人参愈伤组织细胞论文-任琦

人参愈伤组织细胞论文-任琦

导读:本文包含了人参愈伤组织细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:人干扰素α2b,霍乱毒素B亚单位,融合蛋白,人参愈伤组织细胞

人参愈伤组织细胞论文文献综述

任琦[1](2009)在《人参愈伤组织细胞表达CTB-hIFN-α2b融合蛋白的研究》一文中研究指出人干扰素α2b(hIFN-α2b)具有多种生物学功能,包括广谱抗病毒、抑制肿瘤细胞增殖和免疫调节的作用,在临床上主要用于治疗病毒性肝炎及肿瘤性疾病。目前,临床应用的干扰素制剂主要是从大肠杆菌表达系统获得的基因工程重组蛋白,并以注射给药为主。由于干扰素在血液中的半衰期短,静脉注射后很快从血中消失,故很难维持较高的血药浓度,在临床应用上只能以提高用药频率和用药量来解决,这样就很容易诱发干扰素抗体的产生及增加毒副作用。因此,如何改进给药途径是其开发的一个重要方向。霍乱毒素B亚单位(CTB)是霍乱毒素的无毒结合亚基,具有载体蛋白的特性,并且由于CTB本身具有很强的免疫原性,能剌激血液和肠道产生特异性保护抗体,与其他抗原共同使用还具有免疫佐剂的作用,能增强抗原蛋白的免疫效力和免疫特异性。人参是一种珍贵的药用植物,具有独特的营养和药用价值。近年来,利用转基因植物作为生物反应器生产药用蛋白正得以深入研究,多方面的报道证明植物可以高水平表达具有功能的重组蛋白质。在本研究中,我们构建了含有霍乱毒素B亚单位与人干扰素α2b融合基因片段的植物细胞表达载体,选择人参愈伤组织细胞作为生物反应器,利用农杆菌介导的转化法将融合基因导入人参愈伤组织细胞,得到了能够同时表达hIFN-α2b和CTB的转基因人参愈伤组织细胞系。为建立以人参愈伤组织细胞作为生物反应器生产口服药用蛋白奠定了基础,并为药用蛋白和药用植物的联合应用开辟了一条新思路。(本文来源于《吉林大学》期刊2009-12-01)

田鹏玮,刘同祥,杨芳,孙颖,张宗申[2](2009)在《草酸促进人参愈伤组织细胞生长和人参多糖与皂苷积累的研究》一文中研究指出目的研究草酸在光照和不同温度条件下对人参愈伤组织细胞生长及次生代谢物质积累的影响。方法利用人参悬浮细胞培养体系,通过改变培养条件和在培养基中添加草酸,通过一定时间的培养后检测细胞增长和次生代谢成分的积累。结果光照和培养温度对草酸的诱导效果有很大影响,其中在12 h/d的光照下,0.01~1 mmo.lL-1的草酸对细胞生长和皂苷积累都有促进作用,而10 mmo.lL-1的草酸对多糖积累有促进作用;在4个温度(22,24,26和28℃)水平下,随着培养温度的升高,添加草酸对细胞生长的抑制作用增强,但有利于多糖和皂苷的积累。结论在使用草酸作为诱导子时,选择合适的培养温度和光照条件有利于培养细胞的生长和次生代谢物质积累。(本文来源于《时珍国医国药》期刊2009年09期)

汪春义,戚凤春,陈桂玲,申镇维,王宣军[3](2008)在《表达人胰岛素的人参愈伤组织细胞系的建立》一文中研究指出1.表达载体的转化及与人参愈伤组织细胞的共培养将表达载体pBI 121/(CTB-BA)转化至感受态农杆菌LBA4404中,加入YEP培养基,于28℃培养4~5 h,涂布在含卡那霉素的YEP固体培养基上。28℃培养1~2 d,形成单菌落。挑单菌落接种于YEP培养基中,经AB、AB-AS和67V-AS培养基培养后,重悬菌体。再将重悬菌(本文来源于《吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集》期刊2008-12-01)

