹,岑沛霖,陈时飞,郑静[1](2004)在《天蓝链霉菌抗生素次生代谢过程的调控因子研究进展》一文中研究指出天蓝链霉菌是抗生素代谢调控研究的模式菌株,它能产生十一烷基灵菌红素(Red)、放线紫红素(Act)、次甲霉素(Mmy)和CDA(Calcium-DependentAntibiotic)4种抗生素.详细介绍了抗生素生物合成基因簇中途径专一调控基因、形态分化基因、双组份信号传导基因以及其它一些重要的小分子物质对抗生素次生代谢的调控作用,并阐述了其相互协同调节的网络体系.(本文来源于《浙江大学学报(理学版)》期刊2004年04期)

李永泉[2](2003)在《天蓝链霉菌抗生素次生代谢调控的基因工程研究》一文中研究指出本论文研究了天蓝链霉菌(Streptomyces coelicolor)基因组DNA中抗生素代谢途径专一调控基因、双组分信号传导基因及A因子调节体系关联基因对十一烷基灵菌红素(Red)与放线菌紫素(Act)生物合成的影响;分析了这些基因对抗生素次生代谢过程的调控作用,通过将调控基因和萤光蛋白基因融合表达,观察了基因的时空表达模式。同时,还成功地建立了叁片段DNA和载体质粒一次性连接的4-way ligation技术并分析讨论了影响连接的主要因素,考察了同源双交换基因敲除进行基因定位突变的影响因素,建立了有效的突变株筛选方法。 根据天蓝链霉菌基因组DNA中抗生素十一烷基灵菌红素(Red)与放线菌紫素(Act)生物合成途径专一调控基因分别是actⅡ-orf4和redD的报道,以整合型质粒pSET1152为载体,将外源actⅡ-orf4和redD基因插入到天蓝链霉菌的基因组DNA上,分别获得了含双拷贝actⅡ-orf4和redD的基因突变株lyqAG1521和lyqRY1522。基因突变株的发酵动力学研究表明,lyqAG1521合成Act及lyqRY1522合成Red的能力分别提高了约40%,证实了actⅡ-orf4和redD拷贝数的增加有利于抗生素的生物合成,说明它们属于正调控基因。 采用同源双交换技术分别敲除了天蓝链霉菌染色体DNA中两组双组分信号转导基因ecrA1/ecrA2和ecrE/ecrF,获得了四个基因突变株lyqA2001、lyqA2002、lyqE2003和lyqF2004。发酵动力学试验表明,四个基因突变株合成抗生素Red的能力显着降低,而Act的生物合成水平只是略有降低,说明ecrA1/ecrA2和ecrE/ecrF对Red生物合成起强正调控作用,而对Act的生物合成只起到弱正调控作用。 A因子SCB1是天蓝链霉菌中的γ-丁内酯类化合物,SCB1的生物合成与scbR和scbA两个基因有关,scbA是A因子合成酶基因、scbR编码A因子的结合蛋白。采用同源双交换技术分别敲除了scbR和scbA基因,筛选得到了基因敲除突变株lyqSR2005(scbR)和lyqSA2006(scbA)。发酵动力学试验表明,lyqSA2006合成Red和Act的能力比对照株M145提高了8倍;而lyqSR2005合成这两种抗生素时间延后,产量却不如对照组。由于scbA基因敲除突变株不能合成产γ-丁内酯类化合物,而scbR基因敲除突变株不产A因子的结合蛋白,说明A因子对这 浙江大学博士学位论文两种抗生素的生物合成起强负调控作用,而A因子的结合蛋白的则有较弱的正调控作用。卜述研究表明,山S动乃尸及胡组成的A因子自我调节体系对抗生素次生代谢调二竹起着重要作用,是抗生素生物合成的开关基因。 应用激光共聚焦扫描显微镜及荧光蛋白基因融合技术观测了细胞生长过程中调节基因的时空表达规律。将Red与ACt生物合成途径专一调控基因二“/I一。厂辉和一l厂。必分别和荧光蛋白基因塔幼、已厂斥,融合成:。汀/--oI辉::明动和厂。跳:。,动,通过整合质粒整合到天蓝链霉菌的染色体DNA上。在S)1M液体培养基中的时间表达模式表明,二。必和a“jl侧刀d厂尹这两个基因是在菌体对数生长期到一平缓期的过渡期开始表达,而在平缓期大量表达;固体培养基中的空间表达模式表明,厂。朋和actll,厂脚的基因只在成熟的基内菌丝中表达,气生菌丝内不一表达。类似地,将A因子合成酶基因sc浏和编码A因子的结合蛋白基因、解与荧光蛋白基因融合,分别获得了含融合基因即动::sc解一sc胡::、巾的突变株并进行了时空表达研究,结果表明,液体培养时Lgc浏和scb刀是在菌体对数生长期和对数生长期和平稳期间的过渡期表达的,而在平稳期结束表达;固体培养基中的空间表达模式表明,夕cb尸和、bA基因与二。必和actll一‘,z,甲同样只在成熟的基内菌丝中表达,气生菌丝内不表达。这些抗生素调节基因的表达与间歇发酵时抗生素的合成曲线基本一致。(本文来源于《浙江大学》期刊2003-05-28)

抗生素次生代谢调控论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本论文研究了天蓝链霉菌(Streptomyces coelicolor)基因组DNA中抗生素代谢途径专一调控基因、双组分信号传导基因及A因子调节体系关联基因对十一烷基灵菌红素(Red)与放线菌紫素(Act)生物合成的影响;分析了这些基因对抗生素次生代谢过程的调控作用,通过将调控基因和萤光蛋白基因融合表达,观察了基因的时空表达模式。同时,还成功地建立了叁片段DNA和载体质粒一次性连接的4-way ligation技术并分析讨论了影响连接的主要因素,考察了同源双交换基因敲除进行基因定位突变的影响因素,建立了有效的突变株筛选方法。 根据天蓝链霉菌基因组DNA中抗生素十一烷基灵菌红素(Red)与放线菌紫素(Act)生物合成途径专一调控基因分别是actⅡ-orf4和redD的报道,以整合型质粒pSET1152为载体,将外源actⅡ-orf4和redD基因插入到天蓝链霉菌的基因组DNA上,分别获得了含双拷贝actⅡ-orf4和redD的基因突变株lyqAG1521和lyqRY1522。基因突变株的发酵动力学研究表明,lyqAG1521合成Act及lyqRY1522合成Red的能力分别提高了约40%,证实了actⅡ-orf4和redD拷贝数的增加有利于抗生素的生物合成,说明它们属于正调控基因。 采用同源双交换技术分别敲除了天蓝链霉菌染色体DNA中两组双组分信号转导基因ecrA1/ecrA2和ecrE/ecrF,获得了四个基因突变株lyqA2001、lyqA2002、lyqE2003和lyqF2004。发酵动力学试验表明,四个基因突变株合成抗生素Red的能力显着降低,而Act的生物合成水平只是略有降低,说明ecrA1/ecrA2和ecrE/ecrF对Red生物合成起强正调控作用,而对Act的生物合成只起到弱正调控作用。 A因子SCB1是天蓝链霉菌中的γ-丁内酯类化合物,SCB1的生物合成与scbR和scbA两个基因有关,scbA是A因子合成酶基因、scbR编码A因子的结合蛋白。采用同源双交换技术分别敲除了scbR和scbA基因,筛选得到了基因敲除突变株lyqSR2005(scbR)和lyqSA2006(scbA)。发酵动力学试验表明,lyqSA2006合成Red和Act的能力比对照株M145提高了8倍;而lyqSR2005合成这两种抗生素时间延后,产量却不如对照组。由于scbA基因敲除突变株不能合成产γ-丁内酯类化合物,而scbR基因敲除突变株不产A因子的结合蛋白,说明A因子对这 浙江大学博士学位论文两种抗生素的生物合成起强负调控作用,而A因子的结合蛋白的则有较弱的正调控作用。卜述研究表明,山S动乃尸及胡组成的A因子自我调节体系对抗生素次生代谢调二竹起着重要作用,是抗生素生物合成的开关基因。 应用激光共聚焦扫描显微镜及荧光蛋白基因融合技术观测了细胞生长过程中调节基因的时空表达规律。将Red与ACt生物合成途径专一调控基因二“/I一。厂辉和一l厂。必分别和荧光蛋白基因塔幼、已厂斥,融合成:。汀/--oI辉::明动和厂。跳:。,动,通过整合质粒整合到天蓝链霉菌的染色体DNA上。在S)1M液体培养基中的时间表达模式表明,二。必和a“jl侧刀d厂尹这两个基因是在菌体对数生长期到一平缓期的过渡期开始表达,而在平缓期大量表达;固体培养基中的空间表达模式表明,厂。朋和actll,厂脚的基因只在成熟的基内菌丝中表达,气生菌丝内不一表达。类似地,将A因子合成酶基因sc浏和编码A因子的结合蛋白基因、解与荧光蛋白基因融合,分别获得了含融合基因即动::sc解一sc胡::、巾的突变株并进行了时空表达研究,结果表明,液体培养时Lgc浏和scb刀是在菌体对数生长期和对数生长期和平稳期间的过渡期表达的,而在平稳期结束表达;固体培养基中的空间表达模式表明,夕cb尸和、bA基因与二。必和actll一‘,z,甲同样只在成熟的基内菌丝中表达,气生菌丝内不表达。这些抗生素调节基因的表达与间歇发酵时抗生素的合成曲线基本一致。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

抗生素次生代谢调控论文参考文献

[1].李永泉,吴丹,岑沛霖,陈时飞,郑静.天蓝链霉菌抗生素次生代谢过程的调控因子研究进展[J].浙江大学学报(理学版).2004

[2].李永泉.天蓝链霉菌抗生素次生代谢调控的基因工程研究[D].浙江大学.2003

论文知识图

一13基因敲除突变株形态变化一4双组份信号传导调节体系一5质粒pSET1521andpSET1522酶切消化后...一6突变株基因组DNAPCR产物的琼脂糖凝胶...2.丨3以未处理组为参照的聚类分析图...一10激光共聚焦扫描显微镜检侧基因突变...

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