于海鹏[4](2008)在《人参愈伤组织细胞表达HBsAg-rhIFNα-2b融合蛋白的研究》一文中研究指出乙肝病毒表面抗原(HBsAg)基因已相继在大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞和昆虫杆状病毒体系中表达。其中产业化的有酵母和CHO系统两种。由于这两种系统表达的HBsAg制备的疫苗仍然有5-10%的人群不产生抗体,因此,人们一直在探索能够更有效刺激机体产生HBsAg抗体的新型疫苗。重组人干扰素α-2b(rhIFNα-2b)是治疗乙肝最有效的药物,在人参细胞中表达其与HBsAg的融和蛋白做为抗原,借助人参皂甙的免疫增强作用,有可能使机体产生更强的细胞免疫和体液免疫,并获得治疗性乙肝疫苗。本研究构建了携带HBsAg-rhIFNα-2b融合基因的植物细胞表达载体,采用农杆菌感染方法将其整合到人参愈伤组织细胞的染色体上,得到了能够表达HBsAg-IFNα-2b融合蛋白的人参愈伤组织细胞系(150)。在试验中还建立了固体和液体培养两种培养系统。该细胞系不仅可以表达HBsAg-IFNα-2b融合蛋白,而且可以产生具有增强疫苗免疫效果作用的人参皂甙。本研究获得的基因工程乙肝疫苗无需纯化,也不用额外添加疫苗佐剂,直接免疫小鼠和家兔就能够产生有效的免疫应答。转基因植物组织细胞作为生物反应器具有广阔的应用前景。本研究为利用植物组织培养技术表达和生产医用重组蛋白提供了技术平台,为其它珍稀药用植物的开发利用、组织培养及表达重组蛋白奠定了坚实基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2008-10-01)

汪春义,戚凤春,陈桂玲,申镇维,王宣军[5](2007)在《表达人胰岛素的人参愈伤组织细胞系的建立》一文中研究指出目的建立表达人胰岛素的人参愈伤组织细胞系。方法将已构建成的植物表达载体pBI121/(CTB-BA)转入农杆菌LBA4404中,通过农杆菌与人参愈伤组织细胞的共培养,将人胰岛素基因整合到人参愈伤组织细胞中,对其表达产物进行检测,并用小鼠进行降糖试验。结果表达产物的基因组DNA测序结果与设计完全相同。Westernblot检测显示,在相对分子质量约17000处有特异蛋白反应带。ELISA法检测人胰岛素表达量为5.31μIU/ml。小鼠降糖试验表明人参愈伤组织细胞有降血糖的作用,而转化的人参愈伤组织细胞降血糖作用更明显。结论人胰岛素已在人参愈伤组织细胞中成功表达。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2007年11期)

任琦,盛军,任志霞[6](2006)在《人干扰素基因植物表达载体的构建及其在人参愈伤组织细胞中的表达》一文中研究指出目的:利用组织培养人参愈伤组织细胞表达人干扰素,探讨用植物细胞表达人类基因的可行性。方法:用PCR从pBV889扩增人干扰素α2b(hIFN-α2b)编码基因,将其克隆于pMD18-T载体和pBI121,进而构建植物细胞表达载体pBIFN。用冻融法将pBIFN导入根瘤农杆菌LBA4404,经卡那霉素和利福霉素筛选后利用农杆菌介导的转化法将hIFN-α2基因导入人参愈伤组织细胞。经G418筛选,形成阳性细胞。用PCR、RT-PCR、Western blot和WISH/VSV系统检测转基因组织。结果:经PCR检测表明hIFN-α2b基因已成功整合到人参愈伤组织细胞基因组中。RT-PCR证明存在hIFN-α2b基因的转录产物。Western blot分析表明转基因人参愈伤组织细胞能有效表达hIFN-α2b蛋白。WISH/VSV系统检测分析表明表达的hIFN-α2b具有生物学活性。结论:本研究利用转基因人参愈伤组织细胞成功地表达了人干扰素,为进一步提高口服干扰素的疗效打下基础。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2006年09期)

吉海滨[7](2005)在《人参愈伤组织细胞表达人干扰素α 2b的研究》一文中研究指出目前,干扰素是国际上公认的治疗乙肝和丙肝以及部分肿瘤的首选药物,动物试验表明,口服干扰素具有较好的应用前景。本研究拟用人参愈伤组织表达干扰素期望为进一步提高口服干扰素的疗效打下基础。我们应用PCR 和:DNA 重组技术构建出含有人干扰素a 2b 基因的植物细胞表达载体pBIFN,然后转化根癌农杆菌LBA4404,利用农杆菌介导的转化法将人干扰素a 2b 基因导入人参愈伤组织细胞并整合到其基因组中。用G418 培养基筛选出抗性细胞株;以筛选的抗性细胞DNA 为模板进行:PCR,产物经DNA 测序表明人干扰素a 2b 基因已成功整合到人参愈伤组织细胞基因组中;经用RT-PCR.和琼脂糖凝胶电泳证明存在人干扰素a 2b 基因的转录产物;用WISH-VSV 系统检测分析表明表达的人干扰素a 2b 具有一定的生物学活性。说明我们已成功构建了含有人干扰素a 2b 基因的植物细胞表达载体并通过农杆菌介导的转化方法获得了能够表达人干扰素a 2b 的转基因人参愈伤组织细胞。(本文来源于《吉林大学》期刊2005-06-01)

盛唯瑾[8](2005)在《人参愈伤组织细胞系表达乙肝病毒表面抗原的研究》一文中研究指出为了能够获得更加经济、高效、安全的乙肝疫苗,本实验室运用根瘤农杆菌转染的方法,将乙肝表面抗原(HBsAg)基因转入人参愈伤组织细胞,筛选出稳定生长的转化体细胞,命名为CS83 细胞系。本研究分别应用ELISA、Western blotting 和免疫组织化学的方法,对CS83 细胞表达的HBsAg 进行了鉴定和细胞内定位。小鼠的注射免疫和家兔的口服免疫实验都证明,该细胞系表达的HBsAg 在动物体内能有效地诱导免疫应答,产生特异性抗体。同时发现,人参愈伤组织细胞内可能存在着某些能起到免疫佐剂作用的物质。在优化CS83 细胞固体培养条件的同时,进行了细胞的液体化培养,建立起了分散程度较好的悬浮细胞系,为CS83 细胞的工业化生产奠定了基础。本研究为利用植物组织培养技术生产医用蛋白提供了技术平台,为其他药用植物的开发利用奠定了坚实的基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2005-05-01)

丁葆祖,柏淑华,吴逸,杨静仪[9](1983)在《人参愈伤组织细胞亚显微结构的研究》一文中研究指出近年来,对于人参及其他药用植物的组织培养做了不少工作,但是对愈伤组织细胞的特点研究的较少。本工作是为配合人参细胞培养进行的。通过比较观察,研究人参愈伤组织细胞亚显微结构与愈伤组织形态特征之间的关系。材料与方法材料取自5年生人参鲜根和茎切段诱导的愈伤组织。每隔30—40天转移一次进行继代培养。根愈伤组织经16次继代培养,茎经6次继代培养。转移前取样。培养基 Ms,补加0.5 mg/1 2,4-D。将供试愈伤组织按其形态特征分为5种类型。1淡黄白色,新鲜,(本文来源于《Journal of Integrative Plant Biology》期刊1983年03期)

人参愈伤组织细胞论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的研究草酸在光照和不同温度条件下对人参愈伤组织细胞生长及次生代谢物质积累的影响。方法利用人参悬浮细胞培养体系,通过改变培养条件和在培养基中添加草酸,通过一定时间的培养后检测细胞增长和次生代谢成分的积累。结果光照和培养温度对草酸的诱导效果有很大影响,其中在12 h/d的光照下,0.01~1 mmo.lL-1的草酸对细胞生长和皂苷积累都有促进作用,而10 mmo.lL-1的草酸对多糖积累有促进作用;在4个温度(22,24,26和28℃)水平下,随着培养温度的升高,添加草酸对细胞生长的抑制作用增强,但有利于多糖和皂苷的积累。结论在使用草酸作为诱导子时,选择合适的培养温度和光照条件有利于培养细胞的生长和次生代谢物质积累。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

人参愈伤组织细胞论文参考文献

[1].任琦.人参愈伤组织细胞表达CTB-hIFN-α2b融合蛋白的研究[D].吉林大学.2009

[2].田鹏玮,刘同祥,杨芳,孙颖,张宗申.草酸促进人参愈伤组织细胞生长和人参多糖与皂苷积累的研究[J].时珍国医国药.2009

[3].汪春义,戚凤春,陈桂玲,申镇维,王宣军.表达人胰岛素的人参愈伤组织细胞系的建立[C].吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集.2008

[4].于海鹏.人参愈伤组织细胞表达HBsAg-rhIFNα-2b融合蛋白的研究[D].吉林大学.2008

[5].汪春义,戚凤春,陈桂玲,申镇维,王宣军.表达人胰岛素的人参愈伤组织细胞系的建立[J].中国生物制品学杂志.2007

[6].任琦,盛军,任志霞.人干扰素基因植物表达载体的构建及其在人参愈伤组织细胞中的表达[J].中国免疫学杂志.2006

[7].吉海滨.人参愈伤组织细胞表达人干扰素α2b的研究[D].吉林大学.2005

[8].盛唯瑾.人参愈伤组织细胞系表达乙肝病毒表面抗原的研究[D].吉林大学.2005

[9].丁葆祖,柏淑华,吴逸,杨静仪.人参愈伤组织细胞亚显微结构的研究[J].JournalofIntegrativePlantBiology.1983

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